Методика определения фактора dea 1.1 крови собак. Сколько групп крови у собак, какие существуют и есть ли вообще как таковые. Подробно и доступно. Материал для переливания

Многие хозяева кошек считают, что если их любимица не гуляет на улице и не контактирует с другими животными, то вакцинация ей не нужна. Это заблуждение. Вакцинация кошек – это важно, и нужно подойти к этому вопросу с максимальной ответственностью.

Вирусы незаметны и вездесущи. Кошка может заразиться на улице, где бегают больные бродячие кошки, естественные выделения которых попадают в почву. На одежде или обуви человек может принести эту инфекцию в дом. Возможностей заразить свою любимицу масса, иногда достаточно принести с улицы просто пучок свежей травы и этого будет достаточно. Насекомые и блохи тоже переносят некоторые заболевания.

Что уж говорить о кошках свободного выгула. У них риск заразиться значительно выше. Это и ежедневный контакт с сородичами, и охота на птиц и мышей, что могут быть переносчиками бешенства – заболевания со 100% смертельным исходом.

Поэтому вакцинировать нужно кошек любого содержания. Не только живущих в загородных домах с доступом на улицу, но и самых домашних мурок тоже.

Вакцина – что это?

Вакцина – это препарат с ослабленными или убитыми вирусами, который вводится в организм животного с целью выработки иммунитета. Вводятся такие ослабленные и убитые вирусы в количестве достаточном для выработки антител, но недостаточном для того, чтобы вызвать заболевание. Организм таким образом учится распознавать и убивать возбудителей болезней и при настоящем заражении уже будет готов защищаться.

Чем прививать?

Различают прививки для кошек двух видов:

• 1 моновакцина – состоит из одного компонента, даёт иммунитет от одного заболевания;
• 2 поливакцина – даёт иммунитет от нескольких болезней.

Чаще прививают поливакцинами, но есть и приверженцы раздельной вакцинации, которая переносится легче.

Вакцины бывают двух видов – «живые» и «мёртвые»

Живые , обеспечивают более сильный и длительный иммунитет, но используются довольно редко. Содержат живой вирус ослабленный, утративший способность вызывать заболевание, но не утративший способность размножаться.

Прививая живой вакциной, следует помнить о таких моментах:

• 1 спонтанные мутации вируса в организме кошки. Животное может заболеть по-настоящему.
• 2 совмещение инфекции с «диким» вирусом, что очень опасно для жизни питомца, хоть и встречается очень редко.
• 3 ослабленная иммунная система может привести к заболеванию.

Важно правильно хранить живые вакцины. Комнатная температура и нарушение целостности упаковки ведёт к гибели препарата.

Вакцины мёртвые (инактивированные) содержат убитый микроорганизм или его части. И антитела вырабатываются на то небольшое количество микроорганизмов, что были введены, ведь размножиться они не могут. Поэтому мёртвые вакцины безопасны, но вырабатывают менее продолжительный и эффективный иммунитет. Поэтому их прививают двукратно. Но дополнительные химические вещества, добавляемые в такую вакцину, могут вызывать серьёзные побочные реакции.

Сроки вакцинация котёнка и взрослой кошки

Вы хотите сделать прививку своей персидской кошке? А может у вас британский короткошерстный или шотландский вислоухий котёнок и стоит вопрос о вакцинации? Или голый сфинкс? А может это здоровяк мейн-кун или утончённая сиамская кошечка?

На самом деле порода в этом вопросе не играет особой роли. Но ваша породистая кошка-мама, скорее всего, была привита, а значит, вместе с молозивом передала этот иммунитет потомству. Материнский иммунитет «работает» до 12-15 недельного возраста малышей. В таком случае котят начинают вакцинировать с двенадцати недель. Если сделать это раньше, то с инфекцией справятся антитела, доставшиеся от матери, а своего иммунитета котёнок не выработает. Если позже 20-ти недель, то велик риск, что малыш за это время заразится сам.

Уличным же котятам и от невакцинированных домашних кошек, прививки делают начиная с 8 недель. Повторно прививать в обоих случаях следует через 3-4 недели после введения первой вакцины.

С 5 до 8 месяцев у маленьких котят меняются зубы. В этот период вакцинацию проводить крайне нежелательно, организм котёнка и так ослаблен, он может действительно заболеть. Период смены зубов длится с 4-5 месяцев и до 6-8 месяцев.

Если вы впервые решили сделать прививку уже взрослой кошке, то достаточно будет единоразового введения препарата, без повтора через от 3 до 4 недель. Ревакцинация тогда раз в год.

Нужно подгадать так, чтобы привить кошку за месяц до вязки. Тогда в период выделения молозива содержание антител в молозиве у матери будет максимальным.

Отдельно стоит рассмотреть сроки . От этой болезни котят прививают одноразово, без ревакцинации. Желательно первую прививку ставить не раньше 3 месяцев. Некоторые ветеринары утверждают, что не раньше 6 месяцев, но в этот период меняются зубы. Оптимальный возраст для первой постановки прививки от бешенства с 3 до 4 месяцев, или с 8 месяцев и до года. Ревакцинация проводится раз в год.

Дегельминтизация кошек

Основным подготовительным моментом перед вакцинацией является дегельминтизация. Известно, что прививают только здоровых животных, а глистная инвазия – это болезнь.

В процессе своей жизнедеятельности глисты выделяют токсины. Это отравляет организм и значительно снижает иммунитет котёнка. Прививки для кошек при наличии глистов являются малоэффективными, ведь в ослабленном организме просто невозможна выработка достаточного количества антител к антигенам вакцины.

Так за сколько дней до вакцинации глистогонить кошку? Прививка делается не раньше чем через 10 дней после дегельминтизации, которая проводится двукратно. После первого приёма препарата гибнут взрослые половозрелые особи, а их яйца остаются в организме. И через 10-14 дней из них появляются молодые неполовозрелые особи, которые убиваются вторым приёмом антигельминтика.

Таким образом, котёнку дают глистогонное, а через 10 дней повторяют приём препарата. А ещё через 10 дней можно идти прививаться.

Прежде чем дать кошке противоглистный препарат обязательно внимательно прочитайте инструкцию. Стоит строго высчитать дозировку относительно веса вашего животного.

Существуют периоды, когда прививки для кошек могут быть противопоказаны .

Перед вакцинацией животное должно быть осмотрено ветеринаром и признано здоровым. Больных животных не прививают. Обязательно измеряется температура. Даже если кошка немного апатична и у неё накануне прививки испортился аппетит, лучше обождать и понаблюдать за любимицей. Ведь вакцинированное в инкубационном периоде болезни животное может заболеть и умереть.

• 1 Не делают прививки котятам в период смены зубов, с 4 до 7-8 месяцев.
• 2 Не прививают беременных и кормящих кошек, это может отрицательно сказаться на потомстве.
• 3 Не вакцинируют животных в послеоперационном периоде и периоде реабилитации. После курса антибиотиков должно пройти не менее 2 недель перед прививкой.
• 4 Кошек, контактировавших с больными или с подозрением на болезнь животными тоже не стоит спешить вакцинировать.

Прорыв вакцинального иммунитета

Когда животное заболевает, несмотря на вакцинацию, то говорят о прорыве иммунитета. Такое может случиться через несколько недель после прививки, в период предполагаемого иммунитета.

Наиболее частые причины:

• 1 несоблюдение графика вакцинации;
• 2 неправильное хранение вакцины;
• 3 подавление вакцины материнскими антителами. Если котёнка рано привили и он имел высокий уровень материнских антител;
• 4 кошка уже была больна. Вакцина не защищает от развития заболевания у инфицированных животных;
• 5 стрессовый фактор;
• 6 неполноценный и несбалансированный рацион питомца.

От каких болезней существуют прививки для кошек

Многие комплексные вакцины содержат в себе прививки для кошек от трёх самых распространённых заболеваний: ринотрахеита, кальцивироза и панлейкопении . Вакцинация от этих заболеваний очень рекомендована, так как эти инфекции являются смертельно опасными для кошек.

Существуют прививки против хламидиоза (иногда бывает включена в комплексную), инфекционного перитонита, вируса кошачьего иммунодефицита, бордетеллёза, лямблиоза . От этих заболеваний вакцинируют в основном тех животных, которые подвержены высокому риску заражения и в хозяйствах с несколькими кошками.

Прививки для кошек от лишая имеют скорее лечебное действие, а не профилактическое. Известны случаи заболевания животного лишаем после прививки, так как такая вакцина «живая».

Прививка от бешенства

Бешенство плотоядных – вирусное заболевание с летальным исходом, которое может передаваться человеку. Заражение происходит через слюну инфицированного животного. И если для людей существуют препараты, которыми можно предотвратить заболевание после укуса бешеного животного, то для кошек такого лекарства не существует. Заболевшее не привитое от бешенства животное умирает.

30 Января 2015

Бешенство является вирусной смертельно опасно болезнью, как для людей, так и для животных.

Бешенство передается при попадании слюны больного животного через укус, а также через раны и царапины. Вирус может проникнуть через небольшое повреждение на коже или слизистых оболочках, причем, чем ближе к голове произошло заражение, тем быстрее развивается болезнь. Причина кроется в том, что вирус бешенства губит нервные клетки головного мозга, распространяясь по нейронным путям. Специфическое воспаление мозга приводит к появлению признаков бешенства: слюнотечению, водобоязни, светобоязни и галлюцинациям.

Кошки, как и другие плотоядные, могут заразиться бешенством от больного животного, и передать заболевание своим хозяевам. Именно по причине высокой опасности для человека, бешенство является карантинным заболеванием, иммунизация от которого обязательна для всех кошек и собак. Профилактика бешенства проводится ежегодно, причем можно прививать животное вакциной против бешенства или моновакциной «НОБИВАК R », «РАБИЗИН » или комплексными препаратами в сочетании с вирусами «НОБИВАК TRICAT Trio », «КВАДРИКАТ».

Симптомы бешенства

Привить от бешенства можно только здоровое животное. Если питомец на свободном выгуле, то он находится в опасности и может подвергнуться нападению вирусоносителя даже на своей территории.

Инкубационный период бешенства составляет от 2 недель до нескольких месяцев. Насколько быстро проявятся симптомы заболевания, сказать невозможно. Это зависит от количества вируса, попавшего в кровь, и спрособа заражения.

Первым признаком бешенства может стать изменение поведения: кошка становится необычайно ласковой, навязчивой, она постоянно стремится лизнуть хозяина. В это время заражение человека уже может произойти, если имеются даже небольшие повреждения кожи. Одновременно наблюдается некоторое ухудшение общего состояния, появляется вялость, расстройство кишечника.

В следующие несколько дней вирус поражает нервную систему, появляются косоглазие, параличи, спазмы глотательных мышц. Кошка не может закрыть пасть, заглатывает несъедобные предметы, может проявляться водобоязнь. Агрессия к окружающим ее предметам проявляется особенно ярко: во время приступа животное кусает и грызет все подряд, судорожно бежит, после чего падает без сознания. Очень скоро наступает смерть.

Срочные меры

Если кошка ведет себя несколько необычно, особенно если она имеет возможность свободно выходить за пределы квартиры или дома, то желательно срочно посетить ветеринарную клинику.
Анализ на бешенство существует, но обычно не проводится, так как отрицательный результат не гарантируют отсутствие заболевания. Поэтому при подозрении на бешенство ветеринарный врач оставляет животное на карантин и наблюдает за симптомами. Если врач поймет, что кошка больна не бешенством, то ей будет оказана помощь. В противном случае ветеринар ждет гибели животного для исследования тканей головного на наличие телец Бабеши-Негри и постановки диагноза «БЕШЕНСТВО». Владельцу обязательно необходимо обратится в поликлинику и пройти курс антирабических уколов или уколов от бешенства.

Следует отметить, что лечение бешенства запрещено, так как велик риск заражения персонала ветеринарной клиники.

Прививка от бешенства

Защитить животное может только вакцина от бешенства, предназначенная специально для кошек с трехмесячного возраста. Препарат вводится однократно, с периодичностью в двенадцать месяцев, устойчивость к заражению наступает после вакцинации через две недели. После прививки от бешенства не рекомендуется мыть животное в течение недели.

Вакцинация от бешенства для кошек необходима и в том случае, если питомец посещает выставки, выезжает за город, свободно гуляет на улице или собирается отправиться в поездку на общественном транспорте. Отметка о прививке ставится в международный ветеринарный паспорт, являющийся официальным документом для получения справки в ветеринарной станции. На законодательном уровне в РФ закреплено положение об обязательной иммунизации всех плотоядных животных. Для ввоза на территорию РФ и для выезда за границу Федерации, требуется отметка о прививке в обязательном порядке. В Москве прививку от бешенства можно сделать в ветеринарной клинике по адресу: Октябрьский переулок, д. 5.

George Lubas DVM Университет Пизы, Италия

Джордж Любас является доцентом по Сравнительной клинической гематологии Института специальной Патологии и Ветеринарной Клинической Медицины Университета Пизы, Италия.

Резюме

• Собаки редко обладают высоким титром естественно возникающих антител против эритроцитов.
• Реакции на первое переливание крови у собаки являются редкими.
• Доноры крови для собак должны по меньшей мере иметь негативную реакцию на DEA 1 антиген.
• Кошки с группой крови В встречаются редко, но они очень часто имеют высокие уровни естественно возникающих антител к А-антигену.
• Несовместимые трансфузии у кошек могут вызвать острые реакции.
• При трансфузиях у кошек очень важно определить группы крови и выполнить перекрестные пробы на совместимость.

Введение

Лечение переливанием крови в ветеринарии за последние годы пережило быстрый рост, особенно у домашних животных, и некоторые исследования документально подтвердили его пользу при ряде гематологических заболеваний. Много обзоров было опубликовано по смежным темам: таким как группы крови у собак и кошек, иммуногематологичсские характеристики как у собак, так и у кошек: показания к переливанию крови; этические и клинические исследования, касающиеся животных-доноров; производство и хранение препаратов крови (1,3, 4, 6, 7) .

Иммуногематологические особенности у собак

С тех пор как в 50-х годах были опубликованы первые исследования в этой области, у собак было определено несколько групп крови. Номенклатура групп крови отражает расхождение мнений нескольких авторов, участвовавших в этих исследованиях, и в настоящее время равнозначно применяются две различные классификации:

• DEA = Эритроцитарный Антиген Собаки (напр. DEA 1).
• Заглавная буква для системы и строчная отдельная буква для фактора (напр.. Са). Иногда прибавляется номер для подтипа (напр., Аа1).

Антигены различных групп крови распознаются специфическими антителами в результате прямых или непрямых реакции (т. с. антиглобулинового теста) агглютинации и гемолиза. Некоторые из этих реакций могут проходить только при определенных температурах (напр., 4°С, 25°С или 37°С). Распределение различных групп крови по породам не изучено в деталях, хотя и сообщалось, что грейхаунды имели очень низкую частоту проявления антигенов DEA 1.1 и 1.2 (2, 6, 9) (Таблица 1).

ТАБЛИЦА 1. Характеристики групп крови у собак

Номенклатура				Тип реакции для определения антител			Частота появления реакции у собак смешанных пород
				Агглюти нация	Антиглобулин

Выбранный метод; (+) = альтернативный метод; - = нет реакции.

Очень немногие группы крови определены как значимые для лечения трансфузией, хотя группы DEA 1.1, 1.2 и 7 являются наиболее распространенными антигенными факторами. У собак, как признано, естественно возникающие антитела являются очень редкими и, если они присутствуют в сыворотке, то в низких титрах или вступают в реакцию при температурах, отличных от температуры тела. На самом деле только около 15% собак демонстрируют естественно возникающие антитела к DEA 3, 4, 5 и 7. Появление таких естественно возникающих антител не следует путать с приобретенными антителами к группам крови. Первые нс связаны с каким-либо проявлением иммуностимуляции, в то время как при последних имеется мощная иммунная реакция, вызванная, например, переливанием несовместимой крови (2,6,9).

Именно вследствие этих иммуногематологических особенностей крайне редко встречается реакция на первую трансфузию при переливании собаке несовместимой крови (2,3,6,9).

Иммуногематологические особенности у кошек

Главная группа крови у кошек обозначается как АВ и состоит из трех типов крови. Ее серологические и антигенные характеристики показаны в Таблице 2 . Недавно была определена биохимическая структура групповых антигенов кошачьей крови. Они представляют собой гликолипиды и гликопротеины, которые отличаются компонентом нейраминовой кислоты (6-8).

ТАБЛИЦА 2. Характеристики системы группы крови АВ у кошки (2, 3, 7, 8)

Эритроциты			Антисыворотки	Характеристика естественных антител в сыворотке Тип Частота Титр		Частота Антигена
					редкая 1:2 ± 1:4 низкая
					Высокая 1:128 высокая
АВ АВ/АВ пол.					Отсут. отсут.

Группа крови (фенотип) А- В- никогда не был найден.
пол. = положительная; отр. = отрицательная

Группа крови А представлена в основном в популяциях домашних коротко- и жесткошерстных кошек. Эти кошки очень редко имеют в своей сыворотке высокие уровни естественно возникающих антител. Напротив, кошки с группой крови В встречаются редко, зато очень часто имеют в сыворотке высокие уровни естественно возникающих антител к А-антигену. Заметные различия в частоте этих групп крови могут возникать в популяциях породистых кошек, где на распределение групп крови повлияли методы селективного разведения пород (Таблицы 3 и 4) (6-8).

ТАБЛИЦА 3. Система группы крови АВ у домашних короткошерстных и длинношерстных кошек (8)

	Число тестированных кошек	Группа А (%)	Группа В (%)
Финляндия
Германия
Голландия
Шотландия
Швейцария
Австралия

* Включают процент кошек А+ В+: Голландия =1%, Австралия =0,4% Япония =9,7%.

ТАБЛИЦА 4. Система группы крови АВ у некоторых породистых кошек (8)

		Число тестированных кошек	Группа А (%)	Группа В (%)
Абиссинская
Бирманская
Британская короткошерстная
Девонский Рекс
Гималайская
Персидская
Шотландский фолд
Сиамская
Сомалийская
Тонкинская
А- В-кошки никогда не были обнаружены.

Есть и практические последствия этих иммуногематологических особенностей у кошек: если переливается перекрестно-совместимая кровь, продолжительность жизни эритроцитов у реципиента составляет около 4-5 недель. Если же используется несовместимая кровь, то продолжительность жизни эритроцитов может упасть от нескольких часов до нескольких дней. Кроме того, несовместимые трансфузии могут вызвать острую реакцию, особенно тяжелую, если эритроциты группы крови А вводятся кошкам группы крови В даже в первый раз (6-8).

Общие показания к переливанию крови

Переливание крови может быть полезным при некоторых гематологических заболеваниях. Основные показания, в порядке значимости и современного применения, следующие (3,4, 6-8):

• Острая кровопотеря.
• Острая гемолитическая анемия.
• Невосстанавливающаяся анемия с гематокритом (PCV) между 12 и 15%.
• Наследственная или приобретенная коагулопатия
• Тромбоцитопения/патия
• Лейкопения
• Гипопротеинемия (при ограничениях для применения плазмы).

Параметры, которые подтверждают необходимость срочной трансфузии (3,4,6-8):

• Быстрое уменьшение циркулирующего объема (< 30%)
• PCV менее чем 20% или 15% (соответственно для собаки и кошки)
• Непрерывное кровотечение или гемолиз
• Плохая реакция на традиционное лечение
• Бледные слизистые оболочки
• Повышенное время заполнения капилляров (> 2 секунд).
• Тахикардия
• Тахипноэ

При оценке потребности в трансфузии клиницист должен принимать во внимание некоторые другие факторы (3,4,6-8):

• Степень анемии и скорость кровопотери.
• Реакцию костного мозга, определенную посредством подсчета ретикулоцитов в мазках периферической крови или аспиратах костного мозга.
• Причину анемии, которая дала бы ценные прогностические указания.

При ветеринарии необходимо также принимать в расчет этику и закон о защите донора, оснащение соответствующими инструментами для сбора и введения крови. В конце концов не следует пренебрегать и экономическими соображениями относительно применяемых веществ и профессионального надзора над их введением (3, 6-S).

Совсем недавно более пристальное внимание стали уделять аутологичной трансфузии. Эта процедура исключает любую опасность неблагоприятной иммуногематологической реакции или передачи заболевания и может быть использована во время большой полостной операции. Кровь извлекается из полостей тела и повторно вводится в кровеносную систему с помощью соответствующих фильтровальных устройств. Также возможно взять кровь за 2-3 недели до ожидаемой операции, хранить ее соответствующим образом и, если это необходимо, вводить ее по ходу операции (3, 6,7).

Выбор донора и сбор крови

Собака-донор должна соответствовать следующим требованиям (1,3, 5-7):

• Вес свыше 25 кг.
• Возраст от 2 до 8 лет.
• Спокойный характер.
• PCV выше40%.
• Регулярная вакцинация против основных инфекционных болезней, таких, как чума, инфекционный гепатит, лептоспироз, парвовирусная инфекция и бешенство.
• Клинически здорова (рекомендуется полный подсчет форменных элементов крови и исследование ее биохимического профиля).
• Контроль на некоторые инфекционные заболевания в зависимости от географической местности (бабезиоз, лейшманиоз, эрлихиоз, боррелиоз, бруцеллез и дирофиляриатоз).
• Исключаются группы крови DEA 1.1,1.2 (А) или DEA 7 (Тг), хотя есть сомнение, является ли DEA 7 значимым в реакциях на трансфузию.
• Не должно быть естественно возникающих изоантител к эритроцитам в сыворотке.
• Собаке должна быть сделана обычная коагулограмма, потому что донорская кровь может стать источником тромбоцитов и факторов коагуляции.

Кровь обычно берется из яремной вены асептическим способом (место взятия крови должно быть выстрижено и хирургически обработано). Взятое количество не должно превышать 20 мл/кг при максимальной частоте 1 раз в три недели. Постоянным донорам следует давать добавку железа в виде 10 мг/кг сульфата железа ежедневно. Рекомендуется применять коммерческие наборы для взятия крови, такие как пластиковые мешки из поливинилхлорида (PVC), предварительно наполненные цитратом фосфата декстрозы и аденином (CPDA-1) в соотношении 14 мл антикоагулянта на 100 мл крови. Кровь может храниться до 35 дней, если содержится при 4-6°С, или из нее могут быть приготовлены некоторые препараты крови. Сбор крови обычно производят непосредственным наполнением донорского мешка. При этом следят за равномерным смешиванием ее с антикоагулянтом. Ускоренное наполнение может быть достигнуто помещением мешка в вакуумную камеру (1, 3, 5-7).

Кошка-донор должна иметь следующие характеристики (3, 6-8):

• Вес между 5 и 7 кг.
• Возраст от 2 до 8 лет.
• Кастрированная и со спокойным характером.
• PCV выше35%.
• Регулярно вакцинированная (кальцивироз, вирус герпеса панлейкопения, хламидиоз и бешенство).
• Клинически здоровая и протестированная на Haemobartonellafelis и на вирусы лейкоза (FeLV), иммунодефицита (FIV) и инфекционного перитонита (FIP).

Рисунок 1 Набор инструментов для взятия и хранения крови человека, который может быть приспособлен и для собак. Он включает (1) входную трубку с иглой (обычно 18G), которая ведет к (2) мешку объемом 250 мл для цельной крови, обработанной 35 мл CPDA-1 в качестве антикоагулянта. Этот мешок имеет 2 выходных отверстия (3), (4) несколько алюминиевых герметизирующих колец, чтобы закрывать проводящую систему; (5) многофункциональный зажим, который дает возможность удалять кровь из донорской системы, герметик для обжатия алюминиевых колец и режущий инструмент, чтобы разрезать систему между герметиками; (6) стандартный набор для введения крови с наконечником для облегчения проникновения в мешок с кровью, фильтр для сгустков (обычно с порами 170-230 им в диаметре), капельницу, проводящую систему реципиента с адаптером иглы и зажимом для контроля потока.

Определение группы крови кошек-доноров позволяет, когда кровь необходима, быстро и правильно выбрать донора, если известна группа крови больного.

С целью обеспечения необходимой фиксации перед взятием крови кошку-донора подвергают анестезии или воздействуют на нее седативными препаратами. Во время взятия крови следует постоянно контролировать PCV, а кошка должна получать физиологический раствор в количествах в 2-3 раза больше объема взятой крови, который вводится либо внутривенно, либо внутрибрюшинно. Каждые 3 недели может быть взято до 11 мл крови на килограмм веса кошки-донора. Если собранная кровь должна быть немедленно перелита больному, рекомендуется использовать большие шприцы, содержащие одну часть 3,8% раствора цитрата натрия на 9 частей крови. Свертывания крови можно избежать путем обработки шприца 15 IU/ml гепарином. Однако, гепарин вызывает агрегацию тромбоцитов и подавляет факторы коагуляции (Рисунок 2) . В случае длительного хранения наилучшим антикоагулянтом, как описано выше, является CPDA-1 (3,6-8).

Рисунок 2 Взятие крови при помощи 50 мл шприца с добавленным антикоагулянтом (в данном случае CPDA-1) через иглу-бабочку 21G из яремной вены кошки, находящейся под воздействием седативных веществ.

Возможности получения донорской крови

Существует по меньшей мере три разных пути получения доноров и соответственно донорской крови. Принятый подход будет зависеть от индивидуальных потребностей каждой ветеринарной практики (5,6,7). Следует помнить, однако, что использование животных в качестве доноров связано с этическими проблемами как для клинициста, так и для владельца животного, и на самом деле во многих странах является незаконным.

Доноры в закрытой колонии

Преимущества:

• Клинические. Легко выбрать донора, поскольку они имеют известный тип крови.
• Заболевание. Животные полностью лишены возможности заболеть инфекционными болезнями, передаваемыми с кровью.
• Отсутствие стресса. Животные испытывают минимальный стресс и беспокойство во время процедуры взятия крови, поскольку они привыкли к этому процессу.

Недостатки:

• Этические. Животные используются исключительно с целью взятия крови. Забота о животном может быть направлена только на поддержание его здоровья и ограничена тем периодом, в который оно может быть использовано как донор. После этого срока должна быть сделана любая попытка для помещения его в приют для животных.
• Финансовые. Значительные суммы тратятся на содержание и уход за донорами.

Общественные доноры

Местные владельцы животных предлагают своих любимцев для донорства на добровольной основе.

Преимущества:

• Хозяева животных принимают непосредственное участие в программе.
• У животных определяется тип крови, осуществляется ветеринарный контроль, включая обследования на заболевания, передаваемые с кровью.
• Взятия крови являются менее частыми (раз в 2-3 месяца).

Недостатки:

• Повышенная опасность переносимых с кровью инфекционных болезней, если кровь не проверяется при каждой сдаче.
• Значительно повышаются расходы и происходят задержки в получении подходящей крови. Конечный продукт имеет укороченный срок хранения и является более дорогим.
• Доноры потенциально могут испытывать неблагоприятные ощущения или стресс от процедуры взятия крови.

Доноры из ветеринарной клиники

Многие практикующие врачи выбрали путь содержания животных-доноров, часто принадлежащих персоналу клиники, непосредственно в клинике или рядом с ней. Преимущества и недостатки этого подхода схожи с уже подчеркнутыми выше для общественных доноров. Кроме того, животные, постоянно находящиеся в клинике, имеют повышенный риск приобретения больничных инфекций. Зато кровь, собранная от этих доноров, почти всегда используется как свежая или консервированная цельная кровь, а не как ее обработанные компоненты.

Приготовление и применение цельной крови и препаратов крови

В ветеринарии, в отличие от человеческой медицины, методы трансфузии и приготовления препаратов крови не развивались столь интенсивно и переливание цельной крови пока еще остается основным, принятым всюду методом. Однако, если у собак нередко примененяются препараты крови, то у кошек имеются ограничения, вызванные малым объемом крови, которая может быть собрана (1, 3-7). Производство компонентов крови ограничено необходимостью работы в асептических условиях и доступностью специализированного оборудования:

• Рефрижераторной центрифуги.
• Экстрактора плазмы.
• Рефрижератора с постоянной температурой 4-6С.
• Низкотемпературной камеры хранения с температурой ниже -20С.
• Других запасных средств - таких как мешки для транспортировки плазмы (сухой), экстракторные пробирки, зажимы и герметики.

Цельная кровь

Свежая цельная кровь - самый легкий путь получения материала, пригодного для трансфузии. Поэтому она имеет самый широкий спектр клинического применения и показана при всех типах анемии, наследственной или приобретенной коагулопатии и нарушениях функции тромбоцитов. Поскольку цельная кровь является первичным источником трансфузии при очень небольшой практике для собак и предпочтительна для кошек, это делает излишним производство других препаратов из собранной крови.

Применение консервированной (до 30-35 дней) цельной крови, если она собрана с CPDA-1, ограничивается всеми типами анемии и не пригодно при гемостатической болезни (1,3-7).

Консервированные эритроциты

Консервированные эритроциты (PRBCs) содержат большое количество клеточной жидкости, остающейся в первичном мешке для крови после того, как около 80% плазмы и CPDA-1 были асептически введены в мешок для транспортировки. Их приготавливают, помещая мешок в рефрижераторную центрифугу на 15 минут, при скорости вращения 5.000 g и температуре около 3-6°С. Герметично закрытые в мешке PRBCs сохраняют охлажденными при 3-6°С и применяют, пока не истечет срок годности (около 30 дней), не наступит обесцвечивание или какая-либо аномалия. Перед переливанием мешок необходимо согреть. Если для облегчения переливания потребуется развести содержимое, то следует добавить только хлористый натрий. PRBCs показаны для пополнения запаса эритроцитов (как, например, при состояниях хронической анемии) и особенно в ситуациях, когда у больного возникает риск перегрузки дополнительным объемом жидкости. PRBCs можно использовать в комбинации с кристаллоидами для лечения острой кровопотери.

Плазма

Плазма представляет собой супернатант, и, как и PRBCs, готовится центрифугированием цельной крови собаки. Если плазму готовят с помощью рефрижераторной центрифуги, разделяют в течение б часов сбора и немедленно замораживают (-18°С или менее), то ее называют Свежезамороженной Плазмой (FFP) и используют для восстановления факторов свертывания, включая нестойкие компоненты. Срок хранения составляет 1 год при -40°С без утраты активности факторов свертывания. Плазму следует оттаивать при 30-37°С и вводить как можно скорее после оттаивания. Та плазма, которая была получена более чем через 6 часов после взятия крови или Свежезамороженная Плазма, неиспользованная в течение 24 часов после оттаивания или 1 года хранения, маркируется как Замороженная Плазма (FP). Она все еще обладает некоторыми факторами коагуляционной активности (напр., Фактором IX), но в основном используется как источник альбумина. Криопреципитат (СР) может быть приготовлен из FPP. Процедура состоит из продолжительного оттаивания, после чего супернатант удаляется в отдельный мешок. СР - компонент крови, богатый фибриногеном и FVIII, очень полезный для лечения гемофилии А и болезни фон Виллебранда. Остаточная плазма применяется и при других коагулопатиях, за исключением упомянутых выше, и в качестве источника альбумина (1,3-7) . В общем, плазма может быть получена и из цельной крови с CPDA-1 до истечения срока годности, но этот продукт имеет очень ограниченное применение и пригоден только в качестве источника альбумина.

Тромбоциты

Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) готовится в течение 6 часов после взятия крови путем мягкого центрифугирования (т. е. 2.000 g в течение 3 минут) резервуара цельной крови, собранной с CPDA-1. Супернатант переносят в дополнительный мешок, используя экстрактор плазмы. Срок хранения - до 3-х дней при 3-6°С и постоянном встряхивании (1,3-7).

Подбор донора - реципиента по группам крови (совместимость)

Окончательную уверенность в том, что эритроциты донора действительно подходят реципиенту и впоследствии будут эффективно выполнять функцию переносчика кислорода в организме могут дать только результаты перекрестной пробы. Эта процедура состоит из двух этапов (3, 4, 6-8).

Большая перекрестная проба

Эритроциты донора (промытые три раза и взвешенные в 3-5% физ. растворе) приводятся в контакт с гепаринизированной плазмой или сывороткой крови реципиента (одна или две капли каждая). Более быстрая версия пробы, использующая мазки крови, менее пригодна, так как только сыворотка или плазма с высоким титром антиэритроцитарных антител будет демонстрировать агглютинацию или гемолиз (видимый уже через несколько минут) (Рисунок 3). При выполнении в лабораторных пробирках или на хороших платах тест занимает больше времени, зато позволяет определить низкий титр антиэритроцитарных антител при агглютинации или гемолизе (Рисунок 4-6). Такие реакции указывают на несовместимость групп крови донора и реципиента.

Рисунок 3 Метод приготовления четких слайдов, использованный для тестирования совместимости крови. Одна капля (50-100 мкл) сыворотки или гепаринизированной плазмы и одна капля 3-5% суспензии эритроцитов в физ. растворе помещаются на каждое предметное стекло. На слайде 1 можно видеть гемагглютинацию, на слайде 2 - отрицательную или контрольную реакцию и на слайде 3 - гемолиз.

Рисунок 4 Пробирочный метод для тестирования совместимости крови. Две капли (100-200 ил) сыворотки или гепаринизированной плазмы и две капли 3-5% эритроцитарной суспензии в физ. растворе поменяются в каждую пробирку. Гемагглютинация может быть видна в пробирке 1, отрицательная или контрольная реакция - в пробирке 2, и гемолиз - в пробирке 3.

Рисунок 5 Метод микротитровальных плат,использованный длятестирования совместимости крови, иллюстрирующий гемагглютинацию.25 ил сыворотки или гепаринизированной плазмы и 25 ил 3% суспензии эритроцитов в физ. растворе добавляются в каждую лунку. Микротитровальную плату затем помещают в термостат при 37С и результат реакции виден через 15 и 30 минут. Плата слегка наклоняется, позволяя небольшой массе осажденных на дне лунки эритроцитов подойти к "линии", указывающей на отрицательную реакцию (номера лунок А2; В1, 2, 3, 4, 5; Cl, 2, 3, 4. 5, 6, 7; D7). Положительные реакции наблюдают в тех лунках, где небольшая масса осадка эритроцитов в "полулунной "форме (агрегат) видна на нижней стороне лунки (номера лунок А), 3, 4, 5. 6, 7; В6, 7; DI, 2, 3, 4, 5, 6).

Рисунок 6 Метод микротитровальных плат, использованный для тестирования совместимости крови, иллюстрирующий гемолиз. 25 ил сыворотки или гепаринизированной плазмы и 25 ил 3% суспензии эритроцитов в физ. растворе добавляются в каждую лунку. Температура инкубации и время чтения реакции, как на Рисунке 5. Отрицательные реакции наблюдаются в лунках, где пока еще может быть видна осажденная эритроцитарная масса (номера лунок А1, 2, 3, 4, 5, 6, 7; С4, 5; D4, 5, 6, 7). Положительные реакции можно наблюдать в лунках с одинаковым розовым окрашиванием, где эритроцитарная масса исчезала вследствие гемолиза (номера лунок В1, 2, 3, 4, 5, 6, 7; Cl, 2, 3, 6, 7; DI, 2, 3).

Малая перекрестная проба

Она идентична большой перекрестной пробе, но при проведении теста используются эритроциты от реципиента и сыворотка или гепаринизированная плазма от донора. В этой пробе та же иммунологическая позитивная реакция указывает на несовместимость групп крови донора и реципиента.

Перекрестная проба для собак, если позволяет время, должна быть выполнена при трех различных температурах 4°С, 25°С и 37°С или, по крайней мере, при 25°С. При проведении пробы в лабораторных пробирках мягкое центрифугирование (т. е. 1.000 g в течение 2 минут) после контакта промытых эритроцитов с сывороткой крови поможет демонстрации гемолиза (3, 4, 6, 7). Эта перекрестная проба обязательна для всех собак, которым ранее делали переливание, и для каждой кошки. Даже если группа крови реципиента и/или донора-кошки уже известна как АВ, здесь могут быть естественные или иммунные антитела, связанные с другими факторами группы крови, которые не были до сих пор хорошо определены у кошек (3,4,6-8).

Процедура переливания крови

Введение цельной крови или PRBCs реципиенту осуществляется внутривенным путем через мозговую либо яремную вены, при этом используют 20G иглу-бабочку или венозный катетер. Предварительно кровь должна быть согрета до комнатной температуры, которая не должна превышать 37С (Рисунок 7). Применение перистальтических насосов не рекомендуется из-за возможности чрезмерного гемолиза. Следует использовать для подачи крови набор с фильтром для профилактики введения мелких сгустков. Если рецепиент очень мал в размере или демонстрирует значительную гипотонию, то кровь можно также вводить через костный мозг в проксимальный конец бедренной или плечевой кости, где она абсорбируется со скоростью приблизительно одна капля в минуту (1,3, 6-8) (Рисунок 8).

Рисунок 7 Собака, получающая трансфузию крови через мозговую вену.

Рисунок 8 Внутрикостная трансфузия крови у кошки, находящейся под действием седативных препаратов. Используется тот же участок, что и при биопсии костного мозга

Скорость внутривенной трансфузии цельной крови или PRBCs должна зависеть от клинического состояния реципиента. В первые 30 минут скорость вливания должна быть около 0,25 мл/кг; нормоволемическим больным кровь следует вводить со скоростью, не превышающей 5 мл крови на кг веса тела (ВТ) каждый час. Этот объем можно осторожно повышать: у гиповолемических особей - до 20 мл/кг ВТ/час; в то время как у больных, страдающих сердечно - сосудистой недостаточностью, отток следует снижать до 0,5-1,0 мл/кг ВТ/час (1,3, 4, 6-8).

Количество крови (мл), которое нужно перелить больному, может быть рассчитано по следующей формуле:

	(требуемый PCV - PCV реципиента)

где К является коэффициентом, связанным с объемом крови для каждого вида (88 для собак и 66 для кошек), ВТ - вес тела (в килограммах реципиента), и PCV донора определяется из расчета объема антикоагулянта. Для собак вместо примененного PCV в вышеупомянутой формуле можно ввести значение гемоглобина (Hgb) - в этом случае величина К снижается до 70. Проще говоря, введение 2 мл цельной крови или 1 мл PRBCs на кг ВТ повышает PCV реципиента на 1% (1, 3,4, 6-8).

Переливают различные виды препаратов плазмы, предварительно согретых до 37°С в водяной бане, используя комплект с проточным фильтром. В общем, окончательная дозировка составляет 6-10 мл/кг/час. При активном кровотечении, вызванном недостаточностью функции свертывания, предлагается 6-10 мл/кг ВТ FFP 2-3 раза в день в течение 3-5 дней, пока продолжается кровотечение. СР следует вводить в течение 6 часов со скоростью 12-20 мл/кг ВТ каждые 10-12 часов до полной остановки кровотечения (1, 3, 4, 6-8).

Реакции на трансфузию

Осложнения трансфузии могут быть классифицированы как острые или замедленные и иммунные или неиммунные, но есть различия и между видами (3, 4, 6, 7). У собак, - из-за того, что они имеют низкое количество естественно возникающих антител, - острые реакции на трансфузию обычно вызваны сенсибилизацией вследствие ранее проведенной несовместимой трансфузии, особенно когда в реакции участвует DEA 1 антиген. На самом деле у реципиента, сенсибилизированного к DBA 1, трансфузированные эритроциты с позитивной реакцией на DEA 1 имеют очень короткое время циркуляции, исчезая из кровообращения примерно через 10 минут (3, 4, 6, 7).

У кошки кровь, несовместимая с АВ, вызывает серьезные гемолитические реакции из-за естественного появления аллоантител. Из-за более высокого титра антител к А-антигену у кошек типа В по сравнению с антителами к В-антигену у кошек типа А, трансфузии, несовместимые по АВ, вызывают более тяжелые реакции у кошек типа В, чем у кошек типа А (3, 4, 6-8).

У обоих видов острая иммунная реакция на трансфузию приводит к гемоглобинемии, гемоглобинурии, лейкоцитозу со сдвигом влево и к эритрофагоцитозу. Клинические проявления болезни: беспокойство, гипотония, слюнотечение, рвота, недержание кала и мочи и лихорадка. Шок, крапивница и смерть возникают намного реже. У здоровых собак были случаи обратимой нефропатии, у больных же собак результатом трансфузии может быть диссеминированная внутрисосудистая коагуляция и олигурическая почечная недостаточность. Подход к лечению последствий трансфузии в основном схож с лечением шока большим количеством кристаллоидных жидкостей, глюкокортикоидов и поддержанием экскреции мочи. Замедленная иммунная реакция на трансфузию, вызванная введеннием несовместимых RBCs (эритроцитов), индуцирует медленный гемолиз, приводящий к билирубинемии,билирубинурии и необъяснимому снижению PCV после трансфузии (3,4, 6, 7).

Острые неиммунологические реакции характеризуются главным образом лихорадкой. Они могут возникать вследствие бактериальной контаминации крови или реакции между антигеном и антителом, вовлекающей лимфоциты, гранулоциты или тромбоциты. Эта реакция может быть самокупирующейся или ее можно вылечить просто жаропонижающими или антибактериальными препаратами. Иногда возникает реакция типа крапивницы с эритемой, сыпью и зудом вследствие аллергической реакции на растворимый фактор в донорской крови (например, IgE или биоактивные амины) (Рисунок 9). В этом случае рекомендуется применять антигистаминные препараты. Возбуждение, рвота, кашель, тахикардия, одышка и цианоз - все это клинические признаки повышенной нагрузки на кровообращение, чего можно избежать соблюдением рекомендаций врача относительно дозы вводимой крови, медленным введением ее и применением консервированных эритроцитов (3, 4, 6, 7).

Рисунок 9 Собака с симптомами крапивницы (припухшие губы, отек век и отечные бляшки на коже).

Однако, при трансфузии могут возникнуть и случайные малые осложнения. Например, случается интоксикация от цитрата, если большие количества консервированной крови вводятся быстро или обычно, но больному животному с нарушенной функцией печени. Иногда от хелации кальция возникает гипокальциемия, ее можно вылечить замедлением скорости вливания или, по необходимости, медленным внутривенным введением глюконата кальция. Гиперкалиемия, которая, как сообщалось, возникает после переливания крови у людей, не появляется у собак и кошек; потому что их эритроциты имеют более низкое содержание калия (3, 4, 6, 7).

Группы крови и изоэритролиз новорожденных

Знание групп крови сделало возможным диагностику и профилактику феномена неонатального изоэритролиза -очень важного заболевания новорожденных, особенно у кошек. Неонатальный изоэритролиз, наряду с другими возможными причинами, рассматривают как ответственный за “Синдром Анемичного Котенка” - основную проблему в некоторых колониях кошек, вызванную высокой частотой группы крови В. Изоэритролиз новорожденных возникает, когда котята с группой крови А сосут молозиво у кошки с группой крови В, которая была спарена с котом группы крови А. Естественно возникающие антитела к А-анигену концентрируются в молозиве кошек группы крови В, и, поглощаемые котятами, абсорбируются и вступают в связь с их эритроцитами. Клинические симптомы включают анорексию, задержку роста, билирубинурию, желтуху, анемию и даже смерть, часто через несколько дней. Изоэритролиз новорожденных теперь может быть диагностирован у котят (Проба Кумбса, вероятно, окажется положительной) и вылечен всего лишь тем, чтобы в первые 24 часа после рождения отдать их на кормление другой кормящей кошке без специфических антител, направленных против эритроцитарных антигенов. Этого заболевания можно избежать и гемотипированием кошек до спаривания (3, 4, 6-8).

Изоэритролиз новорожденных случается и у собак, но гораздо реже по сравнению с кошками из-за отсутствия естественно возникающих изоантител в высоких титрах. Изоэритролиз новорожденных может возникать у щенков, рожденных от суки, которая до этого получила при трансфузии несовместимую кровь, содержащую DBA 1 антиген. Патогенез, симптомы и профилактические меры -те же, что и у кошек (3, 4, 6, 7).

Заключение

Относительная простота систем групп крови у собак и низкая частота естественно возникающих изоантител у этого вида позволили ветеринарным врачам почти игнорировать несовместимость групп крови у больных, особенно при первой трансфузии. Желателен более тщательный выбор донора крови, который должен иметь отрицательную реакцию по меньшей мере на DEA 1. У кошки ситуация совсем другая, и неблагоприятные реакции могут возникнуть даже при первой трансфузии. Поэтому в лечении кошек важно определить группы крови и провести перекрестные пробы.

Другая проблема возникает при выборе донора, особенно из-за опасности передачи реципиенту разных болезней. Усилия исследователей направлены на производство безопасных препаратов крови и ее компонентов. В будущем для ветеринарного врача станут более доступными другие препараты и методы - такие, как аутотрансфузия, рекомбинантный FVIII, эритропоиэтин или другие факторы, стимулирующие колонии костного мозга, а также синтетические носители кислорода.

WALTHAM FOCUS VOL 6 NO 4 1996

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Authement, J. M., Wolfsheimer, К. J. and Catchings, S. (1987). Canine blood component therapy: product preparation, storage, and administration. Journal of the American Animal Hospital Association, 23: 483^93.

2. Bell, К. (1983). The blood groups of domestic mammals. Agar, N. S. and Board, P. G. (eds). Red Blood Cells of Domestic Mammals. Elsevier Science Publishers, Amsterdam, pp. 163-164.

3. Chabanne, L., Peyronnet, L., Fournel, C., Meyer, F. and Rigal, D. (1994). I gruppi sanguigni dei carnivori domestici. Trasfusioni e malattie emolitiche neonatali. Summa, 11: 5-17.

4. Cotter, S. M. (1991). Comparative transfusion medicine. Advances in Veterinary Science and Comparative Medicine, 36. Academic Press, San Diego, p. 343.

5. Dodds, W. J. (1993). Update on animal blood banking services. Veterinary Practice Staff, 5: 2-7.

6. Hohenhaus, A. E. (1992). Transfusion medicine. Problems in Veterinary Medicine, 4. J. B. Lippincott, Philadelphia, p. 670.

7. Kristensen, A. T. and Feldman, B. F. (1995). Blood banking and transfusion medicine. Ettinger, S. J. and Feldman, E. C. (eds). Textbook of Veterinary Internal Medicine. Diseases of the Dog and Cat. W. B. Saunders, Philadelphia, pp. 347-360.

8. Lubas, G. and Continanza, R. (1993). Recenti acquisizioni sulle caratteristiche immunoematologiche del gatto e relative applicazioni nella clinica. Veterinaria, 7: 5-11.

9. Swisher, S. N. and Young, L. E. (1961). The blood grouping systems of dogs. Physiology Reviews,

О группах крови собак (сложная, но познавательная статья).

В наши дни процедура переливания крови в практике специалистов по мелкодомашним превратилась из экзотики во вполне себе реальную рутину. Состояний, при которых оно требуется, существует великое множество, одного разбора гемолитических анемий хватит на большую отдельную стену текста. Тем не менее вопрос об определении совместимости донорской и реципиентской кровушки по-прежнему вызывает у многих специалистов затруднения, тем более что область эта сложна и не до конца изучена даже в Европах и прочих "прогнивших Западах".

Для начала следует разобраться, что же это такое - группы крови и зачем они нужны. Википедия сообщает нам, что это описание индивидуальных антигенных характеристик эритроцитов, определяемое так-то и так-то. Очень понятно, да? :)

Смысл в том, что организм животных через сложную систему оценки состава поверхностных молекул может (и должен) отличать свои собственные клетки от чужих, кои должны немедленно из организма элиминироваться. Эритроциты разных животных, даже одного вида, к сожалению, также могут отличаться по этим характеристикам. К сожалению - это, конечно, для клиницистов, которым приходится попотеть, чтобы найти совместимых доноров умирающему человеку или животному. При этом белки, определяющие группу крови - это не какие-то специальные белки, которые только для того и нужны, чтобы пощекотать трансфузиологам нервы, а поверхностные мембранные белки, выполняющие свои, не связанные напрямую с иммунной защитой организма, функции.

Общеизвестно, что у человека 4 группы крови. Это тоже не совсем так. 4 группы - только по системе АВО, резус - это уже другая система, которая увеличивает количество возможных вариантов до восьми. Но АВО и резус - это только верхушка айсберга, ибо существуют еще Kell, Kidd, Duffy и другие, о чьем клиническом значении я распространяться не буду.

Вернемся к нашим собакам...

В этих ваших интернетиках часто можно встретить утверждение, что у собак 7 групп крови (и перечисление). Увы, все далеко не так просто и ясно, а скудность информации не делает вопрос проще.

На самом деле перечисление A-G - это перечисление СИСТЕМ групп крови, точнее только один вариант из ныне употребляемых, датируемый аж 1961 годом. С тех пор многие и многие ученые мужи собирались и пытались привести в порядок имеющиеся данные о группах крови у собак, в 1976 году пришли к номенклатуре DEA (dog erythrocyte antigen), которая в данный момент считается общепринятой в США. Согласно это номенклатуре, системы описываются как DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, DEA 4, DEA 5, DEA 7 и DEA 8. Присовокуплю табличку (см. картинку) из Шалма, очень наглядно объясняющую ху из ху в этой запутанной истории.

И это еще далеко не все варианты, а только те, которые более-менее хорошо изучены.

Система DEA 1

Из них наиболее клинически актуальной является DEA 1. В этой системе 3 пары ген-белок и 4 возможных фенотипа - DEA 1.1, 1.2, 1.3 и 0. У одной собаки возможен только один фенотип. У собак, в отличие от системы АВО человека или АВ кошки, в норме нет антител к антигенам других групп, что означает, что в экстренной ситуации собаке, которую никогда не переливали ранее, можно переливать кровь без определения совместимости по DEA 1.1, и переливание будет иметь необходимый эффект. Однако при необходимости повторного переливания уже возникнут сложности.

Есть вещи, которые надо объяснить подробно и на пальцах, и, увы, система DEA 1.1 в этом списке к простейшим не относится.

При переливании DEA 1-отрицательному реципиенту (фенотип 0) крови DEA 1-положительного донора (фенотип любой кроме 0) организм реципиента через 7-10 суток выработает антитела к антигену DEA 1, которые радостно разрушат любые эритроциты, имеющие на себе этот антиген. В дальнейшем такому реципиенту будет требоваться переливание строго DEA 1-отрицательной крови, в противном случае донорские эритроциты вместо ожидаемых трех недель проживут в организме реципиента от нескольких минут до (в лучшем случае) нескольких часов, сводя целебный эффект гемотрансфузии до 0 и даже уводя его в глубокий минус. При этом DEA 1-положительному донору допустимо переливать кровь DEA 1-отрицательного, при условии что этот самый донор никогда в жизни не был реципиентом.

Пока все понятно? :)

Антиген DEA 1, как уже говорилось, может наличествовать в виде вариантов DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 1.3. Генеалогический анализ дает основания предполагать, что DEA 1 имеет аутосомно-доминантный тип наследования, причем DEA 1.1 > DEA 1.2 > DEA 1.3 > 0. Антигрупповые антитела, выработанные невезучим DEA 1-отрицательным донором абзацем выше, дают перекрестную реакцию со всеми тремя вариантами, но различной степени выраженности.

При иммунизации DEA 1-отрицательной собаки кровью DEA 1.1, антитела, которые она выработает, будут мгновенно разрушать эритроциты с DEA 1.1, вызывая острую гемолитическую реакцию, которая, если ее проводить не на стекле, а непосредственно в пациенте, с высокой вероятностью приведет к тяжелым осложнениям. При этом эритроциты с DEA 1.2 и 1.3 эти антитела будут агглютинировать, но не разрушать (хотя с точки зрения полезности для реципиента это немногим лучше).

В России популяционные исследования по группам крови не проводились, но ожидаемо, что процент DEA 1.1, 1.2 и 1.3-положительных собак будет очень сильно варьировать как от региона к региону, так и от породы к породе. В Штатах около 45% собак имеют группу DEA 1.1, 20% DEA 1.2, а DEA 1.3 толком не исследовалась (статистика нагло потырена из того же Шалма). По данным вот этого сайта: https://ahdc.vet.cornell.edu/, большинство грейхаундов DEA 1.1-отрицательны (правда, неясно, что там с DEA 1.2 и 1.3), что добавляет еще один плюс в копилку их положительных качеств как доноров, а лабрадоры - чаще DEA 1.1-положительны.

Помимо острых трансфузионных реакций, в большинстве которых "повинны" антигены группы DEA 1, считается, что у собак также возможен неонатальный изоэритролиз (более, впрочем, характерный для кошек, лошадей и людей ввиду наличия у них групповых антител без предварительной имунизации). Однако как раз из-за отсутствия в норме этих антител случаи считаются скорее спорадическими.

Система DEA 3 (в старой номенклатуре B)

В ней все проще. Собаки могут быть либо DEA 3-положительными, либо отрицательными. При этом у 20% В-отрицательных собак имеются антитела к В, даже при отсутствии предшествовавшей иммунизации несовместимой кровью. В Штатах из популяции всех-всех собак всех-всех пород DEA 3-положительными оказались 6% собак, но в выборке из популяции только грейхаундов DEA 3 имели уже 23% собак. Что еще раз намекает нам на большой разброс статистики по породам.

Переливание DEA 3-положительной крови собаке с соответственными антигрупповыми антителами (своими или приобретенными) вызывает разрущение эритроцитов донора в срок до 5 дней и может стать причиной острых трансфузионных реакций.

Система DEA 4 (С)

Также имеет всего два фенотипа, + и -. Без предварительной иммунизации у DEA-4-отрицательных собак антител к DEA 4 нет. До 98% собак в Штатах DEA 4-положительны, но опять же у нас все может быть совсем не так. Повторное переливание DEA-4-отрицательному реципиенту не вызывает гемолитической реакции даже при наличии антител к DEA 4, однако описан гемолиз у реципиента, которому переливали несовместимую кровь несколько раз подряд.

Система DEA 5 (D)

Два фенотипа, + и -. У 10% DEA 5-отрицательных собак в норме имеются антитела к DEA 5. Переливание крови сенсибилизированному реципиенту вызывает гемолитическую реакцию и гибель донорских эритроцитов в течение 3х суток.

Система DEA 6 (F)

Два фенотипа, + и -. DEA 6-положительные собаки очень распространены (в Штатах до 100%). В норме антитела к этому антигену отсутствуют. Переливание крови сенсибилизированному реципиенту приводит к умеренно выраженной трансфузионной реакции и умеренному снижению продолжительности жизни донорских эритроцитов.

Система DEA 7 (Tr)

Имеет три фенотипа, Tr, O и отрицательный. Антиген Tr имеется у 40-45% собак. Антитела к Tr и О имеются у 25% DEA 7-отрицательных собак, но они не имеют выраженного гемолитического эффекта, а вот при предшествующей сенсибилизации нарабатываются другие, способные разложить донорскую кровь за срок до 3х суток.

Система DEA 8 изучена мало. Кроме вышеперечисленных, существуют еще системы, не включенные в DEA по причине недавности открытия, а также ряд систем, специфичных, к примеру, только для восточных пород собак (шиба-ину и прочие).

Что делать?

Существуют коммерческие диагностические наборы для определения наличия или отсутствия антигенов DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, и 7. При этом лично я видела в продаже в России только набор для DEA 1.1.

Стоимость определения одного антигена высока - для мегакоровского набора это 1-1,5 тысячи за пробу (это жеж специально подготовленные антитела, нанотехнологии буквально), поэтому в реальной жизни протипировать реципиента и хотя бы одного донора по всем из доступных антигенов - роскошь мало кому доступная. При наличии определенного количества постоянных доноров, имхо, имело бы целесообразность их типировать хотя бы по DEA 1.1, а дальнейшую совместимость определять уже по необходимости биопробой или пробой на индивидуальную совместимость. Это хотя бы позволило отделить собак, несовместимых по группе DEA 1 как наиболее клинически значимой и с наиболее серьезными посттрансфузионными реакциями.

В жизни, особенно в некрупных городах, "готовых" доноров нет, и совместимость определяется "на стекле" между реципиентом и каждым из доноров. Метод прост, нагляден, а главное дешев, однако позволяет исключить только вероятность немедленной трансфузионной реакции, ибо взаимодействие эритроцитов удается отслеживать только в течение 5-10 минут, пока капля не высохнет. Спрогнозировать жизнь перелитой крови на 3-5 суток по такому методу, увы, невозможно, поэтому возможность неэффективности переливания или отдаленных трансфузионных реакций следует всегда иметь в виду.

У собак определено несколько групп крови. Номенклатура групп крови отражает расхождение мнений нескольких авторов, участвовавших в этих исследованиях, и в настоящее время равнозначно применяются две различные классификации:

DEA = Эритроцитарный Антиген Собаки (напр. DEA 1).

Заглавная буква для системы и строчная отдельная буква для фактора (например, Са). Иногда прибавляется номер для подтипа (напр., Аа1).

Антигены различных групп крови распознаются специфическими антителами в результате прямых или непрямых реакции (т. с. антиглобулинового теста) агглютинации и гемолиза. Некоторые из этих реакций могут проходить только при определенных температурах (напр., 4°С, 25°С или 37°С). Распределение различных групп крови по породам не изучено в деталях, хотя и сообщалось, что грейхаунды имели очень низкую частоту проявления антигенов DEA 1.1 и 1.2 .(Swisher, S. N., Young, L. E., 1991) (таблица).

Очень немногие группы крови определены как значимые для лечения трансфузией, хотя группы DEA 1.1, 1.2 и 7 являются наиболее распространенными антигенными факторами. У собак, как признано, естественно возникающие антитела являются очень редкими и, если они присутствуют в сыворотке, то в низких титрах или вступают в реакцию при температурах, отличных от температуры тела. На самом деле только около 15% собак демонстрируют естественно возникающие антитела к DEA 3, 4, 5 и 7. Появление таких естественно возникающих антител не следует путать с приобретенными антителами к группам крови. Первые не связаны с каким-либо проявлением иммуностимуляции, в то время как при последних имеется мощная иммунная реакция, вызванная, например, переливанием несовместимой крови. Именно вследствие этих иммуногематологических особенностей крайне редко встречается реакция на первую трансфузию при переливании собаке несовместимой крови (Hohenhaus, A. E., Swisher, S. N.,Young, L. E.)

Тем не менее, на практике, по мнению многих авторов (Hohenhaus, A. E., Swisher, S. N.,Young, L. E., Ogilvie, G.K., Moore, A.S.), более простым и удобным методом является проба на совместимость, нежели определение групп крови донора и реципиента.

Таблица. Характеристики групп крови у собак

Номенклатура			Тип реакции для определения антител
			Агглютинация	Антиглобулин

Выбранный метод; (+) = альтернативный метод; - = нет реакции.

Определение.

Донорская кровь собачья – это кровь, полученная от собаки-донора, консервированная официнальными растворами (цитратом фосфата декстрозы с аденином (CDPA-1), или натрием гидроцитратом двузамещенным с глюкозой в соотношении 2 к 3) и предназначенная для переливания в кровеносное русло собаки-реципиента.

Фармакологические свойства.

Лечебный эффект донорской крови собачьей обусловлен ее стимулирующим, замещающим, гемодинамическим и гемостатическим действием.

Перелитая кровь донорская увеличивает объем циркулирующей крови и поддерживает его на высоком уровне длительное время. Переливание донорской крови собакам с кровопотерей усиливает приток тканевой лимфы в кровеносное русло, что улучшает кровоток. На уровне микроциркуляции происходит расширение артериол и венул, ускоряется ток крови в циркулярной сети. Происходит снижение сброса артериальной системы в венозную. Улучшается кислотно-щелочное равновесие и усиливается потребление кислорода.

Гемостатическое действие крови донорской собачьей обуславливается тем, что перелитая донорская кровь вызывает умеренную гиперкоагуляцию , а также стимулирует систему гемостаза за счет содержащихся в крови биологически активных веществ.

Кровь донорская собачья выполняет в организме кислородно-транспортную функцию, что устраняет гипоксию на органном, тканевом и клеточном уровнях и восстанавливает пострадавшие вследствие анемии функции органов и систем. Введенные вместе с кровью белки циркулируют в организме до 36 суток и включаются в процессы обмена.

Кровь донорская собачья вызывает в организме после ее переливания дезинтоксикационный и трофический эффекты.В результате чего повышается основной обмен, увеличивается дыхательный коэффициент, повышается газообмен, стимулируются белковый и углеводный обмены, улучшается функция иммунной системы (Мокеев И.Н., 1999; Hohenhaus, A. E., 1992; Wingfield, W.E., 1997; Ogilvie, G.K., Moore, A.S., 1995; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992).

Показания к применению.

Основными показаниями к применению крови донорской собачьей являются (Hohenhaus A. E, 1992; Kerl M.E., 1993; Wingfield, W.E., 1997; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992; Kirby R., 1995; Crystal M.A., Cotter S.M., 1992):

Острая кровопотеря.

Острая гемолитическая анемия.

Невосстанавливающаяся анемия с гематокритом между 12 и 15%.

Наследственная или приобретенная коагулопатия.

Тромбоцитопения, тромбоцитопатия.

Лейкопения.

Гипопротеинемия.

Порядок применения.

Кровь донорская собачья применяется для переливания собаке-реципиенту путем внутривенного введения в любые доступные вены. Скорость внутривенной трансфузии цельной крови должна зависеть от клинического состояния реципиента.

В первые 30 минут скорость вливания должна быть около 0,25 мл/кг; нормоволемическим больным кровь следует вводить со скоростью, не превышающей 5 мл крови на кг веса тела каждый час. Этот объем можно осторожно повышать: у гиповолемических особей - до 20 мл/кг/час; в то время как у больных, страдающих сердечно - сосудистой недостаточностью, скорость введения следует снижать до 0,5-1,0 мл/кг /час.

Количество вводимой крови определяется из расчета, что введение 2 мл цельной крови на кг веса тела повышает гематокрит реципиента на 1%.

Внимание! Перед введением крови донорской собачьей реципиенту обязательно должны быть проведены пробы на совместимость (перекрёстная и биологическая пробы).

Проба на совместимость.

Перекрёстная проба (in vitro )

1 этап. Эритроциты донора, промытые 3 раза и взвешенные в физрастворе (1:1), приводятся в контакт с гепаринизированной плазмой или сывороткой крови реципиента (по 1 капле) на предметном стекле или в пробирке. Через 5 минут пробы проверяют на гемолиз и гемагглютинацию.

2 этап. Идентичен предыдущему этапу, но при проведении теста используются эритроциты от реципиента и сыворотка или гепаринизированная плазма от донора. Оценка пробы идентичная.

Перекрестная проба для собак, если позволяет время, должна быть выполнена при трех температурах 4 о С, 25 о С, 37 о С, или, по крайней мере, при 25 о С и при 37 о С.

При проведении пробы в лабораторных условиях мягкое центрифугирование – 1000 G в течение 2 мин после контакта промытых эритроцитов с сывороткой поможет демонстрации гемолиза.

Оценка реакции.

Отрицательная проба: отсутствие гемолиза и гемагглютинации свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента. Переливание крови разрешается.

Положительная проба: наличие гемолиза и (или) гемагглютинации в проводимых реакциях свидетельствует о несовместимости крови; переливание в таком случае запрещено (Hohenhaus, A. E., 1992; Wingfield, W.E., 1997; Ogilvie, G.K., Moore, A.S., 1995; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992 Kerl M.E., 1993; Wingfield, W.E., 1997; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992; Kirby R., 1995; Crystal M.A., Cotter S.M., 1992).

Биологическая проба (in vivo).

Биологическую пробу проводят независимо от объема переливаемой крови и скорости ее введения. Проба проводится после отрицательной перекрестной пробы на совместимость

Контейнер с цельной кровью извлекают из холодильника и выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин.

Однократно переливается 10 мл донорской крови собачьей со скоростью 2-3 мл/мин, затем переливание прекращают и в течение 3 минут наблюдают за реципиентом, контролируя у него пульс, дыхание, общее состояние, цвет кожи, измеряют температуру тела.

Такую процедуру проделывают еще дважды. Появление в этот период даже одного из таких клинических симптомов, как озноб, тошнота или рвота, покраснение кожи, требует немедленного прекращения трансфузии и отказа от переливания.

Побочные действия.

Гемолиз. Проявляется редко. Характеризуется подъемом температуры тела, увеличением частоты сердечных сокращений и дыхания, тремором, рвотой, коллапсом. При возникновении гемолиза начинают введение кристаллоидных растворов и контролируют выход мочи.

Лихорадка . Может свидетельствовать о бактериальной контаминации крови или быть связана с антигенами лейкоцитов, ускоряющих высвобождение эндогенных пирогенов. У собак встречается редко.

Аллергические реакции . Проявляются сыпью и ангионевротическим отеком. При обнаружении данных признаков переливание прекращают и вводят глюкокортикоиды.

Токсические эффекты консерванта . Проявляются в виде быстрого снижения концентрации ионизированного кальция. Клинически это состояние характеризуется мышечным тремором, подергиванием лицевых мышц и судорогами. В этом случае трансфузию прекращают и внутривенно вводят глюконат кальция. (Hohenhaus, A. E., 1992; Wingfield, W.E., 1997; Ogilvie, G.K., Moore, A.S., 1995; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992; Kerl M.E., 1993; Wingfield, W.E., 1997; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992; Kirby R., 1995; Crystal M.A., Cotter S.M., 1992).

Нормативные документы на кровь донорскую собачью, включающие качество, требование к качеству, составу и свойствам.

Требования к донорам и качество донорской крови.

При заборе вся кровь, поступающая от донора, должна пройти тщательный анализ.

Прежде всего, оценивается клиническое состояние собаки-донора.

Собака-донор должна соответствовать следующим требованиям:

Вес выше 25 кг

Возраст от 2 до 8 лет

Спокойный характер

Гематокрит выше 45 %

Регулярная вакцинация против основных инфекционных заболеваний

Клинически здорова по результатам осмотра.

Затем, после забора, кровь проходит полное лабораторное исследование:

Гематологическое исследование. Определяется гематокрит, гемоглобин, количество эритроцитов, лейкоцитов, лейкограмма. Гематокрит должен составлять не менее 45 %, все остальные параметры также не должны иметь отклонений от нормы.

Биохимическое исследование. Измеряются основные биохимические показатели: билирубин общий, прямой, АСТ, АЛТ, мочевина, креатинин, общий белок, альбумин, щелочная фосфатаза, амилаза, глюкоза, ЛДГ, ТТГ, КФК, триглецириды, калий, натрий, кальций, магний, железо, хлор.

Исследование на инфекционные заболевания. Кровь донорская после получения обязательно обследуется на инфекционные заболевания – на вирус чумы плотоядных, вирусный гепатит и др. Кровь на должна давать положительные реакции на любые инфекционные заболевания.

Затем, перед тем, как приступить к переливанию донорской крови, необходимо убедиться в ее пригодности к переливанию. Визуально проверяется герметичность упаковки, макроскопически оценивается качество донорской крови. Определять годность крови необходимо при достаточном освещении непосредственно на месте хранения, не допуская взбалтывания. Критериями годности для переливания являются: прозрачность плазмы, равномерность верхнего слоя эритроцитов, наличие четкой границы между эритроцитами и плазмой. При возможном бактериальном загрязнении цельной крови цвет плазмы будет тусклым, с серо-бурым оттенком, она теряет прозрачность, в ней появляются взвешенные частицы в виде хлопьев или пленок. Такая донорская кровь переливанию не подлежит.

Кроме того, показателем качества перелитой донорской крови является клиническое улучшение состояния реципиента, такие как увеличение объема циркулирующей крови, увеличение гематокрита реципиента, при коагулопатиях – уменьшение или исчезновение кровотечений, изменение цвета слизистых с бледных до розовых и слабо розовых, улучшение или появление аппетита и др.

Требования к качеству:

Клинически здоровые доноры

Макроскопическая оценка хранящейся крови, соответствующая норме.

Отсутствие бактериального заражения хранимой крови.

Соблюдение температурного режима хранения крови (+2 +4 С).

Не использования крови по истечению срока хранения (21 сутки).

Клиническое улучшение состояния реципиента в течение 1-2 суток после переливания донорской крови.

гормональная и Цитологическая оценка полового цикла.

Таблица. Половой цикл у сук

Под половым циклом понимают обычно весь комплекс процессов, протекающих в репродуктивной системе самки млекопитающих. После наступления половой зрелости в яичниках происходит интенсивное развитие фолликулов, причем рост и созревание идет волнообразно, что соответствует ритмике половых циклов данного животного.

Половой цикл можно условно разделить на два периода - покоя и половой активности, иногда именуемый в собаководстве «пустовка» . Период половой активности продолжается у сук 25 - 27 дней и подразделяется на три фазы: проэструс (предтечка), эструс (течка) и метэструс (диэструс, послетечка). Все они характеризуются определенными морфофизиологическими изменениями в репродуктивной системе и в поведении.

Цитологическое исследование влагалищных мазков

(Предполагаемый день овуляции, Код 303 ).

Исследование в Лаборатории «Шанс Био» - 30 мин.

Исследуемый материал: влагалищный мазок.

Взятие, хранение, доставка материала: мазок делается с помощью цервикального зонда (цитощетки), обязательно используя влагалищное зеркало. Зондом (цитощеткой) делается тонкий, монослойный мазок на стекло. Стекла сушаться на воздухе.

Обязательно приложить направление с указанием дня течки, последней вязки.

Важно при взятии мазка из влагалища использовать влагалищное зеркало для предотвращения попадания в материал эпителиальных клеток из преддверия и с кожи. Мазок делается цитощеткой для цервикальных мазков, затем равномерно распределяется по предметному стеклу.

Циклические изменения, происходящие во влагалище, дают возможность цитологической оценки сроков овуляции. Период половой активности отличается усиленным размножением клеток влагалищного эпителия, ороговением и отторжением его поверхностных слоев. Клеточные элементы, их количество и соотношение позволяют точно установить фазу полового цикла.

На момент овуляции отмечается ороговевание подавляющего числа клеток эпителия (более 80%) во влагалищном мазке.

Существует одно НО: это наблюдается только у 75% сук. Те есть, точность метода составляет 75%, что довольно много.

Гормональное исследование полового цикла.

Исследование в Лаборатории «Шанс Био» - до 10 дней.

Исследуемый материал: сыворотка крови.

Взятие: Натощак, обязательно перед проведением диагностических или лечебных процедур. Кровь берется в сухую, чистую пробирку (одноразовую) (пробирка с белой или красной крышкой) . Используют иглу с большим просветом (без шприца, исключения только при трудных венах). Кровь должна стекать по стенке пробирки. Плавно перемешать, плотно закрыть.

Хранение: Сыворотка или плазма должны быть отделены как можно быстрее (идеально отделять сразу после взятия, сыворотка замораживается)..

Хранится материал от 30 минут (при комн. температуре) до нескольких недель в замороженном виде (размораживать пробу можно только один раз).

Доставка: Доставить кровь следует в кротчайшие сроки в сумке-холодильнике. Замороженную сыворотку доставлять только на льду!!!

Прогестерон (К од 610)

Собаки, суки, фолликулиновая фаза - 1,0 – 10,0 нг/мл

Собаки, суки, лютеиновая фаза, метэструс 10,0 – 80,0 нг/мл

Собаки, суки, анэструс - менее 1,0 нг/мл

Уровень прогестерона начинает повышаться с фоновых значений за 2-4 дня до наступления эструса, и достигает пика к окончанию течки, после чего отмечается длительный постепенный спад в течение двух месяцев.

Уровень прогестерона не используется для диагностики беременности!

Эстрадиол (К од 602)

Референтные интервалы Лаборатории «Шанс Био»:

Собаки, суки, фолликулиновая фаза - 5,0 – 40,0 пг/мл

Собаки, суки, лютеиновая фаза 10,0 – 30,0 пг/мл

Собаки, суки, анэструс, метэструс - менее 8,0 пг/мл

Собаки, кобели - менее 25,0 пг/мл

Подъём уровня эстрадиола начинается за 4 недели до начала проэструса, что может дать команду владельцу животного к подготовке вязки. Пик эстрадиола приходится на начало эструса, после чего, следует длительный спад.

Лютеинизирующий гормон (ЛГ) (К од 607)

Референтные интервалы Лаборатории «Шанс Био»:

Собаки, суки, фолликулиновая фаза - 1,8 – 15,0 МЕ/л

Собаки, суки, лютеиновая фаза 0,6 – 15,0 МЕ/л

Фаза лютеинизации у собак начинается, в отличие от людей, до овуляции. Пик активности ЛГ приходится на начало эструса, а собственно, активность, продолжается два - четыре дня, после чего, уровень ЛГ опять опускается до фоновых значений.

фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) (К од 608)

Референтные интервалы Лаборатории «Шанс Био»:

Собаки, суки, фолликулиновая фаза - 2,4 – 10,0 МЕ/л

Собаки, суки, лютеиновая фаза 0,01 – 6,4 МЕ/л

ФСГ стимулирует секрецию эстрогенов, рости и созревание фолликулов.

Повышение ФСГ может свидетельствовать о функциональной недостаточности яичников, первичном гипогонадизме.

Понижение – гиперэстрогенемия, вторичный гипогонадизм, нарушение полового цикла и бесплодие.