Gastroenterite suina trasmissibile (TPG). Gastroenterite virale suina

Accademia veterinaria statale di Mosca

Medicina e Biotecnologia da cui prende il nome. K.I.Skryabina

Abstract sulla virologia sull'argomento:"Gastroenterite infettiva dei suini"

Lavoro completato

___________

Controllato il lavoro

___________

Mosca 2008

Caratteristiche dell'agente patogeno

Resistenza alle influenze fisiche e chimiche

Struttura antigenica

Coltivazione di virus

Attività emoagglutinante

Segni clinici

Cambiamenti patologici

Localizzazione del virus

Fonte di infezione

Diagnostica

Immunità e prevenzione specifica

Bibliografia

VIRUS DELLA GASTROENTERITE INFETTIVA DEL SUINO

La gastroenterite infettiva dei suini (IGS, gastroenterite trasmissibile dei suini - TGES) è una malattia acuta e altamente contagiosa. Colpisce principalmente i suinetti di età inferiore a 3 mesi. Si manifesta con vomito, diarrea grave e elevata mortalità (fino al 100%) nei suinetti di età inferiore a 2 settimane.

La malattia fu descritta per la prima volta nel 1946 da Doyle e Hittings negli Stati Uniti. Successivamente furono notati focolai in Giappone, Gran Bretagna, Canada ed Europa. Attualmente, la prevalenza dell'IHS nella maggior parte dei paesi europei è di circa il 100%, con epidemie che causano la morte fino al 38% dei suinetti nei primi giorni di vita.

Caratteristica agente patogeno . Il virus appartiene alla famiglia dei Coronaviridae, genere Coronavirus. I virioni sono polimorfici, il loro diametro è 60-160 nm. Il virione contiene un genoma sotto forma di RNA a filamento singolo e un capside di simmetria cubica. Il nucleocapside è ricoperto da un guscio con processi a forma di clava (peplomeri), che conferiscono al guscio l'aspetto di una corona solare. L'involucro del virione è di origine cellulare.

VIGS contiene 3 proteine ​​strutturali principali: proteina del nucleocapside - N, glicoproteina del piccolo involucro - M e grande glicoproteina dei peplomeri - S. L'estremità della glicoproteina M sporge dal virione e garantisce l'induzione di anticorpi che fissano il complemento e neutralizzano il virus, nonché come interferone. La glicoproteina S è responsabile dell'attaccamento del virus alla cellula, dello scioglimento della membrana e dell'induzione di anticorpi neutralizzanti il ​​virus.

Resistenza alle influenze fisiche e chimiche. Il virus è sensibile all'etere e al cloroformio, ma resistente alla trypsin. È ben inattivato dalle soluzioni disinfettanti ed è resistente al congelamento (si conserva fino a 8 settimane). A meno 20-80 °C il virus persiste fino a un anno, a 56 °C si inattiva in 30 minuti, a 37 °C in 4 giorni. Il virus è inattivato a pH 4,9. La preservazione dell'infettività del VIGS nell'intestino a pH 3,0 è assicurata dalla presenza della bile. Nell'ambiente esterno, il virus rimane contagioso nelle feci fino a 6 ore al sole e fino a 3 giorni all'ombra.

Struttura antigenica. Determinato dalle proprietà delle proteine ​​del virus. Il nucleo di VIGS è rappresentato dall'RNA genomico con legame covalente E proteina del nucleocapside fosforilata Con peso molecolare 47 kDa. Attorno ad esso si trovano due tipi di proteine ​​virus-specifiche: M con peso molecolare di 28 kDa e S con peso molecolare di 200 kDa. Nel virus sono stati identificati 4 siti antigenici (A, B, C E D) e sono stati identificati 11 epitopi, 8 dei quali sono virus neutralizzanti.

I principali determinanti neutralizzanti sono associati Con glicoproteina S; questi epitopi sono altamente conservati nella maggior parte dei ceppi virali. L'attività neutralizzante dei mAb nei confronti della glicoproteina M è bassa, ma può essere significativamente aumentata dal complemento.

Attività antigenica VIGS è espresso dalla capacità di indurre la sintesi di anticorpi neutralizzanti il ​​virus, la cui attività dopo la malattia è dovuta alle IgA e dopo l'immunizzazione alle IgG. La nucleoproteina virale (N) non è in grado di indurre la sintesi di anticorpi neutralizzanti il ​​virus.

L'immunità passiva dei suinetti contro le infezioni intestinali è dovuta alla presenza di IgA nel colostro e nel latte, in cui il titolo anticorpale è più elevato rispetto al siero sanguigno delle scrofe. Livelli elevati di IgA nel colostro e nel latte vengono rilevati solo dopo che le scrofe hanno mangiato materiale contenente virus. I suinetti possono ricevere IgA per diverse settimane attraverso il colostro e il latte di suini convalescenti.

Antigenicovariabilità eparentela. VIGS ha un sierotipo e le sue varianti. I ceppi isolati in paesi diversi sono sierologicamente identici, ma differiscono nella virulenza.

Quattro coronavirus sono patogeni per i suinetti: VIGS; coronavirus respiratorio suino; Virus dell’encefalomielite GA e virus della diarrea epidemica dei suinetti. È stato stabilito un elevato grado di affinità antigenica (fino al 96% di analogia della sequenza nucleotidica nel genoma virale) tra i virus IGS e RCVV. VIGS non è completamente correlato al terzo e quarto virus dell'encefalomielite e alla diarrea epidemica dei suinetti.

Allo stesso tempo, altri due coronavirus, il virus della peritonite infettiva felina (FIPV) e il coronavirus canino (CIV), si sono rivelati antigenicamente correlati alla FIV e in grado di causare malattie nei suinetti negli esperimenti. VIPK ha la relazione antigenica più stretta con VIGS: analogia del 93% nel genoma virale. Tuttavia, questa relazione è unilaterale: gli anticorpi anti-VIGS formano un complesso con VIGS, che viene utilizzato nella diagnosi dell'infezione da gastroenterite suina. Effetto simile Con non si osservano anticorpi contro VIGS.

Coltivazione di virus. Gli animali da laboratorio sono insensibili al virus. Gli animali naturalmente sensibili, preferibilmente i suinetti lattanti di età compresa tra 1 e 15 giorni, vengono facilmente infettati introducendo il virus per via orale o intranasale.

Le colture primarie di cellule epiteliali della mucosa intestinale, della cavità nasale e di altri tessuti dei suinetti, comprese le colture di organi dell'esofago, sono più sensibili all'infezione da VIGS. Tra le linee continue, la coltura in sospensione del rene del suinetto utilizzata per ottenere il vaccino è la più sensibile, tuttavia il virus può causare CPE anche in una coltura cellulare convenzionale solo dopo il suo adattamento.

Attività emoagglutinante. Nel VIGS è stato stabilito in relazione ai globuli rossi di polli, porcellini d'India e bovini. VIGS non contiene una proteina emoagglutinante. La sua attività emoagglutinante dipende dal sistema in cui si riproduce. Pertanto, quando il virus si moltiplica in una coltura di cellule tiroidee di maiale, agglutina gli eritrociti di cavia, raggiungendo titoli di 64-256 GAN (unità i-agglutinanti).

Segni clinici. Il periodo di incubazione dei suinetti di 1-15 giorni dura solo 12-18 ore.La malattia si manifesta clinicamente con mancanza di appetito, vomito, diarrea con feci schiumose biancastre, giallastre o verdastre, disidratazione, debolezza ed elevata mortalità. Man mano che gli animali invecchiano, il periodo di incubazione aumenta e la mortalità diminuisce. Le scrofe in lattazione malate hanno una produzione di latte ridotta. L'elevata sensibilità dei neonati al virus IHS è associata ad una diminuzione in loro e nelle scrofe durante il parto della citotossicità dei linfociti contro le cellule infette dal virus. In queste condizioni, i suinetti possono essere protetti solo dagli anticorpi materni ottenuti dal colostro e dal latte.

Esistono tre fasi della malattia: preclinica, clinica e di guarigione. Nella fase preclinica si osservano diminuzione dell'appetito, sonnolenza, aumento della sete, talvolta febbre (41-41,5 ° C) e vomito.

Il periodo clinico è caratterizzato da grave diarrea con rilascio di gas. Le feci sono grigio-rosse o giallo-verdi. I suinetti malati soffrono di sete estrema, bevono molta acqua e succhiano il latte, che passa non digerito nelle feci liquide. La disidratazione del corpo porta all'acidosi metabolica, cambiamenti nell'equilibrio elettrolitico del sangue. La morte è solitamente preceduta dal coma, che avviene il 3° giorno, cioè la malattia dura 2-5 giorni. I suinetti sopravvissuti si riprendono entro 7-10 giorni. Sono rachitici.

Nelle scrofe infettate dal contatto con suinetti malati, la temperatura corporea aumenta e l'appetito scompare. Presentano diarrea moderata e cessazione dell'allattamento. L'IHS è solitamente complicata dalla colibacillosi e da altre infezioni batteriche.

Cambiamenti patologici. Nei suinetti morti nei primi 3 giorni di vita si riscontrano colostro coagulato, gonfiore e arrossamento della mucosa nello stomaco e nell'intestino tenue. Il cadavere dei suinetti di 2 settimane è emaciato, le mucose sono pallide. Sono presenti macchie rosso-viola sulle orecchie e sul ventre. Le mucose dello stomaco e dell'intestino tenue sono infiammate catarrali o catarrali-emorragiche, erose in alcuni punti. I reni e le mucose della vescica sono punteggiati di emorragie. Le membrane del cervello sono iperemiche, la sostanza cerebrale presenta piccole emorragie.

Gli studi istologici nello stomaco indicano segni di gastrite sierosa o fibrinosa. Nell'intestino tenue si riscontrano necrosi e desquamazione dell'epitelio villoso, fino alla loro completa esposizione; nel fegato e nei reni si riscontra distrofia granulare. Nel cervello vengono rilevati "accoppiamenti" linfocitici perivascolari e focolai di proliferazione gliale.

Localizzazione del virus. A causa della sua resistenza agli acidi, il virus passa attraverso lo stomaco e penetra nell'epitelio dell'intestino tenue. La riproduzione del virus nel citoplasma delle cellule dei villi della mucosa provoca degenerazione e necrosi entro un giorno dall'infezione. Sotto l'influenza dei prodotti di decadimento di queste cellule, aumenta la permeabilità delle pareti dei capillari, il virus penetra nel sangue, si diffonde in tutto il corpo ed entra negli organi parenchimali, nelle mucose del naso, nella trachea, nelle tonsille, dove si moltiplica. Dagli organi attraverso vie periferiche, il virus entra nei gangli periferici, nei neuroni del midollo spinale e del cervello.

Tuttavia, la maggior parte del virus è localizzata nell'epitelio intestinale, causando necrosi e desquamazione delle cellule villi, che provocano l'atrofia dei villi. Questo processo è più pronunciato nel duodeno, nel digiuno e nell'ileo e porta all'interruzione dei processi digestivi, dispepsia, diarrea, disidratazione e disturbi metabolici. Si notano acidosi, intossicazione generale e morte di animali. Il virus raggiunge la sua massima concentrazione nell'epitelio dell'intestino tenue, nel contenuto del tratto gastrointestinale e nel tessuto polmonare. Nei suinetti di 3 settimane, il virus viene isolato solo dall'intestino entro 3-5 giorni dall'infezione.

Il virus viene escreto dal corpo di un animale malato nelle feci, meno spesso nelle urine e in altri escrementi. La diffusione virale viene osservata per due mesi. Ma nel corpo, il VIGS può persistere per mesi, anni e può peggiorare sotto stress.

Fonte di infezione. La principale fonte di IGS sono gli animali nel periodo di incubazione, gli animali malati e quelli guariti (entro un mese). Trasmettono il virus per via alimentare e aerogena. L'infezione può essere diffusa da cani e volpi, che rappresentano una fonte inapparente (asintomatica) di suini. Il virus può essere trasmesso anche dalle mosche domestiche, nel cui intestino tenue può essere rilevato per 3 mesi e negli organi respiratori fino a 11 giorni.

In condizioni naturali, maiali e cani sono sensibili al virus. Tra i suini, i suinetti di età inferiore a 3 settimane sono i più suscettibili alle infezioni. I cani possono essere portatori invarianti del virus o ammalarsi di perdita di appetito, diarrea, vomito e ipertermia. Il virus isolato da cani malati è riuscito a infettare i maialini di una settimana. L'infezione si distingue in forma epizootica ed enzootica.

L’ampia diffusione dell’IHS, l’alto tasso di mortalità dei suinetti appena nati, la scarsa efficacia del trattamento e la possibilità di introdurre il virus negli allevamenti da parte degli uccelli migratori causano notevoli danni economici all’allevamento di suini.

Diagnostica. La diagnosi viene effettuata sulla base dell'analisi dei dati epidemiologici, dei sintomi della malattia e dei risultati di laboratorio.

Il materiale patologico per le ricerche di laboratorio viene prelevato da 8-9 suinetti malati (2-3 suinetti da una cucciolata) nella fase iniziale dei segni clinici della malattia. Viene prelevato un pezzo di digiuno o ileo lungo 10-12 cm con contenuto e linfonodi mesenterici. Inoltre, è possibile inviare per la diagnosi pezzi di polmone, fegato, milza, reni e cervello.

I sieri accoppiati vengono ottenuti da scrofe le cui figliate hanno suinetti neonati malati con un intervallo di 21 giorni.

Diagnostica di laboratorio. Rilevamento virus. Viene effettuata la rilevazione dell'antigene virale (proteina) durante l'IHS Con utilizzando RIF come metodo di diagnostica rapida. La reazione è considerata positiva se i preparati contengono un bagliore verde brillante di cellule o citoplasma con granuli luminosi di diverse dimensioni in assenza di fluorescenza nei preparati di controllo. Nel RIF vengono utilizzati anticorpi contro il virus della peritonite infettiva felina, poiché gli anticorpi contro VIGS ottenuti da suinetti possono dare un bagliore non specifico.

L'ELISA in fase solida può essere utilizzato con successo anche per rilevare il virus IHS. L'uso di anticorpi monoclonali in RIF ed ELISA consente la simultaneità Con il rilevamento di VIGS lo differenzia da RCVS.

La controimmunoelettroosmoforesi (CIEOF) consente di rilevare facilmente la CIGS negli estratti del contenuto intestinale di suinetti malati.

Il virus attivo nel materiale patologico viene rilevato mediante test biologico su colture cellulari e animali naturalmente sensibili. Il materiale di un test biologico positivo contiene il virus isolato. Il test biologico viene effettuato su linee cellulari primarie e continue di suinetti. Tipicamente, la CPE del virus si verifica dopo 2-7 passaggi e non è causata da ogni ceppo di VIGS. Le scrofe gravide possono essere utilizzate 3-5 giorni prima del parto. Il test biologico è considerato positivo se, dopo 24 ore, i suinetti nati da una scrofa infetta si ammalano di IGS clinica. Un metodo più affidabile per rilevare e isolare il VIGS è un test biologico sui suinetti.

Per isolare il virus, i suinetti vengono uccisi 24 ore dopo la comparsa della diarrea e i materiali ottenuti da essi vengono sottoposti a test virologici.

L'identificazione del virus isolato viene effettuata:

studi istologici. L'atrofia dei villi viene rilevata nell'intestino tenue; i vacuoli vengono rilevati nel citoplasma delle cellule epiteliali;

pH in colture cellulari e in suinetti sensibili di età compresa tra 1 e 5 giorni;

ELISA in fase solida utilizzando anticorpi mono e policlonali.

Sierodiagnosie retrospettivadiagnostica. Per una diagnosi più accurata è meglio esaminare sieri accoppiati prelevati ad intervalli di 3-4 settimane.

La rilevazione e la titolazione degli anticorpi anti-VIGS vengono effettuate utilizzando:

pH nella coltura cellulare Con diluizioni doppie dei sieri test;

RIGA. È più sensibile dell'RN e rileva gli anticorpi già al 4° giorno di malattia. Vengono utilizzati sia per confermare la diagnosi clinica che per determinare il portatore del virus, le forme latenti della malattia e monitorare lo stato epizootico degli allevamenti per quanto riguarda le gastroenteriti;

ELISA in fase solida. Il metodo consente di rilevare gli anticorpi anti-VIGS prima e con titoli più elevati rispetto ai RN;

RTGA con eritrociti di cavia in concentrazione dello 0,6% ad una temperatura di 4 °C. La reazione è adatta per la rilevazione di anticorpi nel siero sanguigno e nel latte delle scrofe;

Metodo RIF indiretto utilizzando VIGS contenuto in colture cellulari infettate con esso. Ha una serie di vantaggi rispetto a Marina militare.

Diagnosi differenziale. La sindrome diarroica nei suini ha un'eziologia prevalentemente virale, con la rota e i coronavirus come agenti patogeni predominanti. La differenziazione di queste malattie e un'ampia analisi epidemiologica vengono effettuate principalmente utilizzando l'ELISA.

L'infezione dovuta a RCVS viene inizialmente testata come IGS e può essere differenziata mediante studi specifici. Il coronavirus respiratorio suino persiste negli allevamenti chiusi Con focolai epizootici ciclici anche sullo sfondo di anticorpi sierici passivi. Il coronavirus respiratorio suino è pneumotropico, mentre il VIGS è enterotropico.

Immunità e prevenzione specifica. Nell’IHS, l’immunità intestinale locale è cruciale. Gli anticorpi umorali non proteggono gli animali dalle infezioni. Nei suinetti l'immunità è debole e di breve durata, nei suini guariti dalla malattia dura fino a due anni.

Dopo la penetrazione orale, ma non parenterale, di VIGS nel corpo, l'IgA secretoria viene sintetizzata con la partecipazione dei tessuti linfoidi respiratori e intestinali. Possono essere trovati nel contenuto intestinale e nel siero del sangue. La comparsa di quantità significative di IgA nel colostro è il risultato della loro sintesi da parte di cellule immunocompetenti che migrano verso le ghiandole mammarie.

Insieme all’immunità locale mediata da anticorpi, l’immunità cellulo-mediata svolge un ruolo importante nella protezione contro le malattie. Tuttavia, il meccanismo di resistenza dell’epitelio del piccolo intestino al VIGS non è stato ancora completamente studiato.

Tenendo conto delle caratteristiche dell'immunità nell'IHS, viene costruita una strategia per la prevenzione specifica della malattia. Per analogia con la via naturale dell'infezione, viene utilizzata una combinazione di vaccinazione orale e intranasale. La vaccinazione delle scrofe gravide con altri metodi (intramuscolare, intramammaria) è risultata meno efficace.

Insieme all'uso diffuso di vaccini vivi (dal ceppo Roma della DDR, ceppo VGNKI n. 5), sono in corso i lavori per creare vaccini inattivati, a subunità ed eterologhi per la prevenzione specifica dell'IHC.

Bibliografia:

Belousova R.V., Preobrazhenskaya E.A., Tretyakova I.V. – Virologia veterinaria / Ed. prof. R.V. Belousova. – M.: KolosS, 2007. – 424 pag.

La gastroenterite infettiva suina (IGP) (gastroenterite suina trasmissibile - TGP, malattia di Doyle e Hitchings) è una malattia acuta, altamente contagiosa, che colpisce soprattutto i suinetti fino a 3 mesi di età, che si manifesta con vomito, diarrea grave e mortalità elevata (spesso fino a 100 anni). %) nei suinetti fino a 2 mesi di età. -Non molto vecchi.

L'IGS è stato descritto per la prima volta da Doyle e Hitchings (USA) nel 1946. Il virus della gastroenterite infettiva suina (PIGS) è stato isolato e descritto per la prima volta dal ricercatore giapponese Tayima (1970). Oltre al VIGS, i coronavirus suini comprendono anche il virus dell’encefalomielite GA e il virus della diarrea virale epizootica. Quest'ultimo è un po' più semplice. A quanto pare, il gruppo delle diarree virali epizootiche dovrebbe includere il virus KV-777, che provoca massicce epidemie di diarrea in suini di diverse età e induce la formazione di antigeni nel citoplasma dell'intestino tenue e crasso. Al microscopio elettronico si trova nel contenuto intestinale e nelle feci dei suinetti malati. Epidemie del virus sono state osservate in Giappone (1956), Gran Bretagna (1957), Canada (1964) e in molti paesi europei, compresi i paesi della CSI, il 19-54% degli allevamenti di suini in Europa e Nord America sono sieropositivi al THS . La prevalenza nella maggior parte dei paesi europei è intorno al 100%. Questa situazione è causata da una variante respiratoria del virus ICV, chiamata coronavirus respiratorio suino (PRCV), che si è diffusa rapidamente dal 1986. Le perdite economiche sono significative. Essi consistono nell'alto tasso di mortalità dei suinetti appena nati, nella scarsa efficacia del trattamento e nella difficoltà di prevenire l'introduzione del virus in primavera, poiché gli uccelli, soprattutto gli storni, svolgono un ruolo significativo in questo. L’efficacia dei vaccini commerciali è molto limitata.

Sintomi e cambiamenti patologici. Il virus colpisce i suinetti fino a 3 mesi di età. In età avanzata si ammalano senza morire. Le scrofe in lattazione malate hanno una produzione di latte ridotta. La malattia si manifesta clinicamente con mancanza di appetito, vomito, diarrea (feci schiumose di colore biancastro, giallastro o verdastro), disidratazione, debolezza ed elevata mortalità. Il periodo di incubazione per i suinetti di 1-5 giorni dura 12-18 ore, tutti i malati muoiono. Nei suinetti di 6-10 giorni, il periodo di incubazione è di 18-36 ore e la mortalità tra loro raggiunge il 67%. Man mano che gli animali invecchiano, il periodo di incubazione aumenta e la mortalità diminuisce. La sensibilità relativamente elevata al virus IGS può essere associata ad una diminuzione della citotossicità dei linfociti contro le cellule infettate dal virus nelle scrofe durante il parto, nonché all'assenza di citotossicità dei linfociti nei suinetti durante la prima settimana dopo la nascita. In queste condizioni, i suinetti possono essere protetti solo con l'AT materna ottenuta dal colostro e dal latte. Oltre agli enterociti, la cui sconfitta è accompagnata dall'atrofia dei villi dell'intestino tenue, i macrofagi alveolari, così come le cellule delle tonsille e di altri organi, possono fungere da cellule bersaglio per il virus. Nelle cellule tonsillari dei suinetti malati, l'infezione da HIV è stata rilevata ancora più spesso che nelle cellule del digiuno.

Esistono tre fasi della malattia: preclinica, clinica e di guarigione. Nella fase preclinica si osserva diminuzione dell'appetito, sonnolenza, aumento della sete e talvolta febbre (41-41,5 ° C) e vomito. Il periodo clinico è caratterizzato da grave diarrea con rilascio di gas. Le feci sono di colore grigio-rosso o giallo-verde e vengono rilasciate spontaneamente. La fase di recupero è più lunga. I suinetti malati diventano molto assetati, bevono molta acqua e succhiano il latte, che esce non digerito sotto forma di feci liquide. La perdita di liquidi porta a una grave disidratazione del corpo, con conseguente acidosi metabolica e altri cambiamenti nell’equilibrio elettrolitico del sangue. La morte è solitamente preceduta dal coma, che avviene il 3° giorno. Nei suinetti sopravvissuti, la rigenerazione dei villi inizia dopo 3-4 giorni e la diarrea si arresta. La malattia dura 2-5 giorni, la mortalità diminuisce con l'aumentare dell'età dei suinetti.

Il fattore età influisce anche sulla durata e sulla gravità della malattia. Le scrofe infette attraverso il contatto con suinetti malati manifestano aumento della temperatura corporea, perdita di appetito, depressione, lieve diarrea e cessazione dell'allattamento. Il recupero avviene in 7-10 giorni. I suinetti sopravvissuti sono rachitici. Talvolta l'encefalomielite con iperestesia è associata a disturbi gastrointestinali. Dal 43 al 98 % I suini adulti in vari paesi sono infettati dal virus BNA. L'AT materna scompare nei suinetti entro le 15 settimane di vita. Quindi gli AT prodotti attivamente compaiono a causa di un'infezione inapparente sotto la protezione degli AT materni.

Le gastroenteriti virali si manifestano prevalentemente in associazione ad infezioni batteriche e più spesso a colibacillosi (37,9%) causata dal pc. 0-138, 0-103, 0-78, 0-86 e 0-1. Va tenuto presente che la RCVS provoca solitamente un'infezione respiratoria subclinica. È stata osservata febbre dopo il test intratracheale, mentre altri ricercatori hanno osservato una polmonite fatale e una grave perdita di peso nei suinetti di 90 giorni, cosa che non è stata osservata nei suini di 15 settimane.

I cambiamenti patologici nei suinetti morti nei primi 3 giorni di vita si notano principalmente nello stomaco e nell'intestino tenue. Nello stomaco c'è una piccola quantità di colostro coagulato, la sua mucosa è gonfia, rossa e in alcuni punti viscida. Cambiamenti simili si verificano nell'intestino tenue. Nei suinetti di 2 settimane, il modello autoptico è più pronunciato. Il cadavere è emaciato, la congiuntiva, le mucose delle cavità nasali e orali sono pallide, con una tinta bluastra, i muscoli scheletrici sono flaccidi, secchi. Macchie rosso-viola compaiono spesso sulle orecchie, sulla pancia e sul collo. La mucosa del fondo dello stomaco è fortemente iperemica, gonfia, ricoperta di muco, talvolta punteggiata da emorragie puntiformi e in alcuni punti erosa e ulcerata. L'intestino tenue è disteso di gas, pieno di contenuto liquido, in uno stato di infiammazione catarrale o catarrale-emorragica. La mucosa dell'intestino tenue è congestionata o in uno stato di infiammazione catarrale-emorragica. I linfonodi mesenterici, portali, renali e gastrici sono gonfi, succosi, la milza è piena di sangue. Il fegato è pallido o maculato, di consistenza flaccida. I reni sono pallidi, talvolta con piccole emorragie sotto la capsula. La mucosa della vescica è gonfia e punteggiata di emorragie. Il cuore è ingrandito, il miocardio è grigio, flaccido, subepi - e ci sono piccole emorragie lungo l'endocardio lungo i vasi. Polmoni senza particolari alterazioni o con sangue piuttosto puro. Le membrane del cervello sono iperemiche, la sostanza del cervello è talvolta ammorbidita, gonfia, con piccole emorragie. Nelle scrofette e nei suini adulti, lo schema autoptico è simile a quello dei suinetti di 2 settimane, ma meno pronunciato.

Nei suinetti morti 1-3 giorni dopo la nascita, nello stomaco e nell'intestino tenue si verificano degenerazione della mucosa e necrosi delle cellule epiteliali, pletora e gonfiore della placca del tessuto connettivo e dello strato sottomucoso dell'intestino. Nei suinetti di 2 settimane di età si rilevano cambiamenti più profondi. Nello stomaco sono presenti pletora ed emorragie, degenerazione delle cellule tegumentarie, estese erosioni e necrosi, circondate da infiltrati cellulari di leucociti. Spesso si nota gastrite sierosa o fibrinosa. Nell'intestino tenue si riscontra iperemia, ipersecrezione, vacuolizzazione, necrosi e desquamazione dell'epitelio villoso fino alla completa esposizione. La maggior parte dei villi sono atrofizzati e deformati. Gli strati propri e sottomucosi sono iperemici, edematosi, spesso con emorragie, infiltrati di cellule linfoidi, eosinofile e plasmatiche. Nell'intestino crasso si osserva iperemia, talvolta distrofia e necrosi delle cellule epiteliali della cripta. La milza e i linfonodi sono infiltrati di eritrociti, il loro stroma è edematoso. Nel fegato si osserva iperemia, degenerazione granulare degli epatociti e violazione della struttura del fascio, nei reni si osserva degenerazione granulare dell'epitelio del canale, nel cuore si osservano alterazioni delle proprietà tintoriali del sarcoplasma delle fibre muscolari, gonfiore delle il tessuto connettivo intermuscolare. Nel cervello si trovano “accoppiamenti” linfocitari perivascolari e focolai di proliferazione gliale.

Entrando nel corpo attraverso il tratto gastrointestinale o il sistema respiratorio, il virus penetra nell'epitelio dell'intestino tenue. Moltiplicandosi nel citoplasma delle cellule dei villi della mucosa, provoca degenerazione e necrosi. Sotto l'influenza dei prodotti di degradazione di queste cellule e tossine, si verificano disturbi emodinamici e aumenta la permeabilità delle pareti del letto microcircolare, che facilita la penetrazione di parte del virus nel sangue. Tuttavia, la maggior parte del virus si localizza nell'epitelio intestinale, causando degenerazione, necrosi e desquamazione delle cellule villose, con conseguente accorciamento di queste ultime (atrofia). La necrosi cellulare e l'atrofia dei villi più pronunciate si notano nella parte caudale del duodeno, del digiuno e dell'ileo. Questi cambiamenti nelle cellule epiteliali sono la causa di un'interruzione acuta dei processi digestivi, dispepsia, diarrea, disidratazione e disturbi metabolici. Si notano acidosi, intossicazione generale e morte di animali.

La diffusione del virus IHS in tutto l'epitelio intestinale avviene mediante il rilascio del virus dalle cellule infette nel lume intestinale e quindi l'infezione delle cellule vicine attraverso il dominio apicale. Con l'infezione da PCV non si osserva atrofia delle papille intestinali piccole. Tuttavia, nella maggior parte degli animali inoculati, la polmonite interstiziale si sviluppa nei polmoni.

Morfologia e composizione chimica. VIGS è a forma di conchiglia, pleomorfo, di 60-160 nm di diametro, ha uno strato di processi a forma di mazza sulla superficie di proiezione lungo 12-25 nm. Il virus contiene un grande RNA poliadenilato più (>23 kDa). L'RNA estratto dai virioni è infettivo. Durante il processo di replicazione, vengono sintetizzati 5-7 mRNA subgenomici con estremità comuni da 3" per la produzione di proteine ​​virali. È stata determinata la sequenza nucleotidica all'estremità da 3" del genoma corrispondente all'mRNA. La densità di galleggiamento dei virioni in un gradiente di saccarosio è 1,18-1,20 g/cm3. I fosfolipidi e i glicolipidi incorporati nell'involucro sono di origine cellulare, quindi l'involucro del virione è cellula-dipendente. VIGS contiene tre proteine ​​strutturali principali: la proteina nucleocapside (N), la glicoproteina del piccolo involucro (M) e la grande glicoproteina peplomerica (S). Nel virione maturo, la proteina N viene “intrecciata” nell’RNA virale, formando un complesso ribonucleoproteico. L'estremità N-terminale eterofila della glicoproteina M sporge dal virione e ha l'unico sito glicoproteico accessibile e media l'induzione di CSA e BNA, nonché dell'interferone. Glicoproteina S (o proteina peplomerica) mol. M. 195-220 kD sembra una corona virale sui modelli di diffrazione degli elettroni. È responsabile dell’attaccamento del virus alla cellula, della fusione della membrana e dell’induzione di VNA complemento-indipendente. La glicoproteina S purificata induce la formazione di VNA, che neutralizza la replicazione virale in tutte le fasi.

È stata determinata la sequenza degli 8300 nucleotidi principali da 3" dell'RNA genomico di VIGS di Perdue, adattato alle cellule. Questa regione del genoma contiene tre geni strutturali principali con consistenza dell'orientamento del coronavirus 5" - S - M - N -U E quattro grandi fotogrammi di lettura aperti che codificano potenziali proteine ​​virali.

La parte da 5" del genoma codifica una replicasi/trascrittasi virale come nel virus IBV. Il grado di omologia degli aminoacidi tra le proteine ​​strutturali dell'IBV e i coronavirus antigenicamente non correlati conferma che questi coronavirus hanno un'origine evolutiva comune. Tuttavia, il metodo di l'ibridazione incrociata dell'acido nucleico tra coronavirus antigenicamente non correlati non indica una parentela osservata a causa di una base bassa di sequenze omologhe. L'estremità da 3" dell'RNA genomico PKBC è stata recentemente sequenziata. Il confronto delle sequenze nucleotidiche e amminoacidiche di PKBC e VIGS rivela un'omologia del 96%. Il genoma di RKVV contiene due mappe diverse: 1 - il gene S manca di 672 nucleotidi nella zona 5", codifica per una grande proteina peplomer; 2 - il primo frame di lettura aperto del gene S presenta una doppia delezione. Questo cambiamento genetico causa alterazioni dei tessuti tropismo di RKVV. Cambiamenti simili nel fenotipo sono stati riportati per la variante a piccola placca del VIGS. Sebbene il gene S della variante a piccola placca e il VIGS selvaggio siano simili, una grande delezione (462 nucleotidi) originata dal gene S si verifica nel variante a piccola placca.Questa eliminazione rivela la cornice di lettura aperta di una potenziale proteina codificata e la porzione N-terminale della seconda potenziale proteina virale.La patogenicità di RCVS e la variante a piccola placca di SVIGS sembra essere ridotta come risultato di questi fattori genetici eliminazioni.

La sequenza nucleotidica del gene S del virus della peritonite infettiva felina (FIPV) è stata determinata e confrontata con quella del gene S della FIV. Sulla base dell'omologia nucleotidica e amminoacidica, sono stati identificati due domini distinti. Un dominio (amminoacidi 1–274) aveva un'omologia nucleotidica del 39%, mentre l'omologia nel dominio 2 (amminoacidi 275–1447) era del 93%. Una possibile spiegazione per queste elevate divergenze di sequenza all'estremità 31 potrebbe essere che l'HIPC si verifica mediante ricombinazione RNA-RNA del VIGS con il virus associato. Un’alta frequenza di ricombinazione RNA-RNA è stata descritta anche per i coronavirus murini.

Il virus è sensibile all'etere, al cloroformio e al desossicolato di sodio e resistente alla tripsina. Non inibito dagli inibitori del DNA. Inattivato con soluzione di formalina allo 0,03%, Lysovet all'1% (una miscela di fenolo e aldeide), soluzione allo 0,01% di p-propiolattone, ipoclorito di sodio, idrossido di sodio, iodio. È stata studiata l'inattivazione termica comparativa di due ceppi del virus della gastroenterite infettiva Perdue e D25. L'agente patogeno è resistente al congelamento. Quando congelato, il materiale contenente virus dura 5-8 settimane, a -18 °C - fino a 18 mesi, a -20, -40 o -80 °C - 365 giorni; se riscaldato a 56 °C, viene inattivato in 30 minuti e fino a 50 °C in presenza di MgCI2 1 M - in 1 ora; a 37 °C, la completa perdita di infettività si è verificata dopo 4 giorni. Resistente al pH (4-9). Nelle feci liquide al sole viene inattivato in 6 ore, all'ombra - in 3 giorni. L’amantadina e la puromicina inibiscono la riproduzione del virus. VIGS è stabile nella bile dei suinetti a pH 3,0, mantenendo la sua infettività nell'intestino tenue.

Struttura antigenica. Il nucleo di VIGS è rappresentato dall'RNA genomico con una proteina nucleocapside (N) legata covalentemente e fosforilata con una mole. m.47 kD. Attorno ad esso è presente una proteina lipidica originata dal reticolo endoplasmatico delle cellule ospiti, nella quale sono localizzate lipoproteine ​​virus-specifiche di due tipi: lipoproteine ​​integrali di membrana (M) con una mol. m.28 kDa e glicoproteina peplomerica (S) con mol. M. 200 kDa, che forma processi superficiali (peplomeri). Nel virus TGS sono stati identificati 4 siti Ag (A, B, C e D) e sono stati identificati 11 epitopi, 8 dei quali sono virus neutralizzanti.

I mAbs anti-gpS che neutralizzano il virus TGS sono indipendenti dal complemento, mentre gli AT contro la glicoproteina M neutralizzano anche il virus TGS, ma esclusivamente in presenza di complemento. VNA alle proteine ​​S e M indicano l'eterologia dell'antigene degli isolati del virus TGS. Nei coronavirus suini e canini, è stato trovato almeno un determinante antigene comune nella proteina protettiva, che fornisce una protezione quasi identica ai suinetti quando le madri sono immunizzate con virus omo ed eterologhi. Secondo rapporti precedenti, i virioni TGS contengono le seguenti proteine: proteina peplomerica E2 (220 kDa), proteina Ech2 (175 kDa), che è il precursore della proteina E2, proteina dell'involucro a basso peso molecolare E1 (29 kDa), nucleoproteina N (47 kDa). Il siero convalescente contiene PA per le proteine ​​S e M, spesso per moli di proteine ​​intracellulari codificate dal virus. m.14 kD. I MonAb sono stati ottenuti per ceppi attenuati e virulenti di VTGS e vengono utilizzati per caratterizzare le proteine ​​virali e mappare gli epitopi che rilevano AT. I principali determinanti non tralizzanti sono associati alla glicoproteina S; questi epitopi sono altamente conservati nella maggior parte dei ceppi VIGS.

Il mAb antiglicoproteina-M ha un'attività neutralizzante bassa o nulla, ma può essere significativamente aumentata dal complemento. L'uso di mAbs neutralizzanti per determinare la mappa epitopica della glicoproteina S ha mostrato la presenza di 4-5 diversi siti AG contenenti epitopi altamente conservati nei siti A e B, riconoscibili dalla forte neutralizzazione dei mAbs.

Variabilità antigenica. I ceppi del virus isolati da animali in diversi paesi sono sierologicamente identici, sebbene negli ultimi anni siano emerse varianti. Esiste una differenza immunologica tra l’infezione da HIV intestinale e quella indotta dalla coltura. Il virus intestinale contiene AG A. Nel 1977 fu stabilita la relazione AG tra VIGS e VPK e lo stesso coronavirus canino (CCV). Il virus IHS ha un sierotipo e non è correlato al virus della diarrea enzootica suina o al virus HA suino. Il coronavirus respiratorio suino (RSCV/PKBC), recentemente isolato, diffusosi in diversi paesi dell’Europa occidentale, si è rivelato strettamente correlato al SIV in termini di antigeni. La sua principale differenza è l'eccezionale pneumotropismo in assenza di enteropatogenicità. In termini di AG, entrambi i virus sono simili tra loro e hanno gli stessi epitopi neutralizzanti in tutte le proteine ​​virioniche (N, S, M). Tuttavia, i mAbs specifici per la proteina VIGS S riconoscono PKBC. Il virus della diarrea epizootica suina è un tipico coronavirus in tutte le sue proprietà, sebbene non abbia una relazione antigenica con altri membri della famiglia dei coronavirus. Il grado di relazione tra VIGS e RCVV è stato studiato in termini di livello di induzione di specifiche reazioni immunitarie cellulari e di protezione contro l'infezione da provocazione nei suinetti.

VIGS non è AG correlato ad altri due coronavirus suini: il virus dell’encefalomielite HA (PEDV) e il virus della diarrea epidemica dei suinetti (CV777). L'encefalite causata dal virus GA è stata segnalata in Europa e Taiwan, mentre l'AT è stata identificata in un numero limitato di suini adulti negli Stati Uniti. VIGS, KVS e VIPK AG sono imparentati. Questi tre virus possono rappresentare un numero di mutanti del ceppo virale originale. La reazione crociata si verifica anche a livello delle proteine ​​strutturali S, N e M nelle reazioni di radioimmunoprecipitazione, immunoblotting e ELISA. Reazioni crociate simili con le proteine ​​strutturali di VIGS e PK. La VS è stata osservata utilizzando siero policlonale nell'immunoblotting.

Nelle cellule dell'intestino tenue di un suinetto infetto, il virus si moltiplica entro 2 settimane e viene escreto nelle feci per 7-10 giorni dopo la guarigione clinica. In concentrazioni sufficientemente elevate, si accumula nell'epitelio dell'intestino tenue, nel contenuto del tratto gastrointestinale e nel tessuto polmonare. Il virus che entra nell'organismo con il cibo, a causa della sua resistenza agli acidi, passa nello stomaco e si moltiplica nell'intestino tenue, distruggendo l'epitelio dei villi. Le altre cellule non sono danneggiate. Il virus è localizzato nel citoplasma delle cellule cilindriche dei villi dell'intestino tenue. Le cellule colpite vengono rilevate entro 5 ore dall'infezione. Dopo 9-12 ore, si verifica un ciclo ripetuto di replicazione e dopo 16-18 ore nella maggior parte delle cellule si nota un IF specifico. Dopo 24 ore si verifica l'atrofia dei villi e dopo 3 giorni avviene la rigenerazione cellulare, che si completa il 7° giorno.

I suini malati e guariti diffondono il virus fino a 2 mesi. La concentrazione del virus negli escrementi è particolarmente elevata all'esordio della malattia e durante il suo sviluppo (106-107 IDbo/ml). Si ritrova nel sangue e negli organi parenchimali durante il periodo prodromico al primo aumento della temperatura corporea. Con lo sviluppo della viremia, viene rilevato negli organi parenchimali, così come nella mucosa del naso, nella trachea, nelle tonsille e nei titoli inferiori nel sangue. Nei suini adulti, il virus viene raramente rilevato negli organi digestivi e respiratori, nonché nei linfonodi regionali. Non si replica nei linfociti. Durante l'infezione sperimentale di suinetti di 3 giorni, il 2° giorno dopo l'inoculazione, il virus viene isolato dai polmoni, dal fegato, dal pancreas e dal sangue. Nei successivi 9 giorni il suo titolo è ancora elevato, ma entro il quindicesimo giorno non viene più rilevato negli organi. Nei suinetti di 3 settimane, il virus viene isolato solo dall'intestino entro 3-5 giorni dall'infezione. Tuttavia, quando i suinetti appena nati vengono infettati per via orale o intranasale, il virus si replica nella mucosa nasale, nelle tonsille e nell'intestino tenue, quindi si sposta lungo le vie nervose fino ai gangli periferici e compare nei neuroni del midollo spinale e del cervello. Nei suinetti ottenuti mediante isterectomia da scrofe infette sperimentalmente nei giorni 74 e 95 di gestazione, sono state rilevate localizzazione intestinale del virus e atrofia dei villi intestinali. I suinetti avevano AT al virus VIGS. La mancanza di zinco negli alimenti aggrava la malattia.

Il virus viene escreto dal corpo di un animale malato principalmente nelle feci e, in misura minore, nelle urine e negli escrementi. Può sopravvivere negli organi interni e nei linfonodi degli animali convalescenti per molti mesi e anni. L’equilibrio virus-ospite può essere interrotto dallo stress. I suinetti infettati a 5 settimane di età sono rimasti portatori del virus per 104 giorni. È stato accertato che l'infezione delle scrofe gravide 2-3 settimane prima del parto porta a malattie diffuse e ad un'elevata mortalità nei suinetti. Quando le regine vengono infettate 1,5-2 mesi prima del parto, i suinetti rimangono sani per tutto il periodo dell'allattamento. Dopo lo svezzamento dalla madre si ammalano facilmente e il tasso di mortalità è insignificante. Nei suinetti infettati sperimentalmente è stata osservata la trasmissione del virus per 2,5 mesi (periodo di osservazione).

Attività antigenica. Il virus IGS ha un'attività antigenica pronunciata e induce la sintesi di VNA, la cui attività è dovuta alle IgA, e durante l'immunizzazione - IgG. Nei suini infetti per via os da pz virulenti. Miller, sono apparse le IgA AT e nei pazienti infetti per via parenterale con PC culturali attenuati. Purdue-IgG. La nucleoproteina virale (N) non è in grado di indurre la sintesi di BHA. Nel colostro e poi nel latte delle scrofe convalescenti tali AT sono presenti per diverse settimane.

I suinetti di scrofe guarite dalla malattia o precedentemente infette in condizioni naturali sono resistenti alla malattia se consumano tale colostro o latte immediatamente dopo la nascita e almeno ogni 4 ore. L'immunità passiva contro le infezioni intestinali è dovuta alle IgA del latte. I titoli di AT nel colostro e nel latte di scrofe infette sono più alti che nel siero del sangue. Livelli significativi di IgA vengono rilevati nel colostro e nel latte solo dopo che le scrofe hanno mangiato materiale contenente virus. Un possibile meccanismo che spiega questo fenomeno è che gli immunociti sensibilizzati con Ag della lamina propria del tratto intestinale popolano la ghiandola mammaria. La componente subunità del VIGS (glicoproteina), quando isolata dai virioni mediante ultrasuoni e separata dai restanti componenti virali (mediante centrifugazione isopicnica), è in grado di proteggere i suinetti quando somministrata per via intramuscolare. Gli animali vaccinati hanno sviluppato una risposta immunitaria umorale. Il principale meccanismo di neutralizzazione è l'inibizione dell'attaccamento del virus alla cellula.

Infezione sperimentale. Causato dall'introduzione del virus per via os o intranasale. I suinetti più sensibili sono i maialini da latte di età compresa tra 1 e 15 giorni, anche se in molti casi la malattia può essere riprodotta negli animali adulti. L'infezione si ottiene facilmente solo quando il materiale viene somministrato per via orale. I suinetti di età compresa tra 1 e 5 giorni possono essere infettati per via intranasale; È ovvio che con l'instillazione intranasale del materiale, circa il 90% di esso entra nel tratto gastrointestinale. Con i metodi di infezione parenterale, di solito non è possibile riprodurre la malattia o sono necessarie dosi di virus 1000 volte maggiori rispetto all'infezione orale. Porcellini d'India, topi bianchi e topi lattanti di 1-5 giorni di età, conigli e criceti sono insensibili al VIGS. L'infezione dei suinetti con VTSE porta al rilascio rapido e massiccio di interferone-SS (IFN-a) nel siero e nelle secrezioni. I suinetti privati ​​del colostro mediante taglio cesareo sono stati infettati per via orale con il ceppo virulento Miller di VTGE. Le cellule produttrici di IFN-α sono state caratterizzate in situ mediante immunoistochimica utilizzando siero IFN-α di coniglio anti-suino. È stato rilevato esclusivamente nelle cellule intestinali e nei linfonodi mesenterici, a partire da 6 ore dopo l'infezione. Il picco si è verificato dopo 12-18 ore.Le cellule produttrici di IFN erano localizzate tra gli enterociti dell'intestino tenue (la sua superficie epiteliale), nella lamina propria, attorno alle placche di Peyer e, con alta frequenza, nei linfonodi mesenterici. I linfonodi della milza e del popliteo contenevano pochissime cellule produttrici di IFN. La doppia colorazione immunoistochimica dei marcatori leucocitari sui linfonodi mesenterici nelle loro sezioni criogeniche ha mostrato che le cellule produttrici di IFN contengono antigene leucocitario suino di classe II (SLA) e non sono colorate con anticorpi monoclonali contro i macrofagi. Gli antigeni virali sono presenti nei linfonodi mesenterici e sono associati all'IFN. È stata rilevata l'espressione del complesso maggiore di istocompatibilità di classe II, che può resistere alle cellule dendritiche della mucosa in grado di produrre IFN dopo l'infezione in vitro.

Coltivazione. Il virus si moltiplica nelle colture primarie di cellule dei testicoli, della pelle, dei polmoni, della tiroide, del digiuno, dell'ileo, dell'epitelio della mucosa delle cavità nasali e nelle cellule trapiantate dei testicoli dei suini, senza causare CPD nei primi passaggi, così come nelle colture d'organo dell'esofago. Raramente gli isolati di campo causano la distruzione cellulare nel primo passaggio; Il CPE compare solo dopo l'adattamento preliminare del virus. Adattato alle colture cellulari, si moltiplica rapidamente e le distrugge entro 2-4 giorni, a seconda della dose. Il virus è ben coltivato in una coltura in sospensione della linea cellulare renale di suinetto PPK.-666. Questa coltura ha dimostrato di essere un sistema altamente produttivo per la produzione su larga scala del ceppo vaccinale SIVIG. Il grado di stimolazione della riproduzione del coronavirus bovino da parte della trypsina varia a seconda della coltura cellulare, mentre il coronavirus suino in presenza di trypsin si accumula con un titolo elevato (108-109TCD50/il) in due linee cellulari permanenti di suino (SPEVi PPS). Titoli massimi di infettività in coltivazione pz. “Pravda”, VGNKI n. 5 e V-91 in una coltura monostrato di cellule PPS ammontavano a 106 TCD50/w, mentre durante la coltivazione di espianti intestinali e polmonari fetali di un maiale in sospensione hanno raggiunto 106-5-107-5 e 1O8. °TCD50/ml, rispettivamente.

La coltura di cellule tiroidee suine e la linea continua RK-15 sono le più adatte per isolare il virus. VIGS interferisce con il virus VD-BS e VBA. Il CPE virale inizia con lo sviluppo di un sincizio piccolo o grande entro 24 ore dall'inoculazione. Successivamente i piccoli sincizi si uniscono e le cellule colpite si separano dalla superficie del vetro. Un grande sincizio con 20-40 nuclei può essere osservato quando si infetta una coltura di cellule della tiroide di maiale, mentre il sincizio trovato in una coltura di cellule di rene di maiale conteneva molto spesso 2-5 nuclei, raramente di più. Non sono stati rilevati corpi inclusi né nel citoplasma né nel nucleo. Nella coltura cellulare di rene di maiale, il CPI è meno pronunciato. Quasi tutti gli isolati virali nelle colture primarie di cellule tiroidee di maiale trypsinizzate inducono la formazione di placche, la cui dimensione varia da 1 a 5 mm di diametro. Gli isolati appena isolati inducono placche più piccole rispetto ai ceppi di laboratorio. Le placche si formano anche nella linea cellulare continua dei testicoli di maiale. In una coltura monostrato di cellule tiroidee di maiale adulte a pH 6,5, il titolo del virus è 10 volte superiore rispetto a pH 7,2 e 100 volte superiore rispetto a pH 8.

Sono state notate differenze nella coltivazione di VIGS e KVS in vitro. Entrambi i virus si sono moltiplicati in colture di cellule renali canine o in una linea cellulare continua di gatti. Virus IPK. e CVS non si è riprodotto nelle cellule ST o nella coltura di cellule tiroidee di maialino, mentre VIGS è stato isolato in entrambe le colture. Solo il VIGS non virulento adattato alla coltura cellulare è stato riprodotto nei macrofagi alveolari. VIGS AG viene rilevato nel citoplasma dell'MFA 4-5 ore dopo l'infezione. I virioni maturi si verificano nel citoplasma gemmando dal reticolo citoplasmatico e le particelle virali (65-90 nm di diametro) sono spesso osservate nei vacuoli citoplasmatici. Il virus è visibile adiacente alla membrana della cellula ospite dopo essere uscito dalla cellula infetta. Le glicoproteine ​​virali vengono identificate sulla superficie delle cellule testicolari suine.

È stata stabilita l'attività GA del virus contro gli eritrociti di polli, porcellini d'India e bovini. Tuttavia, solo il virus propagato nella coltura cellulare PPS aveva attività GA, che non influiva sull’immunogenicità. Non è stata riscontrata alcuna differenza nell’induzione di VNA e nella gravità dell’immunità protettiva quando si utilizzavano virus GA e non GA. L’attività GA dei coronavirus è associata alla quarta proteina strutturale HE (GAeete-ros). VIGS non ha una glicoproteina NE. L'attività GA del VIGS dipende dal suo sistema di riproduzione ed è associata alla glicoproteina peplomerica. Quando il virus si moltiplica nelle linee cellulari continue 1BRS e nella ghiandola tiroidea dei suini, il virus agglutina gli eritrociti della cavia in titoli di 1:64 e 1:256.

L'attività enzimatica viene rilevata nel citoplasma delle cellule di maiale infettate con VIGS, che è assente nella coltura cellulare normale e non viene rilevata nei virioni purificati. L'attività enzimatica richiede ioni Mg2+.

Fonti e vie di trasmissione dell'infezione. Esistono tre forme di infezione: epizootica, enzootica e infezione causata da RCVS, sierologicamente testata come IGS. La principale fonte di infezione sono gli animali nel periodo di incubazione, malati e guariti (entro un mese). L'infezione si trasmette attraverso mangimi, contenitori, trasporti, letame e frattaglie. Il virus viene isolato dal latte degli animali infetti durante la fase acuta della malattia. Viene rilevato nelle secrezioni nasali entro 10 giorni dall'infezione. Le feci degli animali malati sono particolarmente pericolose. L'infezione può essere trasmessa da cani e volpi poiché il virus si moltiplica nell'intestino. Il virus può essere trasmesso dalle mosche domestiche (Musca domestica). È stato possibile isolarlo dagli omogenati dell'intestino tenue delle mosche entro 104 giorni dall'infezione e dagli organi respiratori - 11 giorni. Nel corpo dei suinetti infetti sperimentalmente di diverse fasce d'età, il virus viene isolato dall'intestino, dal fegato, dalla milza, dalle feci e dai polmoni 12 ore dopo l'infezione e persiste fino a 20 giorni (periodo di osservazione). Ciò indica che i suinetti possono essere portatori del virus e fonte di infezione.

Studi sierologici condotti in Belgio nel 1984 hanno mostrato inaspettatamente un aumento significativo del numero di portatori di AT a VIGS in assenza di vaccinazioni o segni clinici di IGS. Un virus non enteropatogeno, un antigene correlato al VIGS, si è rivelato essere l'agente eziologico di questo fenomeno ed è stato isolato in una coltura cellulare. Il virus ha infettato le cellule epiteliali del tratto respiratorio e i macrofagi alveolari. Durante l'infezione sperimentale sono state infettate solo alcune cellule non identificate dell'intestino tenue e il virus è risultato limitato o completamente assente nelle feci. I suinetti hanno prodotto AT, che ha neutralizzato il VIGS. Il virus è diffuso in Europa: Belgio, Gran Bretagna, Francia, Paesi Bassi, Germania, Danimarca e Stati Uniti. L'infezione da PCV persiste negli allevamenti chiusi con epidemie epizootiche cicliche anche in presenza di AT sierica passiva.

In condizioni naturali, maiali e cani sono sensibili al virus; i suinetti appena nati sono da 2 a 1000 volte più suscettibili dei suini che hanno raggiunto la condizione di macellazione. Nei cani sono stati segnalati perdita di appetito, diarrea, vomito e ipertermia. Il virus isolato da cani malati è stato utilizzato per infettare i maialini di una settimana. I cani possono essere portatori del virus e fonte di detenzione per suini sensibili. CBC, VIGS e VIPK appartengono allo stesso gruppo di agenti antigenicamente correlati che differiscono dagli altri membri della famiglia dei coronavirus in RN e IF. In condizioni naturali è stata stabilita l'esistenza di ceppi VIGS di varia virulenza. I virus IGS, IPC e KVS differiscono nella loro patogenicità per i suinetti appena nati. L’infezione virulenta da HIV provoca gli stessi sintomi della malattia del VIGS. L'emocromo non causa segni clinici della malattia. Ad oggi non sono stati segnalati casi di infezione naturale dei suinetti con VPK o KVS. Nei suinetti infettati sperimentalmente VIPK Oppure KVS, da AT a VIGS non sono formati.

Immunità e prevenzione specifica. In caso di IGS, l'immunità intestinale locale è importante, poiché gli AT umorali non proteggono l'animale dalle infezioni. Nei suini guariti dalla malattia l'immunità dura più di 2 anni. Nei suinetti è debole e di breve durata. È stato studiato il ruolo dei tessuti linfoidi respiratori e intestinali nella creazione dell'immunità contro il VIGS. È probabile che la comparsa di IgA dopo la somministrazione orale di VIGS sia di grande importanza nella protezione contro questa infezione. La prevenzione specifica dell’IHC, nonostante la sua lunga storia, rimane ancora un problema urgente.

Sono stati isolati cinque mutanti HAD HTGE difettosi nell'emoagglutinazione. A differenza del VTSE parentale, i mutanti non si legano alla mucina suina, che è ricca di acido sialico. I mutanti presentano mutazioni puntiformi singole nella proteina S (C155F, M195V, R196S, D208N e L209P). Questi residui amminoacidici influenzano il legame con l'acido sialico. Usando i MAb, è stato dimostrato che quattro mutanti HAD avevano un sito antigenico adiacente interessato. I mutanti hanno una resistenza ridotta al detergente ossiglucoside. Questo effetto dipende dai sialoglicoconiugati cellulari associati ai virioni. Dopo il trattamento con neuraminidasi, l'HTGE parentale diventa resistente all'ossiglucoside quanto i mutanti HAD. È stato suggerito che la capacità di legarsi all'acido sialico aiuta il VTSE a combattere le sostanze simili ai detergenti incontrate durante il passaggio attraverso il tratto gastrointestinale e ad infettare l'epitelio intestinale.

Con l’immunizzazione attiva sono importanti quelle secretorie)