Экстракорпоральное оплодотворение

Искусственное оплодотворение

Искусственное оплодотворение

Искусственное оплодотворение – это процесс оплодотворения, который производится с помощью введения спермы непосредственно в матку (искусственная инсеминация) или методом in vitro (вне организма, «в пробирке»), т.е. экстракорпорально (ЭКО).

Виды искусственного оплодотворения:

1. искусственная инсеминация спермой мужа или донора (ИИСМ/ИИСД);
2. экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО).

В зависимости от показаний женщине подбирается программа искусственного оплодотворения.

1. Внутриматочная инсеминация – это введение специально подготовленной спермы с помощью специального катетера непосредственно в полость матки.

   Таким образом, сперма не проходит барьеры кислой среды влагалища и плотной защитной слизи шейки матки, и сразу попадает в нейтральную среду полости матки.

   После этого сперматозоиды самостоятельно продвигаются к маточным трубам и происходит оплодотворение яйцеклетки так же, как при естественном половом контакте.

   По данным литературы искусственного оплодотворения женщины в качестве лечения бесплодия применяется уже более 100 лет. Данная процедура проводится только в специализированных медицинских клиниках при условии полного обследования мужчины и женщины.

   Обязательным является исследования состояния матки и маточных труб – гистеросальпингография (рентгенологическое исследование с применением контрастного вещества) или лапароскопия (осмотр матки с помощью оптического прибора – лапароскопа), чтобы удостоверится в проходимости репродуктивных путей.

   Для инсеминации может быть использована как нативная («живая»), так и криоконсервированная сперма (предварительно размороженная). Сперма перед искусственной инсеминацией очищается и концентрируется.

   Искусственная инсеминация рекомендована женщинам с повышенной вязкостью шеечной слизи или кислотностью влагалищной среды. Со стороны партнёра могут быть такие показания, как эрректильная дисфункция, снижение количества подвижных сперматозоидов или повышенная вязкость спермы др.

   Процедура проводится в операционной клиники, на гинекологическом кресле специальным шприцом с катетером, с помощью которого сперма и вводится в полость матки. После указанной процедуры необходимо полежать в течение 15-20 минут. Процедура не требует обезболивания.

2. ЭКО – экстракорпоральное оплодотворение – это метод искусственного оплодотворения, при котором мужские сперматозоиды и женские яйцеклетки (предварительно извлечённые из яичников), соединяются вне организма, in vitro (в «стекле», т.е. в лабораторной пробирке).

   Там происходит самостоятельное оплодотворение, и полученные эмбрионы (1 или 2) спустя несколько дней переносят в матку женщины, где один или сразу оба имплантируются в эндометрий (слизистая оболочка полости матки) и развиваются на протяжении 9 месяцев.

   Для получения яйцеклеток на протяжении 2-3 недель проводится стимуляция овуляции гормональными препаратами. После того, как созреют сразу несколько яйцеклеток репродуктолог извлекает их из яичников (проводит пункцию фолликулов) и передаёт в эмбриологическую лабораторию.

   Искусственное оплодотворение методом ИКСИ - это одна из разновидностей ЭКО. В этом случае врач эмбриолог с помощью специальных инструментов под сильным увеличением микроскопа вводит в яйцеклетку наиболее фертильный сперматозоид.

   Полученный после такого оплодотворения эмбрион ничем не отличается от эмбрионов, зачатых естественным путём, и также, через несколько дней переносится в матку женщины и развивается на протяжении 9 месяцев. Данный метод успешно применяется у пациентов с мужским фактором бесплодия, когда имеются отклонения от нормальных показателей спермы или после биопсии TESA при азооспермии.

Донорские программы при искусственном оплодотворение

Если у кого-то из супругов отсутствуют свои здоровые половые клетки ЭКО может быть осуществлено также и с донорской спермой , донорской яйцеклеткой . Донор перед сдачей своих половых клеток проходит тщательное медико-генетическое обследование. Искусственное оплодотворение спермой донора проводится только после двукратного обследования с интервалом в 3 месяца.

У пар где женщине противопоказано вынашивание ребенка (например, при тяжёлых заболеваниях сердца) или оно физически невозможно (из-за отсутствия матки) применяется ЭКО с суррогатной матерью .

Большим преимуществом ЭКО является ещё и то, что во время культивации эмбрионов в эмбриологической лаборатории есть возможность проведения преимплантационной генетической диагностики эмбриона. Этот метод позволяет выявить (если имеются) генетические заболевания, хромосомные отклонения, аномалии развития (уродства). В отличие от многих других клиник, «ВитроКлиник» ПГД проводится на весь набор хромосом человека (т.е. на все 46 хромосом). После такого анализа в матку будут перенесены только здоровые эмбрионы.

Перед любой программой искусственного оплодотворения пара проходит тщательное медицинское обследование на предмет выявления возможных противопоказаний. Перечень такого обследования регламентирован Приказом Министерства здравоохранения и строго соблюдается в нашей клинике.

Где сделать искусственное оплодотворение?

Перед тем, как обратиться к врачу по поводу преодоления бесплодия любая супружеская пара задаётся вопросом: «Где можно сделать искусственное оплодотворение на высоком профессиональном уровне?»

Перед выбором такой клиники придерживайтесь следующих рекомендаций:

• В клинике должны работать узкие специалисты именно по лечению бесплодия: гинекологи-репродуктологи, урологи-андрологи, эмбриологи и генетики.
• Центр искусственного оплодотворения должн использовать в своей работе только качественные и оригинальные лекарственные препараты и расходные материалы для ЭКО.
• Настоящие профессионалы репродуктологи с каждой парой работают индивидуально, т.е. выбор метода, схем стимуляции и поддержка ранних сроков беременности подбирается специалистом только после тщательного изучения анамнеза супругов, прошлого опыта ЭКО (если таковы имелись), возраста, состояния здоровья на данный момент и мн.др.
• Опытные репродуктологи применяют щадящие схемы гормональных стимуляций, заботясь о здоровье своих пациентов и избегая гиперстимуляций.
• Для исключения многоплодной беременности репродуктолог должен переносить только одного или двух эмбрионов (по показаниям). Три и более – недопустимо.
• Специалисты выбранной Вами клиники должны владеть всеми самыми современными техниками в репродуктивной медицине: ИКСИ, ПИКСИ, вспомогательный хэтчинг, генетическая диагностика эмбриона и др.
• Анализы спермы должны выполняться в лаборатории самой клиники специалистами эмбриологами, которые оценивают не только морфологию сперматозоидов, но и их фертильность.
• Выбирайте клинику, которая сотрудничает с клинико-диагностической лабораторией, сертифицированной по международным стандартам ISO. Качество выполняемых анализов играет важнейшую роль при подготовке к ЭКО.
• Заранее убедитесь, что от первичной консультации и до конца всей программы ЭКО или искусственной инсеминации Вас будет вести один и тот же репродуктолог (за исключением форс-мажорных ситуаций). Это говорит об ответственности и нацеленности врача и клиники на положительный результат.
• Отдавайте предпочтение тем клиникам, где врачи оставляют пациентам свои контакты для связи. У Вас будет возможность позвонить или написать на электронную почту своему лечащему врачу, если потребуются какие-то уточнения или возникнут вопросы.
• Хорошо, если в этой же клинике, где Вы будете делать ЭКО есть возможность остаться для наблюдения беременности. Врачи, зная все нюансы Вашей беременности, и имея преемственность между собой, сделают всё, чтобы довести её до конца – рождения здорового ребёнка.
• Цена в Москве на программы искусственного оплодотворения в разных клиниках может существенно отличаться. Обязательно уточняйте у менеджера, сколько стоит искусственное оплодотворение и что конкретно входит в каждую интересующую Вас программу, можно ли добавлять туда какие-то дополнительные услуги, например, ИКСИ или хэтчинг, есть ли варианты с донорскими клетками и эмбрионами. Широкий ассортимент различных программ – большой плюс клинике. Это значит, что в этом центре искусственного оплодотворения врачи владеют всеми современными техниками ВРТ и могут позволить себе подобрать любую программу для каждой пары.

Искусственное оплодотворение является не методом лечениея бесплодия, а методом преодоления бесплодия. Таким образом, оно преодолевает препятствия для достижения беременности. В настоящее время искусственное оплодотворение используется для преодоления практически любых причин бесплодия и позволяет обойти многие проблемы с зачатием.

Оплодотворение искусственное - комплекс методов лечения бесплодия, включающий оплодотворение путем искусственного осеменения (введения в половые пути женщины спермы мужа или донора) и экстракорпоральное оплодотворение с последующей трансплантацией дробящихся эмбрионов в полость матки. В последние годы разрабатывают метод трансплантации женских и мужских половых клеток в просвет маточной трубы.

Искусственное осеменение (инсеминация) . В зависимости от методики введения спермы различают влагалищный, внутришеечный и внутриматочный методы искусственного осеменения. Влагалищный метод (введение спермы в заднюю часть свода влагалища) используют редко; он наиболее прост, но наименее эффективен, поскольку влагалищное содержимое может неблагоприятно действовать на сперматозоиды. Внутришеечный метод (введение спермы в канал шейки матки) также недостаточно эффективен в связи с возможностью образования антиспермальных антител в шеечной слизи. Наиболее эффективен внутриматочный метод - введение спермы в полость матки. Однако при титре антиспермальных антител в шеечной слизи более 1:32 они обнаруживаются и в полости матки; в подобных случаях перед введением спермы необходима неспецифическая десенсибилизирующая терапия.

Искусственное осеменение спермой мужа проводят по следующим показаниям: со стороны мужа - мочеиспускательного канала, отсутствие эякуляции, олигоспермия при нормальном строении и подвижности сперматозоидов; со стороны женщины - анатомические изменения шейки матки, не поддающийся лечению , наличие антиспермальных антител в шеечной слизи. Противопоказания у женщин: острые и хронические воспалительные заболевания половых органов, истинные эрозии и псевдоэрозии шейки матки.

Перед осеменением необходимо исследовать сперму мужа, исключить трубно-перитонеальные и маточные причины бесплодия . С целью установления времени овуляции и наличия желтого тела проводят тесты функциональной диагностики (см. Гинекологическое обследование ), определяют содержание лютеинизирующего гормона и прогестерона в крови. С помощью ультразвука выясняют диаметр доминантного фолликула (см. Яичники ).

Процедуру проводят с соблюдением правил асептики в положении женщины на гинекологическом кресле. Сперму мужа, полученную при мастурбации после воздержания от половых сношений не менее чем в течение 3 дней, набирают в пластмассовый шприц емкостью 1 мл . К шприцу присоединяют полиэтиленовый катетер (можно использовать подключичный катетер), который без фиксации шейки матки вводят в канал шейки или в полость матки за внутренний зев. Сперму в количестве 0,4 мл вводят в канал шейки или в полость матки. Для удержания спермы на шейку матки надевают колпачок, применяемый обычно с целью контрацепции ; женщина остается в положении лежа в течение 30 мин .

При неполноценной лютеиновой фазе менструального цикла после искусственного осеменения рекомендуется введение препаратов, стимулирующих развитие желтого тела (хорионический гонадотропин по 750 ME внутримышечно на 11, 13, 15, 17, 19 и 21-й дни цикла). При удлиненной фолликулярной фазе менструального цикла проводят стимуляцию созревания фолликула и овуляции (желательно под ультразвуковым контролем диаметра доминантного фолликула). Для этого назначают кломифенцитрат (клостильбегит) по 50-100 мг внутрь с 5-го по 9-й день менструального цикла и вводят 3000-4500 ME хорионического гонадотропина внутримышечно на 12-й день менструального цикла. Обязательным условием наблюдения после искусственного оплодотворения является измерение базальной (ректальной) температуры или определение содержания b -субъединицы хорионического гонадотропина в крови с целью ранней диагностики беременности.

Искусственное осеменение спермой донора осуществляют при азооспермии у мужа (абсолютное показание), а также при олиго- и астеноспермии у мужа в сочетании с морфологическими изменениями сперматозоидов, иммунологическом конфликте по резус-фактору, не поддающемся лечению, наследственных генетически обусловленных заболеваниях в семье мужа (относительные показания). Противопоказания те же, что и к осеменению спермой мужа.

Искусственное осеменение спермой донора проводят после получения согласия обоих супругов. Донор должен быть моложе 36 лет, физически и психически здоров, не иметь наследственных заболеваний и нарушений развития, у родственников первой степени родства не должно быть более одного случая смерти плода и спонтанного аборта. Обязательно проведение реакции Вассермана и исследование на ВИЧ-инфекцию. При подборе донора учитывают резус- и групповую принадлежность крови, фенотип, в т.ч. телосложение, рост, цвет волос и глаз. Донор обязуется никогда не разыскивать своих биологических потомков с целью предъявления к ним каких-либо требований.

Перед осеменением необходимо проведение теста для выявления локальных антиспермальных антител к сперме донора и пробы на способность сперматозоидов проникать в шеечную слизь. Примерно у 1 / 3 женщин, которым ранее проводилось осеменение спермой донора, образуются локальные антиспермальные антитела; обнаружение их является показанием для внутриматочного введения спермы.

Для осеменения спермой донора может быть использована нативная или консервированная сперма. Наиболее распространенным методом консервации спермы является криоконсервация в жидком азоте, позволяющая создавать банк спермы и длительно хранить ее. По методике, рекомендуемой В.И. Грищенко и соавторами (1986), сперму замораживают в подключичном катетере, содержащем многокомпонентный консервант. Это уменьшает температурный градиент и создает благоприятные условия для сохранения и выживаемости сперматозоидов. Инсеминацию проводят с помощью того же катетера, что значительно упрощает процедуру. Техника введения спермы в половые пути женщины, методика стимуляции овуляции и желтого тела те же, что и при осеменении спермой мужа. В течение трех последовательных менструальных циклов следует применять сперму одного донора.

Частота наступления беременности после осеменения спермой мужа или донора примерно одинакова и достигает, по данным разных авторов, 30-70%. Женщины, забеременевшие после искусственного осеменения, должны находиться под наблюдением акушера-гинеколога женской консультации, так же как беременные с отягощенным акушерским анамнезом. Течение беременности и родов не отличается от таковых при нормальном зачатии, аномалии развития плода возникают не чаще, чем в популяции.

Экстракорпоральное оплодотворение с последующей трансплантацией эмбрионов и полость матки - один из современных методов лечения женского бесплодия. В мире насчитывается свыше 5 тыс. детей, родившихся после оплодотворения женщины с помощью этого метода.

В его применении достигнуты определенные успехи, но в связи с необходимостью использования дорогостоящей аппаратуры и оборудования, применения лекарственных препаратов в основном импортного производства в СССР он налажен только а крупных научно-исследовательских и клинических учреждениях.

Показания: абсолютное трубное (состояние после двусторонней тубэктомии); непроходимость или затруднение проходимости обеих маточных труб при отсутствии эффекта от ранее проведенного оперативного или длительного (более 5 лет) консервативного лечения, бесплодие, генез которого после проведенною полного клинического обследования (включая гормональное, эндоскопическое, иммунологическое) остается неясным; субфертильность спермы мужа (в случае неэффективности гомологического осеменения).

Условия проведения: сохраненная в полном объеме функциональная способность матки к имплантации эмбриона и вынашиванию беременности; отсутствие противопоказаний для беременности и родов (в связи с соматическими, психическими, генетическими заболеваниями женщины); сохраненная способность к адекватному ответу на экзогенную или эндогенную стимуляцию овуляции, отсутствие новообразований, воспалительных и анатомических изменений в органах малого таза.

Противопоказания: отсутствие перечисленных условий,

а также возраст женщины старше 40 лет.

Метод состоит из 5 этапов: 1) стимуляция суперовуляции (множественная овуляция); 2) аспирация яйцеклеток, 3) оплодотворение яйцеклеток; 4) культивирование оплодотворенных яйцеклеток, 5) перенос дробящихся эмбрионов в матку.

Успех метода в значительной мере зависит от числа яйцеклеток, полученных при пункции преовуляторных фолликулов, и от числа перенесенных в матку эмбрионов. В связи с этим необходима стимуляция суперовуляции путем комбинированного назначения антиэстрогенов (кломифенцитрата) и гонадотропинов (пергонала, хорионического гонадотропина). Б.В. Леоновым с сотрудниками разработаны следующие схемы стимуляции суперовуляции: первая схема - кломифенцитрат внутрь по 50-150 мг в день со 2-го или 3-го дня менструального цикла в течение 5 дней и пергонал по 75-150 ЕД внутримышечно на 3-й, 5-й, 7-й дни цикла и далее ежедневно до достижения доминантным фолликулом диаметром 16-18 мм ; вторая схема - пергонал по 75-150 ЕД внутримышечно со 2-го дня менструального цикла ежедневно до достижения доминантным фолликулом диаметром 16-18 мм . Через 24-48 ч после достижения фолликулом указанных размеров внутримышечно вводят 5000 - 10000 ЕД хорионического гонадотропина. По данным авторов, применение этих схем стимуляции суперовуляции приводит к образованию до 20 фолликулов, из которых может быть получено до 60 яйцеклеток.

Во время стимуляции суперовуляции женщина находится под постоянным динамическим контролем: ежедневное ультразвуковое исследование с измерением диаметра фолликулов, определение эстрадиола и лютеинизирующего гормона в крови.

Пункцию преовуляторных фолликулов проводят через 34-36 ч после введения хорионического гонадотропина. Ранее ее осуществляли трансабдоминально, а в последние годы выполняют через влагалище под контролем влагалищных ультразвуковых датчиков, что по сравнению с первым методом значительно облегчает визуализацию фолликулов и снижает частоту осложнений (ранение органов малого таза и крупных сосудов). Кроме того, трансвагинальное пунктирование фолликулов позволяет аспирировать яйцеклетки даже при выраженных спаечных процессах в брюшной полости. Внедрение этого метода дало возможность выполнять экстракорпоральное оплодотворение амбулаторно.

Яйцеклетки помещают в специальный термостат, в который переносят и сперматозоиды, полученные после промывания спермы мужа и отделения при центрифугировании семенной плазмы. На одну яйцеклетку добавляют 200-300 тыс. сперматозоидов. Процесс культивирования дробящихся яйцеклеток осуществляется в специальной среде при температуре 37°, абсолютной влажности, 5% содержании двуокиси углерода, обеспечивающем оптимальный уровень рН. На стадии 4 и более бластомеров дробящиеся эмбрионы помещают в специальный пластиковый катетер и через канал шейки матки вводят в полость матки (в область ее дна) в минимальном объеме (0,

05 мл ) питательной среды.

После трансплантации эмбрионов проводят динамическое определение b -субъединицы хорионического гонадотропина в крови, что помогает установить наступление беременности с 7-9-го дня после трансплантации. При наступлении беременности женщины постоянно наблюдаются акушером-гинекологом женской консультации, так же, как беременные с отягощенным акушерским анамнезом.

Эффективность метода повышается с совершенствованием аппаратуры и лекарственных препаратов для стимуляции овуляции. Неудачи метода могут быть обусловлены многими причинами, среди которых основными являются безуспешный перенос эмбриона в матку, нарушение функции желтого тела, образовавшегося на месте гиперстимулированного фолликула, изменения в эндометрии в результате применения антиэстрогенов, отсутствие синхронности между степенью зрелости эмбриона и эндометрия.

Частота внематочной беременности при этом методе составляет, по данным разных авторов, 2-10%, частота невынашивания беременности достигает 40%. Относительно чаще, чем в популяции, наблюдается гибель плодов в родах. Эти осложнения не являются следствием указанного метода, а связаны, несомненно, с возрастом женщин и наличием патологических изменений в их репродуктивной системе. Родившиеся дети развиваются обычно. Имеющиеся наблюдения о более быстром интеллектуальном и физическом развитии этих детей, очевидно, связано с особыми условиями их жизни и воспитания.

Трансплантация женских и мужских половых клеток в просвет маточной трубы осуществляется с помощью тефлонового катетера и пластикового зонда в качестве проводника, которые вводят через полость матки в просвет ампулы маточной трубы под контролем эхографии с применением влагалищного датчика. Через катетер шприцем вводят яйцеклетки (не менее трех) и 200-600 тыс. сперматозоидов в 50 мл питательной среды. При этом оплодотворение происходит в маточной трубе, что значительно физиологичнее, чем в пробирке. Метод признается достаточно перспективным для лечения бесплодия неясного генеза, бесплодия при некоторых формах а, а также бесплодия, обусловленного нарушением сперматогенеза у мужчин. Обязательным условием его применения является проходимость маточных труб.

Непосредственно ЭКО проводится врачами-эмбриологами в условиях эмбриологической лаборатории. Собственно оплодотворение проводят одним из двух способов:

1) инсеминация in vitro;

2) интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ICSI, ИКСИ).

При первом, более простом способе к яйцеклеткам, которые находятся в питательной среде, добавляют суспензиюсперматозоидов. Сперматозоиды добавляют из расчета 100--200 тыс. на одну яйцеклетку. В течение 2--3 часов один из сперматозоидов проникает в яйцеклетку и тем самым оплодотворяет её. При втором способе (ИКСИ) сперматозоид вводят в яйцеклетку «вручную» с помощью микрохирургических инструментов. ИКСИ используют при очень плохом качестве спермы, когда оплодотворение не может быть получено даже в чашке.

После проникновения сперматозоида яйцеклетка считается эмбрионом. Вероятность успешного оплодотворения 60--70%. Эмбрионы содержат в искусственных условиях от 2 до 6 дней. Для этого используют так называемые СО 2 -инкубаторы -- шкафы, в которых поддерживается температура 37°C и содержание СО 2 в атмосфере 5--6%. Эмбрионы (а до этого яйцеклетки) в инкубаторах непосредственно содержат в пластиковых чашках (чашки Петри, чашки Нунка, планшеты и пр.) с культуральной средой. В культуральную среду для эмбрионов входят основные физиологические ионы (Na + , K + , Ca 2+ , Mg 2+ , C l- , CO 3- и т. д.), энергетические субстраты (глюкоза, пируват, лактат), аминокислоты, часто витамины и белки сыворотки крови. За время инкубации эмбрион человека практически не увеличивается в размере (первые 4 дня его размер 0,1 мм, на 5 день 0,15--0,2 мм), но количество клеток, его составляющих, возрастает многократно (1 день -- 1 клетка; 2 день -- 4 клетки; 3 день -- 8 клеток; 4 день -- от 10 до 20 клеток, 5 день -- от 40 до 200 клеток). Перенос эмбриона в матку осуществляют через 2--5 дней после оплодотворения яйцеклетки. Процедура не требует анестезии (обезболивания) и выполняется на гинекологическом кресле в течение нескольких минут. Эмбрион переносят в матку, проводя через шейку матки специальный эластичный катетер. Согласно приказу № 67 Минздрава РФ в полость матки не рекомендуется переносить более 4 эмбрионов, чтобы избежать многоплодной беременности. Современная практика ЭКО в России такова, что обычно осуществляют перенос 2 эмбрионов. При невозможности вынашивания плода пациентка может прибегнуть к использованию суррогатной матери.

Заключение

На сегодняшний день в клиниках замораживают (криоконсервируют) половые клетки человека (сперматозоиды, ооциты), и эмбрионы на различных стадиях развития, полученных в результате программ ЭКО. Замораживают оставшиеся после переноса в «свежем» (то есть, стимулированном) цикле эмбрионы только хорошего качества, т.к. впоследствии они благополучно перенесут разморозку.

Замораживание спермы применяют в случаях: раковых заболеваний у мужчин с целью обеспечения запасов спермы до начала химиотерапии и последующего использования замороженного образца для получения здорового потомства, неуверенности наличия партнера во время сбора спермы для ЭКО -- ситуация, характерная для иногородних пациентов, донорства, в случаях планированного отложенного отцовства. Возможно, в связи с заметным снижением мужской фертильности, запасание впрок спермы молодых мужчин будет популяризироваться.

Замораживание яйцеклеток применяют в случаях, когда стимуляция не рекомендуется или противопоказана (например, онкологические и др. заболевания) или же невозможно провести оплодотворение клеток в данный период. Зрелый ооцит (женская клетка) крайне хрупкий из-за большого размера, жидкого содержимого и расположения хромосом и во время процедур замораживания/размораживания легко повреждается. Частота родов после оплодотворения и инсеминации замороженных-размороженных ооцитов составляет 3-4%. С помощью криоконсервации решается проблема зачатия и бесплодия. Кроме лечения многих форм мужского и женского бесплодия, ВРТ используются и для решения проблем фундаментальной биологии и медицины. Используя не затребованные для имплантации эмбрионы, изучают механизмы оплодотворения и развития эмбриона, генетическую регуляцию эмбриогенеза, возможности преимплантационной диагностики наследственных заболеваний и другие проблемы. Сперму пациент получает самостоятельно с помощью мастурбации. Возможно использование прерванного коитуса, либо медицинского презерватива без смазки. В случае невозможности получения спермы путем эякуляции, используют хирургические методы: аспирация содержимого эпидидимиса, биопсия яичка и прочее. Сперму получают в день пункции фолликулов супруги. Если получение спермы в день пункции невозможно, то используют предварительное получение спермы с последующим замораживанием и хранением в жидком азоте. Перед оплодотворением яйцеклетки сперматозоиды отмывают от семенной жидкости и с помощью специальных методов выделяют наиболее качественные из них.

При невозможности использования спермы мужа или при отсутствии у пациентки полового партнёра, возможно использование спермы донора. Использование спермы донора производится при обязательном письменном согласии супруга и регламентируется приказом N107Н Минздрава РФ. Согласно этому приказу сперма донора используется после 6-тимесячного карантина, т.е. через 6 месяцев хранения в замороженном состоянии и повторного обследования донора, подтверждающего отсутствие инфекционных заболеваний.

Искусственное оплодотворение — это реальный шанс бесплодных пар обрести родительское счастье или противоестественная процедура, шансы успешности которой ничтожно малы?

Материнство — самое большое счастье и радость для женщины, ее призвание и наиболее естественное состояние. Когда же по каким-то объективным причинам женщина не может стать мамой, то на помощь приходит искусственное оплодотворение. Что же это такое, какие существуют методы искусственного оплодотворения, в чем особенности процедуры, а также другие волнующие женщин вопросы рассмотрим в этой статье.

Значение искусственного оплодотворения

Искусственное оплодотворение — это современный метод решения проблемы бесплодия, когда зачатие ребенка не может происходить естественным путем. Процедура искусственного оплодотворения может производиться по ряду причин, при которых бесплодием болен как один из партнеров, так и оба.

Основными показаниями к проведению искусственного оплодотворения являются:

• поликистоз яичников
• эндометриоз
• низкое качество спермы партнера, которое может проявляться в малоподвижности сперматозоидов, их низкой концентрации и в большом количестве патологических единиц
• гормональное бесплодие
• трубное бесплодие
• бесплодие, причины которого не установлены

Благодаря прогрессу в медицине сотни тысяч бесплодных супружеских пар наконец-то могут познать радость материнства и отцовства, ведь искусственное оплодотворение дарит возможность иметь детей при формах бесплодия, которые в прошлом ставили крест на репродуктивной функции.

Видео: Зачатие in vitro

Методы искусственного оплодотворения

Когда речь заходит об искусственном оплодотворении, то многие думают о распространенной и популярной процедуре ЭКО. На самом же деле существует несколько методов искусственного решения проблемы бесплодия:

• ИСМ — метод, при котором внутрь матки женщины переносят сперматозоиды ее супруга. Данная методика применяется в случаях, когда репродуктивные функции женщины не нарушены и она не может стать матерью по причине низкого качества спермы мужа или когда слизь во влагалище женщины является агрессивной средой для существования сперматозоидов и они погибают так и не добравшись до яйцеклетки

• ИСД — если сперма мужа непригодна к зачатию или он полностью бесплоден, то супругам предлагается метод искусственного оплодотворения спермой донора. Сама процедура данного метода практически не отличается от предыдущего: женщине так же вводят сперматозоиды в матку, но только донором спермы не является ее супруг

• ГИФТ — когда причина бесплодия кроется в том, что яйцеклетка женщины не выходит в маточную трубу для оплодотворения, то эффективен метод интратубарного переноса гамет. Заключается он в переносе в маточную трубу предварительно взятой у женщины яйцеклетки, соединенной искусственным путем с мужскими сперматозоидами. Мужские половые клетки могут принадлежать как супругу, так и донору

• ЗИФТ — метод, при котором в подготовленную гормонами матку вводят оплодотворенную яйцеклетку. Предварительно у женщины методом прокола яичника берут здоровую, пригодную для зачатия яйцеклетку и оплодотворяют ее вне женского организма сперматозоидами. После этого эмбрион вводится через шейку матки

• ИКСИ — эффективный метод искусственного оплодотворения, который предполагает оплодотворение яйцеклетки сперматозоидом с помощью тончайшей иглы. Через прокол яичек изымается наиболее активный сперматозоид и внедряется в яйцеклетку

• ЭКО — наиболее распространенный вид искусственного оплодотворения яйцеклетки вне организма женщины, после которого эмбрион имплантируется в матку

ЭКО метод оплодотворения

Экстракорпоральное оплодотворение — современная репродуктивная технология, к которой наиболее часто прибегают не только в нашей стране, но и во всем мире. Чем объясняется такая популярность метода? Во-первых, такая методика дает наиболее высокие результаты; во-вторых, с помощью ЭКО можно добиться беременности даже в очень сложных случаях бесплодия, когда оба партнера имеют серьезные проблемы репродуктивной функции.

Процедура искусственного оплодотворения

Для ЭКО необходимо наличие нескольких яйцеклеток. Но так как в организме женщины за один цикл может сформироваться только одна яйцеклетка, то количество выработки яйцеклеток стимулируется гормонами.

Когда с помощью УЗИ определяется, что яичник увеличен и в нем сформировались яйцеклетки, то их извлекают. После этого ооциты отмывают от фолликулярной жидкости и помещают в инкубатор, где яйцеклетки находятся до момента искусственного оплодотворения.

Если же получить яйцеклетки у женщины не удается, то используются донорские.

В этот же день осуществляется забор сперматозоидов, которые получают методом мастурбации или прерванного полового акта. В полученной сперме выделяют сперматозоиды и отбирают наиболее активные из них. После этого в пробирку с яйцеклетками добавляют необходимое количество активных сперматозоидов, в расчете 100-200 тыс. на яйцеклетку. Возможно также применение спермы донора.

В течении 2-3 часов сперматозоид оплодотворяет яйцеклетку. Далее, полученный эмбрион помещают в благоприятную среду, где он находится от 2 до 6 дней. Все это время в пробирку вводятся необходимые витамины, физиологические ионы, субстраты и аминокислоты. После этого производится непосредственный перенос эмбрионов в матку, который осуществляется за считанные минуты на гинекологическом кресле.

Если же женщина не может сама выносить беременность, то прибегают к суррогатному материнству.

Видео: Экстракорпоральное оплодотворение. Комаровский

Экстракорпоральное оплодотворение за и против

Несмотря на то что ЭКО открывает для страдающих бесплодием людей возможность иметь детей эта процедура может иметь также негативные последствия, которые иногда переходят в разряд плачевных:

• нарушение гормонального фона
• гиперстимуляция яичников
• пороки развития плода
• многоплодная беременность, при которой необходимо умерщвлять «лишние» зародыши для выживания хотя бы одного-двух

Кроме этого, процедура ЭКО дорогостоящее мероприятие, которое позволить себе могут далеко не все и, порой, бездетным парам приходится отказаться от любых надежд стать родителями, так как сумма для них просто неподъемная.

С другой стороны, в обществе существует предвзятое отношение к процедуре искусственного оплодотворения — «детей с пробирки» ошибочно принимают за неполноценных и отстающих в развитии.

Сегодня процедура ЭКО во многом совершенствуется. Применяются новые технологии, устанавливается точная дозировка гормонов, которая обеспечивает необходимые процессы и в то же время доставляет наименьший вред организму женщины.

Важно также, что крайне редко в полость матки помещается большое количество эмбрионов, как правило, только два, что предотвращает необходимость устранения лишнего зародыша. Да и сама радость материнства превышает все возможные риски и нежелательные последствия, которые может вызвать процедура ЭКО.

Сколько стоит искусственное оплодотворение?

Цена вопроса зависит от метода искусственного оплодотворения. Она может варьироваться в различных клиниках, но в среднем прейскурант выглядит так:

• ИГО от 28 до 40 тыс. руб
• ЭКО от 40 до 100 тыс. руб
• ИКСИ от 100 до 150 тыс. руб

Другие же методы искусственного оплодотворения в России не распространены из-за более низкой эффективности.

Искусственное оплодотворение одиноких женщин

Женщинам, не имеющим партнера для зачатия ребенка, но отчаянно желающим завести дитя, поможет процедура искусственной инсеминации. В ходе этой процедуры в матку женщины помещаются активные сперматозоиды донора, после чего происходит оплодотворение яйцеклетки.

Непосредственно перед процедурой женщина проходит обследования и сдает анализы, при необходимости осуществляется гормональная стимуляция.

Искусственное оплодотворение в домашних условиях

Процедура искусственной инсеминации может проводиться и в домашних условиях. Ее суть заключается в том, что в матку женщины с помощью шприца и катетера вводится доза спермы, полученная при семяизвержении. Благодаря такой манипуляции в разы увеличивается шанс оплодотворения, ведь все сперматозоиды отправляются к яйцеклетке, тогда как при естественном оплодотворении часть семени выливается и нейтрализуется слизью влагалища, даже не попадая в матку.

Для осуществления искусственной инсеминации дома необходимы стерильные:

• шприц
• катетер
• гинекологическое зеркало
• пипетка
• дезинфицирующее средство
• тампоны
• полотенце
• гинекологические перчатки

Важно проводить процедуру во время овуляции, которую можно определить с помощью специального теста.

Проблема искусственного оплодотворения

Детальный инструктаж о том, как осуществляется искусственное оплодотворение дома можно узнать у гинеколога, но важно понимать, что осуществление такого важного процесса в домашних условиях может нести риск занесения в полость матки различных инфекций, в силу возможной нестерильности используемых приборов.

Искусственное оплодотворение: отзывы

Проанализировав отзывы женщин, решившихся на искусственное оплодотворение можно выделить несколько ключевых аспектов процедуры:

• беременность наступает не всегда. Существуют пары, решившиеся на ЭКО пять-шесть раз подряд, но так и не достигшие желаемого
• многих бесплодных женщин волнует моральный аспект, ведь проблема искусственного оплодотворения до сих пор вызывает дискуссии в различных кругах, в особенности со стороны церкви, которая считает подобные мероприятия противоестественными, а семьи, не имеющие детей, осуждает, так как они должны нести свой крест и не идти против воли Божьей

• искусственное оплодотворение — колоссальная нагрузка на организм женщины как в моральном, так и физическом смысле
• несмотря на проблемы, с которыми сталкиваются супружеские пары все же решившиеся на искусственное оплодотворение, положительный результат и радость иметь ребенка превышает все риски и отрицательные моменты и многих останавливает только цена процедуры от того, чтобы завести ребенка искусственным путем повторно

Видео: Виды искусственного оплодотворения

6. Оборудование пункта искусственного осеменения коров

7. Организация работы пункта искусственного осеменения. Выявление коров в охоте

8. Преимущества искусственного осеменения животных

9. Выращивание самцов-производителей для использования в искусственном осеменении. Особенности кормления и содержания

10. Искусственная вагина. Особенности устройства вагин для самцов разных видов

11. Устройство и подготовка к использованию искусственной вагины

12. Особенности взятия спермы у самцов разных видов

13. Взятие спермы у быка

14. Взятие спермы у жеребца, хряка

16. Добавочные половые железы, их значение

17. Сперма, ее химический состав, свойства

18. Сперма. Строение сперматозоида

19. Сперма. Свойства сперматозоидов

20. Спермоагглютинация, ее причины и профилактика

21. Дыхание и гликолиз сперматозоидов

24. Разбавление спермы. Разбавители. Преимущества разбавления спермы

25. Виды разбавителей спермы, их химический состав и свойства

26. Криоконсервация спермы. Краткая история и значение метода

27. Криоконсервация спермы. Методика криоконсервации

28. Влияние паратипических факторов на воспроизводительную функцию самок

29. Влияние генетических факторов на воспроизводительную функцию самок

30. Стимуляция половой функции самок

31. Синхронизация половой функции самок

32. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro)

34. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro). Капацитация сперматозоидов

36. Маноцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки

37. Визоцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки

39. Сперматогенез

40. Искусственное осеменение овец и коз

41. Искусственное осеменение свиней

42. Биотехнология нативной спермы. Оценка сперматозоидов по морфологическим признакам

43. Методика замораживания спермы и хранения ее в жидком азоте

44. Искусственное осеменение птиц

45. Оборудование лаборатории для искусственного осеменения пчел. Взятие спермы у трутня. Осеменение матки

47. Овогенез.

48. Ректоцервикальный метод осеменения коров. Достоинства и недостатки

49. Искусственное осеменение самок северных оленей (важенок)

50. Оттаивание и оценка качества размороженной спермы

51. Естественное осеменение у пчел

52. Искусственное осеменение пчелиных маток

53. Визуальная и микроскопическая оценка спермы. Методика исследований

54. Воздействие на сперматозоиды высокой и низкой температур, йода.Методика исследований

55. Виды патологических форм сперматозоидов. Соотношение нормальных и патологических форм

56. Искусственное осеменение кобыл

57. Оценка концентрации и активности (подвижности) сперматозоидов

58. Воздействие на сперматозоиды осмотического давления (гипотонический и гипертонический растворы). Методика исследований

59. Организация искусственного осеменения

32. Оплодотворение яйцеклеток вне организма животного (in vitro)

Положительное значение - несмотря на низкий выход ооцитов, при каждом извлечении возможность многократного использования животного.

33. Особенности оплодотворения яйцеклеток in vitro у самок разных видов с.-х. животных

Разработка системы оплодотворения и обеспечения ранних стадий развития эмбрионов млекопитающих вне организма животного (in vitro) имеет огромное значение в решении ряда научных задач и практических вопросов, направленных на повышение эффективности разведения животных.

Для этих целей необходимы эмбрионы на ранних стадиях развития, которые можно извлечь только хирургическими методами из яйцеводов, что является трудоемким и не дает достаточного числа зародышей для проведения этой работы.

Оплодотворение яйцеклеток млекопитающих in vitro включает следующие основные этапы: созревание ооцитов, капацитацию сперматозоидов, оплодотворение и обеспечение ранних стадий развития.

Созревание ооцитов in vitro. Большое число половых клеток в яичниках млекопитающих, в частности у крупного рогатого скота, овец и свиней с высоким генетическим потенциалом, представляет источник огромного потенциала воспроизводительной способности этих животных в ускорении генетического прогресса по сравнению с использованием возможностей нормальной овуляции. У этих видов животных, как и других млекопитающих, число ооцитов, овулирующих спонтанно во время охоты, составляет только незначительную часть от тысяч ооцитов, находящихся в яичнике при рождении животного. Остальные ооциты регенерируют внутри яичника или, как говорят обычно, подвергаются атрезии. Естественно возникал вопрос, нельзя ли выделить ооциты из яичников путем соответствующей обработки и провести их дальнейшее оплодотворение вне организма животного. В настоящее время не разработаны методы использования всего запаса ооцитов в яичниках животных, но значительное число ооцитов может быть получено из полостных фолликулов для дальнейшего их созревания и оплодотворения вне организма.

В настоящее время применение на практике нашло созревание in vitro только ооцитов крупного рогатого скота. Ооциты получают из яичников коров после убоя животных и путем прижизненного извлечения, 1-2 раза в неделю. В первом случае яичники берут от животных после убоя, доставляют в лабораторию в термостатированном контейнере в течение 1,5-2,0 ч. В лаборатории яичники дважды промывают свежим фосфатным буфером. Ооциты извлекают из фолликулов, диаметр которых 2-6 мм, путем отсасывания или разрезания яичника на пластинки. Ооциты собирают в среду ТСМ 199 с добавлением 10 % сыворотки крови от коровы в охоте, затем дважды промывают и отбирают для дальнейшего созревания in vitro только ооциты с компактным кумулюсом и однородной цитоплазмой.

В последнее время разработан способ прижизненного извлечения ооцитов из яичников коров с помощью ультразвукового прибора или лапароскопа. При этом ооциты отсасывают из фолликулов, диаметр которых не менее 2 мм, 1-2 раза в неделю от одного и того же животного. В среднем получают однократно 5-6 ооцитов на животное. Менее 50 % ооцитов пригодны для созревания in vitro.

Положительное значение - несмотря на низкий выход ооцитов, при каждом извлечении возможность многократного использования животного. Капацитация сперматозоидов. Важным этапом в разработке метода оплодотворения у млекопитающих было открытие явления капацитации спермиев. В 1951 г. М.К. Чанг и одновременно с ним Г.Р. Аустин установили, что оплодотворение у млекопитающих наступает только в том случае, если спермин в течение нескольких часов до овуляции находятся в яйцеводе животного. Основываясь на наблюдениях по изучению проникновения спермиев яйцеклетки крысы в различные сроки после спаривания Аустин ввел термин капацитации. Он означает, что в спермин должны произойти некоторые физиологические изменения до того, как сперматозоид приобретет способность к оплодотворению.

Разработано несколько методов капацитации эякулированных спермиев домашних животных. Для удаления белков с поверхности спермиев, которые, по-видимому, тормозят капацитацию спермиев, была использована среда с высокой ионной силой.

Однако наибольшее признание получил способ капацитации сперматозоидов с использованием гепарина (Дж. Парриш и др., 1985). Пайеты с замороженным семенем быка оттаивают в водяной бане при 39°С в течение 30-40 с. Примерно 250 мкл оттаянного семени подслаивают под 1 мл среды для капацитации. Среда для капацитации состоит из модифицированной среды Тиройда, без ионов кальция. После инкубации в течение одного часа верхний слой среды объемом 0,5-0,8 мл, содержащий большинство подвижных сперматозоидов, удаляют из пробирки и промывают дважды центрифугированием при 500 g в течение 7-10 мин. После 15 мин инкубации с гепарином (200 мкг/мл) суспензию разбавляют до концентрации 50 миллионов сперматозоидов в мл.

Оплодотворение in vitro и обеспечение ранних стадий развития эмбрионов. Оплодотворение яйцеклеток у млекопитающих осуществляется в яйцеводах. Это затрудняет доступ исследователя к изучению условий среды, в которой происходит процесс оплодотворения. Поэтому система оплодотворения in vitro была бы ценным аналитическим инструментом для изучения биохимических и физиологических факторов, включающихся в процесс успешного соединения гамет.

Применяют следующую схему оплодотворения in vitro и культивирования ранних эмбрионов крупного рогатого скота. Оплодотворение in vitro проводят в капле модифицированной среды Тироида. После созревания in vitro ооциты частично очищают от окружающих экспандированных кумулюсных клеток и переносят в микрокапле по пять ооцитов в каждой. Суспензия сперматозоидов объемом 2-5 мкл добавляется к среде с ооцитами, чтобы достичь концентрации сперматозоидов в каплях 1-1,5 млн/мл. Через 44-48 ч после осеменения определяют наличие дробления ооцитов. Затем эмбрионы помещают на монослой эпителиальных клеток для дальнейшего развития в течение 5 дней.