Metodi per lo studio delle malattie del sistema endocrino. VI. Metodi strumentali per lo studio del sistema endocrino
Puntura (biopsia con puntura) della ghiandola tiroidea- puntura della tiroide sotto controllo ecografico.
Questo metodo è prescritto solo se nessun altro metodo fornisce informazioni sufficienti per prescrivere il trattamento.
Indicazioni:
- diagnosi delle malattie della tiroide;
- la presenza di cisti o noduli più grandi di 1 cm;
- la probabilità di un processo maligno.
La procedura viene eseguita sotto controllo ecografico e consente di prescrivere con precisione il tipo di trattamento.
Per la puntura viene utilizzato un ago molto sottile. Sotto controllo ecografico, l'ago raggiunge esattamente il punto giusto, riducendo la probabilità di lesioni. La procedura è sicura e non ha controindicazioni.
Dopo la puntura, il paziente può avvertire un leggero dolore nel sito della manipolazione, che scompare rapidamente.
Ecografia del pancreas.
L'ecografia del pancreas è consigliata in caso di sospetta pancreatite acuta e cronica (infiammazione del pancreas), nonché in caso di ittero (sospetto di tumore o cancro del pancreas) e della comparsa di sintomi di altre malattie pancreatiche (ad esempio, tipo 1 diabete).
La preparazione per un'ecografia del pancreas è la stessa dell'ecografia di tutti gli organi addominali.
Ecografia della tiroide.
L'ecografia della tiroide è uno dei metodi per studiare la ghiandola tiroidea, che consente di valutarne le dimensioni e identificare la presenza di alcuni cambiamenti strutturali osservati nelle malattie della tiroide (gozzo, tumori della tiroide, adenoma tiroideo, ecc.) . Utilizzando un'ecografia della ghiandola tiroidea, è possibile rilevare i suoi cambiamenti più piccoli, raggiungendo 1-2 mm di diametro.
L'ecografia della tiroide non richiede una preparazione speciale. Questo è un metodo di ricerca assolutamente sicuro e indolore.
Ultrasuoni delle ghiandole surrenali.
Ultrasuoni delle ghiandole surrenali - esame ecografico delle strutture delle ghiandole surrenali situate sopra i poli superiori dei reni.
Indicazioni per l'ecografia delle ghiandole surrenali:
- Sospetto di un tumore surrenale.
- Manifestazioni cliniche di iper o ipofunzione delle ghiandole surrenali.
- Chiarimento delle cause dell'ipertensione.
- Episodi di debolezza muscolare senza causa.
- Chiarimento delle cause dell'obesità.
- Chiarimento delle cause dell'infertilità.
Non è necessaria la preparazione per un'ecografia delle ghiandole surrenali, tuttavia, alcuni specialisti in diagnostica ecografica prescrivono una dieta a basso contenuto di scorie di 3 giorni, una cena leggera entro e non oltre 19 ore il giorno prima dell'esame e un'ecografia delle ghiandole surrenali ghiandole a stomaco vuoto.
Radiografia delle ossa del cranio ( studio di forma, dimensione e contorni sella turcica- letto osseo della ghiandola pituitaria) - viene effettuato per diagnosticare un tumore pituitario.
Scansione radioisotopica (scintigrafia) della ghiandola tiroidea con iodio radioattivo, in base al grado di assorbimento di cui si fa una conclusione sulla funzione della ghiandola tiroidea e si determina la capacità di legare lo iodio delle proteine del siero del sangue
TOMOGRAFIA COMPUTERIZZATA (CT)- nella diagnosi della patologia della tiroide, del pancreas e delle ghiandole surrenali viene utilizzato un metodo di esame a raggi X, basato sull'assorbimento ineguale delle radiazioni dei raggi X da parte di vari tessuti del corpo.
TOMOGRAFIA A RISONANZA MAGNETICA (MRI)- un metodo diagnostico strumentale, con l'aiuto del quale in endocrinologia viene valutata la condizione del sistema ipotalamo-ipofisi-surrene, dello scheletro, degli organi addominali e pelvici.
Elenco della letteratura
Tutorial:
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10. V.V. Murashko, A.V. Srutynskij. Elettrocardiografia. Medicina, 1987.
Il paziente deve essere spogliato.
IO. Esame del viso:
Prestare attenzione all'armonia delle caratteristiche (con una malattia della ghiandola pituitaria, si determina una crescita ossea irregolare - ingrossamento della mascella inferiore, del naso, degli archi sopracciliari delle ossa zigomatiche, ecc.)
2.Colore della pelle:
- Colore rosa nel diabete mellito, possibile presenza di xantomi e xantelasmi;
- Viso magro con pelle sottile e vellutata, esoftalmo e pigmentazione delle palpebre dovuta a tireotossicosi;
- Un viso simile a una maschera, inespressivo con espressioni facciali lente, un'espressione sonnolenta e cerosa, palpebre gonfie e restringimento delle rime palpebrali. La pelle è secca, squamosa – mixedema – una forma grave di ipotiroidismo;
- Colore rosso porpora a forma di luna con presenza di pustole, smagliature (strie), viso - produzione eccessiva dell'ormone adrenocorticotropo (ACTH).
II. Condizione dei capelli:
- Capelli sottili, fragili, leggermente cadenti a causa dell'ipertiroidismo;
- Capelli spessi, opachi (senza lucentezza), fragili che cadono facilmente a causa dell'ipotiroidismo;
- Riduzione o scomparsa dei peli sul petto, sull'addome, sul pube negli uomini (caratteri sessuali secondari) e crescita di peli di tipo maschile nelle donne (comparsa di baffi, barba).
III. Esame della pelle:
- Notare il colore, la presenza di grattamenti (diabete mellito), eruzioni pustolose, foruncoli (diabete mellito, malattia di Ischeng-Cushing).
- Pigmentazione (meladerma) – insufficienza surrenalica cronica. La pigmentazione è particolarmente pronunciata sulle parti aperte del corpo, nelle pieghe della pelle, nell'area dei capezzoli e dei genitali e sulla mucosa orale.
- La determinazione della secchezza e dell'umidità della pelle viene effettuata visivamente (se la pelle è secca, diventa ruvida e spessa; con elevata umidità si notano gocce di sudore) e sempre mediante palpazione.
IV. Determinazione dell'altezza del paziente
- Posizionare il paziente in modo tale che tocchi il pannello verticale dello stadiometro con i talloni, i glutei e le scapole.
- Tieni la testa in modo che il bordo superiore del canale uditivo esterno e l'angolo esterno dell'occhio si trovino sulla stessa linea orizzontale.
- Abbassa la barra orizzontale sulla testa e conta le divisioni.
V. Pesare il paziente
Fallo al mattino, a stomaco vuoto, dopo aver svuotato la vescica e l'intestino, in biancheria intima (seguito dalla perdita di peso della biancheria intima)
La pesatura viene effettuata regolarmente, a determinati intervalli.
VI. Spessore dello strato di grasso sottocutaneo
- Raccogliere la pelle dell'addome a livello dell'ombelico in una piega.
- Nelle donne normalmente non dovrebbe superare i 4 cm, negli uomini – 2 cm
VII. Sintomi oculari
- Occhi sporgenti: esoftalmo
- L'ampia apertura delle rime palpebrali è il sintomo di Delrymple.
- L'abbagliamento negli occhi è un sintomo di Kraus.
- Il raro battito delle palpebre è il sintomo di Stellwag.
- La recessione della palpebra superiore guardando in basso è il sintomo di Graefe.
- Disturbo della convergenza – Segno di Moebius (debolezza della convergenza)
- Retrazione della palpebra superiore con rapidi cambiamenti di sguardo - segno di Kocher
VIII. La presenza di tremore è determinata nella posizione di Romberg:
- Il paziente sta in piedi con le braccia tese davanti al petto, le dita divaricate, non tese, i talloni uniti, gli occhi chiusi
- Determina la presenza di tremore alle dita
- In caso di tremore pronunciato, è necessario eseguire un test dito-naso, in cui è possibile rilevare il tremore intenzionale - un aumento dell'ampiezza delle vibrazioni delle dita quando si avvicina al naso
IX. Nelle malattie delle ghiandole endocrine può verificarsi gonfiore a causa di danni al cuore (diabete mellito, tireotossicosi), ai reni (diabete mellito) e una sorta di gonfiore dei tessuti (edema mucoso) con ipotiroidismo.
Grandi rigonfiamenti massicci sono determinati visivamente.
Per un leggero gonfiore, è necessario utilizzare la palpazione:
- Esercita una pressione con le dita sulla pelle gonfia, premendola contro l'osso. Sotto le dita rimangono dei buchi, che vengono poi levigati.
La maggior parte degli organi endocrini non sono accessibili per l'esame diretto, ad eccezione della tiroide e delle gonadi, pertanto lo stato delle ghiandole endocrine spesso deve essere giudicato da sindromi cliniche caratteristiche di iper o ipofunzione della ghiandola interessata e da indicatori di omeostasi.
L'esame clinico del sistema endocrino nei bambini consiste nello studio dei disturbi, della storia medica e della vita del bambino, comprese le caratteristiche genetiche della famiglia, nell'esecuzione di un esame obiettivo di tutti gli organi e sistemi del bambino e nella valutazione dei dati provenienti da ulteriori metodi di ricerca.
Esame generale del paziente
Durante l'esame esterno del bambino, viene prestata attenzione alla proporzionalità del fisico. Successivamente viene effettuata una valutazione sviluppo fisico del bambino, sulla base del quale è possibile identificare i disturbi della crescita. Valutazione dello sviluppo fisico nei bambini:
Considerando la variazione osservata nei vari indicatori dello sviluppo fisico di un bambino, è necessario conoscere la cosiddetta distribuzione normale, o gaussiana-laplaciana. Le caratteristiche di questa distribuzione sono il valore medio aritmetico dell'attributo o indicatore (M) e il valore della deviazione standard, o sigma (δ). I valori oltre lo standard M ± 2δ per i bambini sani, di norma, indicano patologia.
In pratica, le stime indicative mantengono il loro significato, in cui dovrebbe essere utilizzata la seguente regola empirica: la variazione casuale di un tratto che cambia con l'età di solito non si estende oltre un intervallo di età; il valore di un segno può essere di natura patologica se il suo valore è compreso nell'intervallo + 1-2 intervalli di età. Gli intervalli di età nelle tavole delle norme vengono solitamente scelti come segue: dalla nascita a un anno l'intervallo è pari a un mese, da 1 anno a 3 anni - 3 mesi, da 3 a 7 anni - 6 mesi, da 7 a 12 anni - un anno.
Per determinare con precisione gli indicatori di sviluppo fisico, il pediatra deve utilizzare tabelle (o curve) della distribuzione del centile di età. L'utilizzo pratico di queste tabelle (grafici) è estremamente semplice e comodo. Colonne di tabelle o curve centili mostrano graficamente i confini quantitativi di un tratto in una certa proporzione o percentuale (centile) di bambini di una determinata età e sesso. In questo caso, i valori caratteristici della metà dei bambini sani di una determinata età e sesso - nell'intervallo dal 25° al 75° centile - sono presi come valori medi o condizionatamente normali.
Il nanismo ipofisario è caratterizzato da un rallentamento della crescita senza modificare le proporzioni corporee. Si può pensare al nanismo se l’altezza del bambino resta indietro rispetto a quella che dovrebbe essere e va oltre M-3δ (nella serie sigma), al di sotto dei limiti del 3° centile (nelle tabelle centili) o SDS<-2. Рост взрослого мужчины-карлика не превышает 130 см, рост женщины - менее 120 см.
Con l'ipotiroidismo si osserva un ritardo della crescita con una violazione delle proporzioni corporee - arti corti. Il viso ha un aspetto caratteristico: un ponte del naso ampio e piatto, occhi distanziati (ipertelorismo), una relativa predominanza del cranio facciale, una lingua grande e spessa, labbra spesse e altri sintomi di ipotiroidismo.
L'accelerazione della crescita è caratteristica del gigantismo ipofisario, in cui la crescita supera la norma di oltre il 15% (sopra il 97° centile, SDS = +2) e della tireotossicosi. Le proporzioni del corpo non cambiano con nessuna delle due malattie.
Se l'iperfunzione della ghiandola pituitaria si manifesta dopo la chiusura delle placche di crescita, si sviluppa l'acromegalia: un ingrossamento del naso, delle mani e dei piedi, una mascella inferiore massiccia e le arcate sopracciliari sporgono fortemente.
Ispezione, palpazione e valutazione delle condizioni della pelle. Nell'ipotiroidismo si nota pelle pallida con tinta itterica, marmorizzazione grigiastra e secchezza. Il pallore ceroso è caratteristico dei tumori ipofisari.
La colorazione viola-bluastra della pelle del viso si osserva in caso di iperfunzione della corteccia surrenale (sindrome e malattia di Cushing).
L'iperpigmentazione della pelle (tinta bronzo) si osserva con insufficienza surrenalica.
Le smagliature (strie) sono caratteristiche della sindrome di Cushing e dell'obesità ipotalamica.
La pelle secca si osserva nel diabete mellito e nel diabete insipido; Nel diabete mellito, inoltre, possono verificarsi prurito cutaneo e foruncolosi.
Un aumento dell'umidità cutanea si osserva nella tireotossicosi, nelle condizioni ipoglicemiche e nell'iperinsulinismo.
Condizione dei capelli. I capelli secchi, ruvidi e fragili sono caratteristici dell'ipotiroidismo. L'irsutismo (crescita eccessiva dei peli nel modello maschile nelle aree dipendenti dagli androgeni) e l'ipertricosi (crescita eccessiva dei peli nelle aree indipendenti dagli androgeni) sono associati all'iperfunzione della corteccia surrenale.
Virilizzazione- cambiamenti nei genitali femminili esterni secondo il tipo maschile - osservati con disfunzione congenita della corteccia surrenale, con tumori delle ghiandole surrenali o delle ovaie.
Ispezione, palpazione e valutazione della distribuzione del grasso sottocutaneo. Un eccesso di tessuto sottocutaneo con distribuzione uniforme è caratteristico dell'obesità costituzionale-esogena, nutrizionale e diencefalica.
Nella malattia e nella sindrome di Itsenko-Cushing si osserva un'eccessiva deposizione di grasso sottocutaneo nell'area del cingolo scapolare, della settima vertebra cervicale, del torace e dell'addome.
L'obesità cerebrale è caratterizzata da una bizzarra distribuzione del tessuto sottocutaneo, ad esempio sulla superficie esterna della spalla, sull'interno delle cosce, ecc.
Esistono 4 gradi di obesità:
I grado: il peso corporeo in eccesso è pari al 15-25% della quantità richiesta,
II grado - -»- -»- dal 25 al 50% -»-
III grado - -»- -»- 50-100% -»-
IV grado - -»- -»- oltre il 100%.
Un criterio importante per l'obesità è l'indice di massa corporea (Quetelet) (BMI) - il rapporto tra peso in kg e altezza (in m 2). L’obesità è definita come un BMI superiore al 95° centile per una determinata età e sesso.
Nel corpo, il grasso si trova 1) nel grasso sottocutaneo (grasso sottocutaneo) e 2) attorno agli organi interni (grasso viscerale). L'eccesso di grasso sottocutaneo nella zona addominale e il grasso viscerale nella cavità addominale provocano l'obesità addominale. o tipo "superiore". Questo tipo di distribuzione del grasso può essere distinto misurando le circonferenze di: vita (WA) - sotto il bordo inferiore delle costole sopra l'ombelico, fianchi (HT) - a livello del punto di massima sporgenza dei glutei, e calcolo del rapporto WC/CV. Valori WC/BV superiori a 0,9 negli uomini e superiori a 0,8 nelle donne indicano la presenza di obesità addominale. Al contrario, quando i valori WC/TB sono pari o inferiori a 0,7 si stabilisce la tipologia di obesità “inferiore” o femoroglutea.
Una diminuzione dello sviluppo del grasso sottocutaneo è caratteristica della malattia di Simmonds (deperimento ipofisario), della tireotossicosi e del diabete mellito prima del trattamento.
Valutazione dello sviluppo neuropsichico e dello stato del sistema nervoso
L'ipotiroidismo è caratterizzato da un ritardo nello sviluppo mentale, mentre la tireotossicosi è caratterizzata da un'accelerazione dei processi mentali, irascibilità, irritabilità, pianto, leggero tremore delle palpebre, delle dita, instabilità del sistema nervoso autonomo.
Con il nanismo ipofisario e la distrofia adiposo-genitale si osserva l'infantilismo mentale; con ipoparatiroidismo, aumento dell'eccitabilità neuromuscolare (sintomi positivi di Trousseau e Chvostek).
Quindi vengono esaminate le ghiandole endocrine accessibili all'esame obiettivo.
Metodi per lo studio della ghiandola tiroidea:
Ispezione. La ghiandola tiroidea normalmente non è visibile all'occhio e non può essere palpata. All'esame, è possibile determinare il grado di ingrossamento della ghiandola tiroidea. A partire dal secondo (con l'aumento del grado I non è visibile ad occhio nudo). Inoltre, all'esame, vengono rivelati sintomi caratteristici di una diminuzione o aumento della funzione della ghiandola: condizione della pelle, del tessuto sottocutaneo, sviluppo fisico, sintomi oculari (esoftalmo-occhi sporgenti, sintomi di Dalrymple - allargamento della fessura palpebrale , Jellinek - pigmentazione delle palpebre, Kraus - battito di ciglia raro, Graefe - ritardo della palpebra superiore quando si guarda in basso, Möbius - violazione della convergenza - quando un oggetto si avvicina agli occhi, prima convergono e poi un occhio si sposta involontariamente di lato ).
Palpazione La ghiandola tiroidea viene eseguita con i pollici di entrambe le mani, che si trovano sulla superficie anteriore, e le restanti dita vengono posizionate sulla parte posteriore del collo. Nei neonati, la palpazione può essere eseguita con il pollice e l'indice di una mano. Quando si palpa la ghiandola nei bambini più grandi, viene chiesto loro di fare un movimento di deglutizione, mentre la ghiandola si muove verso l'alto, e il suo scorrimento in questo momento lungo la superficie delle dita facilita l'esame della palpazione.
L'istmo della tiroide viene esaminato facendo scorrere il pollice di una mano lungo la linea mediana del collo in una direzione dall'alto verso il basso. L'istmo si trova sulla superficie anteriore della trachea sotto la cartilagine tiroidea e raggiunge il 3° anello tracheale. I lobi della ghiandola si trovano su entrambi i lati della trachea e della laringe, raggiungendo il 5-6o anello tracheale.
Quando si palpa la ghiandola tiroidea, è necessario notare le sue dimensioni, le caratteristiche superficiali, la natura dell'aumento (diffuso, nodulare, nodulare), la consistenza (elastico duro o morbido), la pulsazione, il dolore.
Il termine “gozzo” viene utilizzato quando la ghiandola tiroidea è ingrossata.
Attualmente in uso Classificazione OMS 2001, tenendo conto di tre gradi clinici di ingrossamento della tiroide:
Grado 0: la ghiandola tiroidea non è ingrandita
1° grado: la ghiandola tiroidea è palpabile
2° grado: il gozzo è palpabile e visibile all'occhio
Auscultazione l'esame della ghiandola tiroidea viene eseguito utilizzando un fonendoscopio, che viene applicato alla ghiandola. Quando la funzione della ghiandola aumenta, si sente spesso un soffio vascolare. Nei bambini più grandi, l'auscultazione viene eseguita trattenendo il respiro.
Ulteriori metodi di esame, utilizzato nella diagnosi delle malattie della tiroide nei bambini:
Esame ecografico – utilizzato per valutare le dimensioni e la struttura della ghiandola;
Esame ecografico con dopplerografia: viene valutato il flusso sanguigno nella ghiandola;
La biopsia con ago sottile è un esame citologico del punto, utilizzato nelle forme nodulari di gozzo per determinare la natura cellulare dei linfonodi;
Determinazione della concentrazione di ormoni nel siero del sangue: tiroxina (T-4), triiodotironina (T-3) e ormone stimolante la tiroide (TSH). T-4 e T-3 nel sangue sono in uno stato libero e legato alle proteine. L'attività ormonale è determinata dalla concentrazione delle frazioni libere degli ormoni tiroidei, pertanto, per valutare lo stato funzionale della tiroide, è necessario esaminare le frazioni libere di T-3 e T-4;
5) Scintigrafia isotopica - può essere utilizzata per diagnosticare formazioni ormonalmente attive e/o inattive, soprattutto quelle piccole nei bambini di età superiore ai 12 anni.
Saggio immunoenzimatico o radioimmunologico
A) Anticorpi contro la perossidasi tiroidea (TPO) e le frazioni antigeniche microsomiali (MAG) - utilizzati per diagnosticare il processo autoimmune nella tiroidite autoimmune cronica;
B) Anticorpi contro i recettori del TSH - testati per sospetto gozzo tossico diffuso (morbo di Graves);
C) Gli anticorpi anti-tireoglobulina vengono esaminati durante l'osservazione dei pazienti operati di cancro alla tiroide (solo in caso di resezione totale).
7) Metodo a raggi X
Determinazione dell'età ossea mediante radiografie delle mani.
Il sistema endocrino, o sistema di secrezione interna, è costituito da ghiandole endocrine, così chiamate perché secernono prodotti specifici della loro attività - gli ormoni - direttamente nell'ambiente interno del corpo, nel sangue. Ci sono otto di queste ghiandole nel corpo: tiroide, paratiroide o paratiroide, gozzo (timo), ghiandola pituitaria, ghiandola pineale (o ghiandola pineale), ghiandole surrenali (ghiandole surrenali), pancreas e gonadi (Fig. 67).
La funzione generale del sistema endocrino si riduce all'implementazione della regolazione chimica nel corpo, stabilendo connessioni tra i suoi organi e sistemi e mantenendo le loro funzioni ad un certo livello.
Gli ormoni delle ghiandole endocrine sono sostanze con attività biologica molto elevata, cioè agiscono in dosi molto piccole. Insieme agli enzimi e alle vitamine appartengono ai cosiddetti biocatalizzatori. Inoltre, gli ormoni hanno un effetto specifico: alcuni influenzano determinati organi, altri controllano determinati processi nei tessuti del corpo.
Le ghiandole endocrine partecipano al processo di crescita e sviluppo del corpo, alla regolazione dei processi metabolici che ne assicurano l'attività vitale, alla mobilitazione delle forze del corpo, nonché al ripristino delle risorse energetiche e al rinnovamento delle sue cellule e tessuti. Quindi, oltre alla regolazione nervosa dell’attività vitale dell’organismo (anche durante l’attività sportiva), esiste la regolazione endocrina e la regolazione umorale, che sono strettamente correlate e attuate attraverso un meccanismo di “feedback”.
Poiché l'educazione fisica e soprattutto lo sport richiedono una regolazione e una correlazione sempre più avanzate delle attività di vari sistemi e organi umani in difficili condizioni di stress emotivo e fisico, lo studio della funzione del sistema endocrino, sebbene non ancora incluso nella pratica diffusa, sta gradualmente cominciando ad occupare un posto sempre più importante nella complessa ricerca sugli atleti.
La corretta valutazione dello stato funzionale del sistema endocrino ci consente di identificare cambiamenti patologici in esso in caso di uso irrazionale degli esercizi fisici. Sotto l'influenza dell'educazione fisica e dello sport razionale e sistematico, questo sistema viene migliorato.
L'adattamento del sistema endocrino all'attività fisica è caratterizzato non semplicemente da un aumento dell'attività delle ghiandole endocrine, ma principalmente da un cambiamento nei rapporti tra le singole ghiandole. Lo sviluppo della fatica durante il lavoro prolungato è accompagnato anche da corrispondenti cambiamenti nell'attività delle ghiandole endocrine.
Il sistema endocrino umano, migliorando sotto l'influenza di un allenamento razionale, aiuta ad aumentare le capacità adattative del corpo, che porta a un miglioramento delle prestazioni sportive, in particolare nello sviluppo della resistenza.
La ricerca sul sistema endocrino è complessa e viene solitamente eseguita in ambito ospedaliero. Ma esistono una serie di semplici metodi di ricerca che consentono, in una certa misura, di valutare lo stato funzionale delle singole ghiandole endocrine: anamnesi, esame, palpazione, test funzionali.
Anamnesi. Le informazioni sul periodo della pubertà sono importanti. Interrogando le donne, si scopre l'ora di inizio, la regolarità, la durata, l'abbondanza delle mestruazioni, lo sviluppo dei caratteri sessuali secondari; quando si interrogano gli uomini, il momento dell'inizio della perdita della voce, dei peli del viso, ecc. Per le persone anziane, il momento dell'inizio della menopausa, cioè il momento della cessazione delle mestruazioni nelle donne, lo stato della funzione sessuale negli uomini.
Le informazioni sullo stato emotivo sono essenziali. Ad esempio, rapidi cambiamenti dell’umore, aumento dell’eccitabilità, ansia, solitamente accompagnati da sudorazione, tachicardia, perdita di peso, febbricola e affaticamento, possono indicare un aumento della funzionalità tiroidea. Quando la funzione della ghiandola tiroidea diminuisce, si osserva apatia, accompagnata da letargia, lentezza, bradicardia, ecc.
I sintomi di un aumento della funzionalità tiroidea a volte sono quasi identici ai sintomi che compaiono quando un atleta si allena troppo. Questo aspetto dell'anamnesi dovrebbe essere particolarmente importante, poiché negli atleti sono stati osservati casi di aumento della funzionalità tiroidea (ipertiroidismo).
Determinare la presenza di disturbi caratteristici dei pazienti con diabete: aumento della sete e dell'appetito, ecc.
Ispezione. Prestare attenzione ai seguenti segni: la proporzionalità dello sviluppo delle singole parti del corpo nelle persone alte (c'è un aumento sproporzionato del naso, del mento, delle mani e dei piedi, che può indicare un'iperfunzione del lobo anteriore della ghiandola pituitaria - acromegalia), presenza di occhi sporgenti, lucentezza pronunciata degli occhi (osservata nell'ipertiroidismo), gonfiore del viso (osservato nell'ipotiroidismo), così come segni come ingrossamento della ghiandola tiroidea, sudorazione o pelle secca, presenza di grasso (la deposizione predominante di grasso nella parte inferiore dell'addome, nei glutei, nelle cosce e nel torace è caratteristica dell'obesità associata a disfunzione dell'ipofisi e delle gonadi), perdita di peso improvvisa (si verifica con tireotossicosi, malattie dell'ipofisi - malattia di Simmonds e delle ghiandole surrenali - morbo di Addison).
Inoltre, durante l'esame, viene determinato il pelo sul corpo, poiché la crescita dei peli dipende in larga misura dagli influssi ormonali delle gonadi, della tiroide, della ghiandola surrenale e dell'ipofisi. La presenza di capelli negli uomini, caratteristica delle donne, può indicare un'insufficienza della funzione delle gonadi. Il tipo di capelli maschile nelle donne può essere una manifestazione di ermafroditismo: la presenza in un individuo di caratteristiche caratteristiche di entrambi i sessi (a tali persone non è consentito praticare sport).
Una crescita eccessiva di peli sul corpo e sugli arti e, nelle donne, sul viso (baffi e barba) suggerisce un tumore della corteccia surrenale, ipertiroidismo, ecc.
Palpazione. Di tutte le ghiandole endocrine, la tiroide e le ghiandole riproduttive maschili possono essere palpate direttamente (oltre che esaminate); durante la visita ginecologica - gonadi femminili (ovaie).
Test funzionali. Quando si studia la funzione delle ghiandole endocrine, vengono utilizzati molti di questi test. Di grande importanza nella medicina dello sport sono i test funzionali utilizzati nello studio della tiroide e delle ghiandole surrenali.
I test funzionali quando si studia la funzione della ghiandola tiroidea si basano sullo studio dei processi metabolici regolati da questa ghiandola. L'ormone tiroideo - tiroxina stimola i processi ossidativi, partecipando alla regolazione di vari tipi di metabolismo (metabolismo dei carboidrati, dei grassi, dello iodio, ecc.). Pertanto, il metodo principale per studiare lo stato funzionale della ghiandola tiroidea è determinare il metabolismo basale (la quantità di energia in kilocalorie consumata da una persona in uno stato di completo riposo), che dipende direttamente dalla funzione della ghiandola tiroidea e la quantità di tiroxina da esso secreta.
Il valore del metabolismo basale in kilocalorie viene confrontato con i valori corretti calcolati utilizzando le tabelle o i nomogrammi Harris-Benedict, ed è espresso in percentuale del valore corretto. Se il metabolismo basale dell'atleta esaminato supera quello atteso di oltre il +10%, ciò suggerisce un'iperfunzione della tiroide, se inferiore al 10%, la sua ipofunzione. Maggiore è la percentuale di eccesso, più pronunciata è l'iperfunzione della tiroide. In caso di ipertiroidismo significativo, il tasso metabolico basale può essere superiore al +100%. Una diminuzione del metabolismo basale di oltre il 10% rispetto al normale può indicare un'ipofunzione della ghiandola tiroidea.
La funzionalità tiroidea può essere testata anche utilizzando iodio radioattivo. Ciò determina la capacità della ghiandola tiroidea di assorbirlo. Se più del 25% dello iodio somministrato rimane nella ghiandola tiroidea dopo 24 ore, ciò indica un aumento della sua funzione.
I test funzionali nello studio della funzione surrenale forniscono dati preziosi. Le ghiandole surrenali hanno una vasta gamma di effetti sul corpo. La midollare surrenale, che secerne ormoni - catecolamine (adrenalina e norepinefrina), comunica tra le ghiandole endocrine e il sistema nervoso, partecipa alla regolazione del metabolismo dei carboidrati, mantiene il tono vascolare e i muscoli cardiaci. La corteccia surrenale secerne aldosterone, corticosteroidi e ormoni androgeni, che svolgono un ruolo vitale nel funzionamento del corpo nel suo insieme. Tutti questi ormoni sono coinvolti nel metabolismo dei minerali, dei carboidrati, delle proteine e nella regolazione di numerosi processi nel corpo.
Il lavoro muscolare teso migliora la funzione della midollare surrenale. Dall'entità di questo aumento si può giudicare l'effetto del carico sul corpo dell'atleta.
Per determinare lo stato funzionale delle ghiandole surrenali, la composizione chimica e morfologica del sangue (la quantità di potassio e sodio nel siero del sangue, il numero di eosinofili nel sangue) e delle urine (determinazione dei 17-chetosteroidi, ecc.) viene esaminato.
Negli atleti allenati, dopo un carico corrispondente al loro livello di preparazione, si osserva un moderato aumento della funzione surrenale. Se il carico supera le capacità funzionali dell’atleta, la funzione ormonale delle ghiandole surrenali viene soppressa. Questo è determinato da uno speciale test biochimico del sangue e delle urine. Con insufficienza surrenalica, il metabolismo dei minerali e dell'acqua cambia: il livello di sodio nel siero del sangue diminuisce e la quantità di potassio aumenta.
Senza una funzione perfetta e coordinata di tutte le ghiandole endocrine è impossibile ottenere prestazioni atletiche elevate. Apparentemente, vari tipi di sport sono associati ad un aumento predominante della funzione di diverse ghiandole endocrine, perché gli ormoni di ciascuna ghiandola hanno un effetto specifico.
Nello sviluppo della qualità della resistenza, il ruolo principale è svolto dagli ormoni che regolano tutti i principali tipi di metabolismo; nello sviluppo delle qualità di velocità e forza, è importante un aumento del livello di adrenalina nel sangue.
Un compito urgente della moderna medicina sportiva è studiare lo stato funzionale del sistema endocrino dell'atleta per chiarire il suo ruolo nell'aumento delle sue prestazioni e nella prevenzione dello sviluppo di cambiamenti patologici sia nel sistema endocrino stesso che in altri sistemi e organi (poiché la disfunzione del sistema endocrino sistema endocrino influisce sull'organismo nel suo insieme).
Capitolo 15 CONCLUSIONI DAI RISULTATI DELLA VISITA MEDICA
Una visita medica di un atleta e di un atleta, sia primaria che ripetuta e aggiuntiva, deve concludersi con una relazione medica.
Sulla base dei dati ottenuti durante l'esame dell'anamnesi, dello sviluppo fisico, dello stato di salute e funzionale, nonché dei dati di studi strumentali e di laboratorio e delle conclusioni di specialisti in singoli organi e sistemi (oftalmologo, neurologo, ecc.), il terapista sportivo deve trarre determinate conclusioni e dare la conclusione corrispondente.
La visita medica primaria comprende necessariamente tutti gli elementi sopra indicati. Durante gli esami ripetuti e aggiuntivi, gli esami strumentali, di laboratorio e le consultazioni con specialisti vengono eseguiti solo se necessari e solo quelli che il medico-clinico osservante ritiene necessario prescrivere. Ciò determina la diversa natura del parere medico durante gli esami iniziali, ripetuti e aggiuntivi di un atleta o di un atleta. Tuttavia, indipendentemente dal tipo di visita medica effettuata, la relazione medica deve contenere le seguenti cinque sezioni: 1) valutazione dello stato di salute, 2) valutazione dello sviluppo fisico, 3) valutazione dello stato funzionale, 4) raccomandazioni all'atleta sulla routine quotidiana, alimentazione, ecc. e 5) raccomandazioni all'allenatore e all'insegnante sull'individualizzazione del processo di allenamento e del regime di allenamento.
Valutazione della salute. L'ammissione di una persona allo sport o solo all'educazione fisica ricreativa dipende essenzialmente da questa valutazione durante la prima visita medica. Per fare una diagnosi di “sano”, il medico è obbligato ad escludere tutti i possibili cambiamenti patologici nel corpo che rappresentano una controindicazione alla pratica sportiva. Per effettuare con sicurezza una diagnosi del genere, utilizza l'intero arsenale di moderni strumenti diagnostici.
Se la diagnosi "sano" è fuori dubbio e viene confermata da tutti gli studi successivi, la persona esaminata riceve il permesso di praticare sport e raccomandazioni su quali sport dovrebbe praticare. Queste raccomandazioni vengono fornite sulla base di tutti i dati ottenuti durante lo studio, rivelando le caratteristiche del fisico, della costituzione, dello stato funzionale, ecc., Tenendo conto delle specificità del processo di allenamento in un particolare sport, che richiede determinate caratteristiche individuali che il medico sportivo dovrebbe conoscere bene.
Se alla persona esaminata non è consentito praticare sport, per i quali devono esserci controindicazioni assolute, il medico è obbligato a fornire raccomandazioni in materia di educazione fisica, indicandone la natura e le dosi ammissibili di attività fisica.
Controindicazioni assolute allo sport sono varie malattie croniche (malattie cardiache, malattie croniche dei polmoni, fegato, stomaco, intestino, reni, ecc.), difetti fisici (ad esempio un polmone o un rene rimosso) che non possono essere curati. Il medico è guidato dalle istruzioni che definiscono le controindicazioni alla pratica di determinati sport, nonché dalle istruzioni ufficiali approvate dal Ministero della Salute dell'URSS, che definiscono i requisiti che devono essere soddisfatti dalla salute di un atleta che entra in un istituto di educazione fisica di istruzione superiore.
Oltre alle controindicazioni assolute allo sport, esistono le cosiddette controindicazioni relative: difetti di salute o di sviluppo fisico che impediscono la pratica di un solo sport. Ad esempio, la perforazione del timpano dovuta a pregressa infiammazione dell'orecchio medio è una controindicazione agli sport acquatici, ma non impedisce la pratica di tutte le altre tipologie; I piedi piatti servono come controindicazione relativa solo al sollevamento pesi. Per alcuni disturbi posturali (ad esempio curvatura, schiena curva), non è consigliabile praticare sport in cui questi difetti possono peggiorare (ad esempio ciclismo, canottaggio, boxe), ma sono suggeriti sport, la natura del processo di allenamento in cui aiuta a correggere questi difetti.
Per gli atleti, oltre a queste controindicazioni, esistono controindicazioni temporanee alla pratica sportiva - durante la malattia (fino al completo recupero). Queste malattie includono focolai di infezione cronica, che potrebbero non causare alcun disturbo e potrebbero non disturbare l'atleta per un certo periodo di tempo.
I focolai di infezione cronica sono malattie croniche di singoli organi (carie dentale, infiammazione cronica delle tonsille faringee, cistifellea, cavità paranasali, ovaie, ecc.), che non si manifestano attivamente (non ci sono disturbi pronunciati o sintomi clinici) mentre il corpo è in grado di sopprimere l'intossicazione costante che emana da essi. Tuttavia, con la minima diminuzione delle difese dell'organismo, queste lesioni possono causare complicazioni in altri organi. Con il trattamento tempestivo e la rimozione dei focolai di infezione cronica, i cambiamenti patologici che causano in altri organi e sistemi scompaiono se in essi non si sono ancora sviluppati cambiamenti irreversibili.
L’insegnante e l’allenatore devono assicurarsi che l’atleta segua tutte le indicazioni del medico e persista nel trattamento.
Durante esami medici ripetuti e aggiuntivi, viene data una conclusione sui cambiamenti nella salute che si sono verificati sotto l'influenza dell'educazione fisica e dello sport - sia positivi che possibili negativi (in caso di uso irrazionale dell'attività fisica).
Valutazione dello sviluppo fisico. Sulla base dei dati ottenuti utilizzando vari metodi di studio e valutazione dello sviluppo fisico, viene fornita una conclusione generale sullo sviluppo fisico (sviluppo fisico medio, alto o basso), vengono indicati i suoi difetti esistenti, in particolare, cattiva postura, ritardo in alcuni parametri fisici sviluppo, senza tener conto del quale è impossibile costruire correttamente il processo formativo. L'esercizio fisico dovrebbe mirare non solo ad aumentare lo stato funzionale dello studente, ma anche ad eliminare i difetti identificati nello sviluppo fisico, che possono avere un effetto negativo sulla salute se non vengono eliminati. Pertanto, una cattiva postura (curvarsi, scoliosi), il peggioramento dello stato funzionale del sistema respiratorio esterno e del sistema cardiovascolare, può contribuire all'insorgenza di malattie di questi sistemi.
Studi ripetuti sullo sviluppo fisico consentono di valutare l'impatto dell'allenamento sistematico sugli indicatori sia morfologici che funzionali dello sviluppo fisico, per identificare positivi e negativi (nei casi in cui le lezioni sono state svolte senza tenere conto dei cambiamenti che il medico ha sottolineato in la conclusione durante l'esame iniziale) cambiamenti nello sviluppo fisico.
Valutazione dello stato funzionale. Per praticare sport, cioè svolgere un'attività fisica intensa, non solo è necessario essere assolutamente sani e ben sviluppati fisicamente, ma anche essere ben preparati dal punto di vista funzionale. Pertanto la terza sezione della relazione medica è la valutazione dello stato funzionale del soggetto. Viene somministrato sulla base dei risultati di uno studio che utilizza metodi diagnostici funzionali condotto durante la visita medica iniziale. Durante esami medici ripetuti e aggiuntivi, il medico determina i cambiamenti nello stato funzionale dell’atleta. Sulla base di una ricerca approfondita utilizzando metodi diagnostici funzionali, si giunge a una conclusione sul miglioramento o il deterioramento dello stato funzionale. Il suo miglioramento indica solitamente un aumento del livello di allenamento. Inoltre, i risultati degli studi condotti durante gli allenamenti e le competizioni (dati provenienti da osservazioni mediche e pedagogiche - vedi sotto) danno all'allenatore un'idea dello stato (miglioramento o peggioramento) dell'allenamento speciale.
Con esami ripetuti, il medico può constatare uno stato di sovrallenamento, che si verifica a causa del sovraccarico del sistema nervoso centrale con un'attività fisica eccessiva e monotona, causando nevrosi. Può determinare se un atleta è oberato di lavoro. Uno studio del periodo di recupero dopo allenamenti e gare rivela la mancanza di ripristino delle funzioni di vari sistemi corporei dopo i carichi precedenti. La mancata contabilizzazione adeguata di questi dati può portare a sovraccaricare quei sistemi che presentavano anomalie ed erano particolarmente stressati. Ciò vale, in particolare, per il cuore: in un atleta, in assenza di disturbi e calo delle prestazioni, si rilevano deviazioni sull'ECG, indicando una discrepanza tra il livello della sua preparazione e il carico eseguito. Se non si presta attenzione a ciò, possono verificarsi profondi cambiamenti negativi nel muscolo cardiaco, causando l'interruzione della sua funzione.
A seconda del grado di preparazione funzionale degli studenti, l'insegnante e il formatore personalizzano la loro attività fisica.
Va tenuto presente che il livello dello stato funzionale è determinato solo da un esame completo dell'atleta. Come già accennato, non si dovrebbero trarre conclusioni di vasta portata basandosi sullo studio di un solo indicatore, anche se sembra molto informativo. La natura dell'insieme di indicatori utilizzati durante l'esame di un atleta o di un atleta fisico non dovrebbe essere standard. È determinato ogni volta dal compito che deve affrontare il medico.
Una corretta valutazione da parte di un medico dello stato di salute, dello sviluppo fisico e dello stato funzionale del corpo dell’atleta aiuta l’allenatore e l’insegnante a valutare correttamente lo stato di forma fisica e, su questa base, a costruire razionalmente il processo di allenamento.
Un aumento dello stato funzionale del corpo di un atleta è caratterizzato dall'economizzazione dell'attività di tutti i sistemi a riposo, da un adattamento più economico ai carichi standard e durante il massimo stress fisico - dalla possibilità di potenziare al massimo le funzioni del corpo.
Con il miglioramento dello stato funzionale del sistema cardiovascolare, si nota un rallentamento della frequenza cardiaca, una leggera diminuzione della pressione sanguigna a riposo e, secondo i dati dell'ECG, un moderato rallentamento della conduzione atrioventricolare (PQ), potenziamento dei poli R E T, riduzione dei denti R, accorciamento della sistole elettrica (QT); aumento dell'ampiezza delle onde del chimogramma dei raggi X; secondo la ricerca policardiografica - economizzazione della funzione contrattile.
Il miglioramento dello stato funzionale del sistema cardiovascolare, rivelato in studi che utilizzano test standard, bicicletta ergometrica, ecc., si esprime in una diminuzione della risposta del polso e della pressione sanguigna durante i carichi di resistenza e forza e in un aumento della risposta ai carichi di velocità , che indica la capacità di mobilizzazione del corpo. La risposta ai test funzionali è solitamente normotonica con un buon rapporto quantitativo tra polso e pressione arteriosa e un loro rapido recupero.
Con un aumento dello stato funzionale del sistema respiratorio esterno, la frequenza respiratoria diminuisce, la forza dei muscoli respiratori aumenta, la capacità vitale effettiva dei polmoni supera significativamente quella prevista, aumenta la ventilazione polmonare massima, gli indicatori dei test funzionali di il sistema respiratorio esterno migliora, l'atleta diventa più resistente alla diminuzione della saturazione di ossigeno nel sangue arterioso, la velocità del flusso sanguigno rallenta (secondo i dati dell'ossimetria).
Con un aumento dello stato funzionale del sistema nervoso e neuromuscolare, migliora l'esecuzione dei test di coordinazione, così come i test per lo studio dell'apparato vestibolare, del sistema nervoso autonomo, aumenta la forza di vari gruppi muscolari, l'ampiezza tra tensione muscolare e il rilassamento (secondo la miotonometria), la reobase motoria e la cronassia diminuiscono, gli indicatori dei muscoli antagonisti, ecc., si avvicinano.
Dopo aver subito infortuni e malattie, gli atleti e gli atleti sono tenuti a sottoporsi a un'ulteriore visita medica, che determina i tempi esatti di ammissione all'allenamento sportivo e all'educazione fisica e la loro intensità in relazione a una determinata persona. Malattie o infortuni passati riducono sempre il livello dello stato funzionale di un atleta e di un atleta fisico. In questi casi, anche un piccolo carico fisico per un particolare atleta potrebbe non corrispondere alle sue capacità funzionali al momento e causare cambiamenti sfavorevoli in vari organi e sistemi. Senza un'ulteriore visita medica, l'allenatore e l'insegnante non hanno il diritto di consentire all'atleta di partecipare all'allenamento. Altrimenti, ciò può portare alla ricaduta della malattia e talvolta a gravi complicazioni.
Quando lo stato funzionale si deteriora sotto l'influenza di un'attività fisica irrazionale ed eccessiva, tutti questi indicatori cambiano nella direzione opposta.
Molto importanti per l'allenatore e l'insegnante sono quelle sezioni della relazione medica in cui il medico fornisce raccomandazioni all'atleta sul regime e all'allenatore e all'insegnante sull'individualizzazione dei carichi di allenamento e del regime di allenamento.
Al termine del verbale il medico dovrà indicare il termine ultimo per presentarsi per una seconda visita medica. L'allenatore e l'insegnante sono responsabili di garantire che l'atleta segua queste istruzioni.
Esiste una divisione in gruppi medici di studenti di scuole, istituti tecnici e università, membri di gruppi di educazione fisica primaria e coloro che partecipano a gruppi sanitari. Questa divisione è prevista dal programma statale di educazione fisica. Per le persone anziane, il programma è leggermente diverso, ma non fondamentalmente diverso da quello generalmente accettato.
Gli allenatori e gli insegnanti che lavorano con gli studenti nell'ambito dei programmi statali di educazione fisica dovrebbero sapere a quale gruppo medico appartengono i loro studenti.
In base allo stato di salute, allo sviluppo fisico e alla prontezza funzionale, i soggetti coinvolti nel programma di educazione fisica, nonché i membri dei gruppi di educazione fisica primaria, sono divisi in tre gruppi medici: base, preparatorio e speciale.
Il gruppo medico principale comprende persone con buone condizioni funzionali e nessuna deviazione nella salute o nello sviluppo fisico. Oltre a frequentare le lezioni complete del programma di educazione fisica, possono prepararsi per superare e soddisfare gli standard GTO. Inoltre, il medico dà loro raccomandazioni riguardanti la partecipazione a qualsiasi sezione sportiva e il permesso di partecipare alle competizioni di questo sport, a condizione che siano sufficientemente preparati.
Il gruppo preparatorio comprende studenti che presentano lievi deviazioni di salute, stato funzionale insufficiente e scarso sviluppo fisico. Padroneggiano lo stesso programma di educazione fisica, ma più gradualmente. Gli standard in base ai quali viene presa in considerazione la loro prestazione sono sviluppati tenendo conto delle deviazioni che ciascuno di essi presenta. È loro vietata la partecipazione ad ulteriori sezioni sportive. Coloro che sono assegnati a questo gruppo possono impegnarsi in un allenamento fisico generale e prepararsi gradualmente a soddisfare gli standard del complesso GTO. Con il miglioramento della salute, dello sviluppo fisico e dello stato funzionale, questi studenti possono essere trasferiti dal gruppo preparatorio al gruppo principale.
Un gruppo medico speciale comprende persone con deviazioni significative (permanenti o temporanee) nel loro stato di salute e sviluppo fisico. Le lezioni con loro sono strutturate secondo programmi speciali, tenendo conto delle deviazioni esistenti e si svolgono sotto costante controllo medico. Se necessario, vengono inviati a corsi di fisioterapia nelle istituzioni mediche.
L'allenatore e l'insegnante ricevono per iscritto un parere medico sull'atleta o sull'educatore fisico. Se possibile, e nelle squadre nazionali è obbligatorio, i pareri medici vengono discussi insieme all'insegnante.
Sulla base del parere medico, il formatore e l'insegnante apportano le modifiche necessarie al sistema di allenamento. Le raccomandazioni in esso specificate sono obbligatorie e richiedono un monitoraggio sistematico. Ciò non esonera il medico dall'obbligo di verificare periodicamente l'attuazione delle sue raccomandazioni. Le principali disposizioni del parere medico direttamente correlate al processo di allenamento sono incluse nel piano di allenamento individuale dell’atleta. Durante ripetuti esami medici, viene verificata la correttezza del processo di allenamento e degli esercizi fisici.
Il parere del medico aiuta a dare una valutazione approfondita del lavoro del formatore e dell’insegnante. Dopotutto, la sua efficacia è determinata non solo da criteri importanti come l'aumento della sportività, il numero di atleti altamente qualificati formati, ma anche dalla combinazione dei risultati di elevata sportività con l'aumento e il rafforzamento della salute dell'atleta e l'assenza di effetti negativi i cambiamenti. Solo a questa condizione possiamo parlare dell'efficacia e dell'adeguatezza della metodologia di allenamento utilizzata dall'allenatore e dall'insegnante.
La necessità di effettuare con attenzione un parere medico è diventata oggi ancora più intensificata a causa del ricorso ad un'attività fisica molto intensa nell'allenamento sportivo. L'uso di tali carichi è necessario per ottenere risultati elevati caratteristici degli sport moderni. Ciò richiede un'attenta osservanza di tutte le raccomandazioni mediche. La deviazione dalle condizioni determinate dal medico durante l'utilizzo di carichi intensi li rende eccessivi, il che può essere dannoso per la salute dell'atleta.
Con carichi elevati è necessario monitorare attentamente i loro effetti sull'organismo per prevenire tempestivamente i loro possibili effetti negativi. Se l'aumento della sportività e dei risultati sportivi è accompagnato da un peggioramento della salute, il metodo di allenamento utilizzato non è razionale.
L'uso di questo tipo di carico richiede salute assoluta, chiara individualizzazione, regolarità e aumento graduale, riposo sufficiente tra le lezioni, rispetto rigoroso del regime, ecc. (Non dovresti, ad esempio, combinare un'attività fisica pesante con un'intensa attività mentale) , attento controllo medico sistematico.
Il rigoroso rispetto di questi requisiti previene possibili sovraccarichi e garantisce un'elevata efficienza di tali carichi.
Agenzia federale per l'istruzione della Federazione Russa
Istituzione educativa statale di istruzione professionale superiore Università statale del Bashkir
Dipartimento di Biologia
Dipartimento di Biochimica
Lavoro del corso
Metodi per lo studio del sistema endocrino in condizioni normali e patologiche
Completato:
Studente OSE del 5° anno
Gruppo A
Usachev S.A.
Uffa 2010
Contenuto
Introduzione................................................................4
1. Revisione dei metodi per lo studio del sistema endocrino
normale e patologico................................................................6
1.1. Breve cenni storici................................................................6
1.2. Rassegna dei moderni metodi per lo studio del sistema endocrino..12
1.3. Metodi moderni di studio del sistema endocrino
esempio di studio della tiroide……………28
2. Problemi e prospettive dei metodi di ricerca endocrina
sistemi……………………………45
Conclusione…………………..………..58
Elenco dei riferimenti................................................................59
Elenco delle abbreviazioni adottate nell'opera
AOK – cellule che formano anticorpi
AG – antigene
ACTH – ormone adrenocorticotropo
HPLC – cromatografia liquida ad alta velocità
HI – iperinsulinemia compensatoria
DNA – acido desossiribonucleico
LC – cromatografia liquida
ELISA – test immunoenzimatico
IR – resistenza all’insulina
TC – tomografia computerizzata
LH – ormone luteinizzante
SM – sindrome metabolica
MRI – risonanza magnetica
PCR – reazione a catena della polimerasi
RIA – dosaggio radioimmunologico
DHT – reazione di ipersensibilità di tipo ritardato
DM 2 – diabete mellito di tipo 2
TSH – ormone stimolante la tiroide
T4 – tiroxina
T3 – triiodotironina
TBG – test della globulina legante la tiroxina
Ecografia – esame ecografico
FIA – immunodosaggio a fluorescenza
Mappatura color-Doppler
SNC - sistema nervoso centrale
ghiandola tiroidea - ghiandola tiroidea
introduzione
Negli ultimi anni, come risultato dello sviluppo di metodi più sottili, sensibili e specifici per la determinazione degli ormoni e di altri metodi per studiare il sistema endocrino in condizioni di salute e di malattia, l'endocrinologia clinica e la biochimica si sono ampiamente trasformate da una sorta di arte in una sorta di branca della chimica applicata, della fisiologia, della fisica e della genetica. Questo progresso è stato reso possibile grazie all'introduzione nella pratica di un gran numero di metodi nuovi e ad alta tecnologia per lo studio del sistema endocrino, all'isolamento e alla successiva caratterizzazione biologica e biochimica di vari ormoni polipeptidici altamente purificati, steroidi, vitamine, derivati di piccoli polipeptidi e amminoacidi, che sono classificati come ormoni, nonché la produzione di atomi di ormoni marcati radioattivamente con elevata attività specifica.
Pertinenza dell'argomento:
Attualmente, sulla soglia della comprensione dei fenomeni più nascosti e misteriosi di un organismo vivente, il compito più importante è trovare i metodi di ricerca più affidabili, accessibili e ad alta tecnologia. La nuova era delle nanotecnologie e delle scoperte altamente specializzate sta cominciando a dare il suo contributo alla chimica biologica, che da tempo utilizza non solo metodi di analisi chimica, ma le tecnologie più moderne in tutti i rami della fisica, dell'informatica, della matematica e di altre scienze. Il tempo detta le sue condizioni all'umanità: conoscere più profondamente, conoscere a fondo, trovare la causa dei processi che si verificano in un organismo vivente in condizioni normali e patologiche. La ricerca di nuovi metodi di ricerca non si ferma e lo scienziato semplicemente non ha il tempo di generalizzare, sistematizzare quest'area della cognizione o evidenziare ciò di cui ha bisogno in questo momento. Inoltre, quando ho studiato il problema della ricerca sul sistema endocrino, non ho trovato un manuale sufficientemente completo e generalizzante su questo argomento. Molti ricercatori, in particolare i biochimici, si trovano ad affrontare il problema della ricerca e della sistematizzazione di metodi moderni per lo studio del sistema endocrino nella salute e nella malattia. Ciò è dovuto, innanzitutto, al fatto che ogni giorno compaiono nuove fonti di letteratura e nuovi metodi di ricerca, ma non esiste un'unica guida sui metodi di ricerca che sistematizzi i dati sui metodi. È per questi motivi che la rilevanza dell'argomento che ho scelto è molto alta.
Obiettivo del lavoro:
Sistematizzare i dati sullo stato dei metodi per lo studio del sistema endocrino in condizioni normali e patologiche nel mondo moderno.
Compiti:
- Fai una panoramica storica dell’argomento.
Riflettere le conoscenze attuali sui metodi per lo studio del sistema endocrino, senza una descrizione dettagliata dei metodi e delle tecniche di ricerca.
Descrivere i metodi di ricerca utilizzando l'esempio di una ghiandola endocrina.
Evidenziare i problemi e le prospettive dei metodi moderni per lo studio del sistema endocrino nella salute e nella malattia.
1. Rassegna delle metodiche per lo studio del sistema endocrino in condizioni normali e patologiche
1.1. Breve cenni storici
Lo studio del sistema endocrino e l'endocrinologia stessa sono fenomeni relativamente nuovi nella storia della scienza. Il sistema endocrino era una parte inaccessibile del corpo umano fino all’inizio del XX secolo. Prima di ciò, i ricercatori non potevano svelare i segreti delle formazioni endocrine perché non potevano isolare e studiare i fluidi che secernono (“succhi” o “segreti”). Gli scienziati non hanno scoperto alcun "succo" o speciali condotti escretori attraverso i quali solitamente fuoriesce il fluido prodotto. Pertanto, l'unico metodo per studiare le funzioni della ghiandola endocrina era il metodo di escissione di una parte o dell'intero organo.
Scienziati e storici sostenevano che gli organi del sistema endocrino in Oriente erano conosciuti fin dall'antichità e li chiamavano rispettosamente "ghiandole del destino". Secondo i guaritori orientali, queste ghiandole erano ricevitori e trasformatori dell'energia cosmica che scorreva in canali invisibili (chakra) e sosteneva la vitalità umana. Si credeva che il lavoro coordinato delle "ghiandole del destino" potesse essere interrotto da disastri che si verificavano per volere del destino malvagio.
Una menzione di una malattia, molto probabilmente il diabete, è contenuta nei papiri egiziani del 1500 a.C. e.. Il gozzo e gli effetti della castrazione negli animali e nell'uomo appartengono alle prime descrizioni cliniche di malattie, la cui natura endocrina è stata successivamente dimostrata. Vecchie descrizioni cliniche delle malattie endocrine furono fatte non solo in Occidente, ma anche nell'antica Cina e in India.
Se organizziamo nel tempo scoperte significative in molte aree dell'endocrinologia, il quadro risultante riflette in miniatura la storia di tutta la biologia e la medicina. Dopo le frammentarie osservazioni cliniche fatte nell'antichità e nel Medioevo, queste scienze progredirono con estrema lentezza. La seconda metà del XIX secolo vide rapidi progressi in molti settori della medicina, sia nella qualità della ricerca clinica che nella comprensione dei meccanismi delle malattie. Questo processo è dovuto alla complessità dell'interconnessione di ragioni storiche.
In primo luogo, la rivoluzione industriale ha portato all’accumulazione di capitale, che è stato utilizzato per sviluppare molte scienze, principalmente chimica e biologia.
Un'altra rivoluzione avvenuta nella seconda metà del XIX secolo e di fondamentale importanza per lo sviluppo non solo dell'endocrinologia, ma anche della medicina e della biologia, è stata l'avvento della modellistica animale sperimentale. Claude Bernard e Oscar Minkowski hanno dimostrato la possibilità di condurre esperimenti controllati e riproducibili in condizioni di laboratorio. In altre parole, è stata creata l’opportunità di “interrogare” la natura. Senza il lavoro di questi pionieri saremmo privati di gran parte delle nostre attuali conoscenze nel campo dell’endocrinologia. Lo studio di tutte quelle sostanze chiamate ormoni è iniziato con esperimenti su animali interi (e spesso preceduti da osservazioni su persone malate). Queste sostanze erano chiamate sostanza "X" o fattore "?". I postulati di Koch per l'endocrinologia prevedevano il seguente ordine di lavoro:
1. Rimozione della ghiandola sospetta. Dopo la rimozione di una ghiandola endocrina, si verifica un complesso di disturbi dovuti alla perdita degli effetti regolatori degli ormoni prodotti in questa ghiandola. A causa della natura traumatica dell'intervento chirurgico, invece della rimozione chirurgica della ghiandola endocrina, può essere utilizzata l'introduzione di sostanze chimiche che interrompono la loro funzione ormonale. Ad esempio, la somministrazione di alloxan agli animali interrompe la funzione delle cellule β del pancreas, il che porta allo sviluppo del diabete mellito, le cui manifestazioni sono quasi identiche ai disturbi osservati dopo l'asportazione del pancreas. 1
2. Descrizione degli effetti biologici dell'operazione. Ad esempio, l'ipotesi sulla presenza di funzioni endocrine nel pancreas fu confermata negli esperimenti di I. Mering e O. Minkowski (1889), che dimostrarono che la sua rimozione in cani porta a grave iperglicemia e glicosuria; gli animali morirono entro 2-3 settimane. dopo l'intervento chirurgico sullo sfondo di un grave diabete mellito. Successivamente si è scoperto che questi cambiamenti si verificano a causa della mancanza di insulina, un ormone prodotto nell'apparato insulare del pancreas.
3. Introduzione dell'estratto di ghiandola.
4. Prova che la somministrazione dell'estratto elimina i sintomi di assenza della ghiandola.
5. Isolamento, purificazione e identificazione del principio attivo.
Durante la Seconda Guerra Mondiale nel campo dell'endocrinologia si raccolse una grande quantità di dati, molti dei quali furono di fondamentale importanza per il successivo sviluppo della scienza. Dopo la guerra, a causa dell’emergere di molte nuove tecniche, si verificò un’accelerazione senza precedenti nel ritmo della ricerca. E ora, come risultato di un forte afflusso di forze tecniche e creative, il numero di pubblicazioni, sia sull'endocrinologia che su tutti gli altri aspetti della conoscenza biomedica, sta crescendo a una velocità impressionante. Ciò significa una fornitura costante di nuovi dati, che richiede una revisione periodica delle vecchie idee alla loro luce. 2
Il XX secolo è stato segnato dalla nascita della scienza degli ormoni, o endocrinologia. La parola “ormone” stessa fu introdotta nel 1905 dal fisiologo britannico, il professor Ernst Starling, in una conferenza al Royal College of Physicians di Londra. È stato formato da due professori dell’Università di Cambridge dalla parola greca hormao, che significa “mettere rapidamente in moto”, “sollevare” o “eccitare”. Starling lo usò per descrivere i "vettori chimici" rilasciati nel sangue dalle ghiandole endocrine (endon - interno + krino - producono), come i testicoli, le ghiandole surrenali e la tiroide, nonché da quelle esterne, esocrine (eso - ghiandole esterne) ghiandole come le ghiandole salivari e lacrimali. Questa nuova scienza si è sviluppata molto rapidamente, entusiasmando le menti non solo dei medici, ma anche della società.
Di norma, la storia dello studio di qualsiasi ormone attraversa quattro fasi.
Innanzitutto, si osserva l'effetto prodotto sul corpo dalla secrezione secreta dalla ghiandola.
In secondo luogo, vengono sviluppati metodi per determinare le secrezioni interne e il grado della sua influenza sul corpo. Questo viene fatto prima attraverso test biologici per determinare l'effetto dell'ormone su un organismo che ne è carente. Successivamente furono stabiliti metodi chimici per tali misurazioni.
In terzo luogo, l'ormone viene isolato dalla ghiandola e isolato.
E infine, in quarto luogo, la sua struttura è determinata dai chimici e viene sintetizzata. 3
Al giorno d'oggi, i ricercatori che iniziano con osservazioni a livello dell'intero organismo hanno sempre più domande man mano che il loro lavoro procede finché non tentano di risolvere il problema originale a livello molecolare. Qui la ricerca endocrinologica viene gestita direttamente dalla chimica biologica e dalla sua sezione – la biologia molecolare (endocrinologia).
Non appena compaiono nuove tecniche morfologiche, chimiche, elettrofisiologiche, immunologiche e di altro tipo, trovano un'applicazione molto rapida in endocrinologia. Ad esempio, negli anni '30 e '40 venivano utilizzati metodi molto complessi per studiare gli steroidi. Ciò ha portato a grandi progressi nella comprensione della struttura e della biosintesi degli ormoni steroidei. La possibilità di utilizzare isotopi radioattivi, apparsa alla fine degli anni '40 -'50, ha ampliato le nostre conoscenze su molti aspetti del ciclo dello iodio, del metabolismo intermedio, del trasporto di ioni, ecc. Studiare l'attività funzionale della ghiandola endocrina, la sua capacità di catturare da il sangue e accumulare determinati composti. È noto, ad esempio, che la ghiandola tiroidea assorbe attivamente lo iodio, che viene poi utilizzato per la sintesi di tiroxina e triiodotironina. Con l'iperfunzione della ghiandola tiroidea aumenta l'accumulo di iodio, con l'ipofunzione si osserva l'effetto opposto. L'intensità dell'accumulo di iodio può essere determinata introducendo nell'organismo l'isotopo radioattivo 131I, seguito dalla valutazione della radioattività della ghiandola tiroidea. Anche i composti utilizzati per la sintesi di ormoni endogeni e inclusi nella loro struttura possono essere introdotti come marcatore radioattivo. Successivamente è possibile determinare la radioattività di vari organi e tessuti e quindi valutare la distribuzione dell'ormone nel corpo, nonché individuare i suoi organi bersaglio.
Successivamente, una combinazione di elettroforesi su gel di policrilammide e autoradiografia è stata utilizzata in modo creativo per studiare molte proteine, compresi i recettori ormonali. Contemporaneamente a questi impressionanti progressi nella chimica, l'uso di metodi istochimici, immunoistochimici e microscopici elettronici si è rivelato ancora più fruttuoso.
Tutte le varianti della cromatografia - su colonna, su strato sottile, su carta, multidimensionale, gas-liquido (con o senza spettrometria di massa), liquida ad alte prestazioni - furono utilizzate dagli endocrinologi immediatamente dopo la loro introduzione. Hanno permesso di ottenere informazioni importanti non solo sulla sequenza aminoacidica di peptidi e proteine, ma anche sui lipidi (soprattutto prostaglandine e sostanze correlate), carboidrati e ammine.
Con lo sviluppo delle tecniche di ricerca biologica molecolare, gli endocrinologi le utilizzano rapidamente per studiare i meccanismi dell'azione degli ormoni. Attualmente il metodo del DNA ricombinante viene utilizzato non solo per questo scopo, ma anche per la produzione di ormoni proteici. In effetti, è difficile nominare un metodo biochimico o fisiologico che non venga adottato dagli endocrinologi. 4
1.2. Rassegna dei metodi moderni per lo studio del sistema endocrino
Quando si esaminano pazienti con sospetta patologia endocrina, oltre a raccogliere un'anamnesi della malattia, esame e reclami del paziente, vengono utilizzati i seguenti metodi diagnostici: metodi generali di laboratorio (clinici e biochimici), studi ormonali, metodi strumentali, metodi di genetica molecolare.
Nella maggior parte dei casi studio ormonale non ha una chiave, ma un valore verificativo per fare una diagnosi. I test ormonali non vengono affatto utilizzati per diagnosticare una serie di malattie endocrine (diabete insipido e diabete mellito); in alcuni casi, i test ormonali hanno valore diagnostico solo in combinazione con indicatori biochimici (livello di calcio nell'ipertiroidismo).
Uno studio ormonale può rivelare una diminuzione della produzione di un particolare ormone, un aumento e il suo livello normale (Tabella 1). I metodi più comunemente usati per determinare gli ormoni nella pratica clinica sono varie modifiche metodo radioimmune
. Questi metodi si basano sul fatto che l'ormone radiomarcato e l'ormone contenuto nel materiale in esame competono tra loro per legarsi ad anticorpi specifici: quanto più un dato ormone è contenuto nel materiale biologico, tanto meno molecole ormonali marcate si legheranno, poiché costantemente il numero di siti di legame degli ormoni nel campione. Più di 20 anni fa, Berson e Yalow proposero un metodo radioimmunologico per la determinazione dell’insulina.
Questo metodo si basava sull'osservazione che nel sangue periferico dei pazienti diabetici trattati con insulina era presente una proteina (successivamente rivelata essere una globulina) che lega l'insulina marcata con 131I. L'importanza di questi dati e del successivo sviluppo di un test radioimmunologico per la determinazione dell'insulina è sottolineata dall'assegnazione del Premio Nobel a Yalow e Berson.
Subito dopo i primi rapporti di questi ricercatori, altri laboratori hanno sviluppato e descritto metodi corrispondenti per la determinazione di altri ormoni. Questi metodi utilizzano anticorpi o proteine sieriche che legano un ormone o un ligando specifico e trasportano un ormone radiomarcato che compete con l'ormone standard o con l'ormone presente nel campione biologico.
Principio metodo dei radiorecettori
sostanzialmente non è diverso dal test radioimmunologico, solo che l'ormone, invece di legarsi agli anticorpi, si lega a uno specifico recettore ormonale sulla membrana plasmatica o sul citosol. I recettori specifici per la maggior parte degli ormoni polipeptidici si trovano sulla superficie esterna della membrana plasmatica delle cellule, mentre i recettori per gli steroidi biologicamente attivi, così come la tiroxina e la triiodotironina, si trovano nel citosol e nei nuclei. La sensibilità dell'analisi dei radiorecettori è inferiore a quella dei test radioimmunologici e della maggior parte dei metodi biologici nei sistemi in vitro. Per poter interagire con il suo recettore, l’ormone deve avere la conformazione adeguata, cioè essere biologicamente attivo. È possibile che un ormone perda la capacità di legarsi al proprio recettore ma continui a interagire con gli anticorpi nel sistema di dosaggio radioimmunologico. Questa discrepanza riflette il fatto che anticorpi e recettori “riconoscono” diverse parti della molecola dell’ormone.
Sono stati proposti numerosi metodi di radiorecettori per l'analisi ormonale. In genere, si ottiene tessuto da organi specifici per un dato ormone e da esso si isolano i recettori utilizzando tecniche standard. I recettori isolati della membrana plasmatica nei sedimenti sono relativamente stabili se conservati a temperature inferiori a -20°C. Tuttavia, i recettori solubilizzati dei polipeptidi e degli ormoni steroidei, isolati dalle membrane plasmatiche o dal citosol e non associati a ligandi, risultano instabili, il che si manifesta con una diminuzione della loro capacità di legare ormoni specifici, anche se conservati congelati per un tempo relativamente breve.
Recentemente, i metodi non radioattivi sono diventati più diffusi. Come metodo standard per la determinazione di vari composti in chimica clinica, saggio immunologico
, caratterizzato da buona sensibilità, specificità e un'ampia gamma di applicazioni. In particolare, il test immunologico viene utilizzato per determinare gli ormoni. Tali metodi includono:
- 1) test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA), ELISA di tipo ELISA in fase solida o ELISA omogeneo di tipo EMIT.
- 2) immunodosaggio a fluorescenza (FIA), basato sulla misurazione dell'enhancement, del quenching o della polarizzazione della fluorescenza o sullo studio della fluorescenza con risoluzione temporale.
- 3) saggio immunologico bio- o chemiluminescente.
1) essere applicabile sia per l'analisi immunometrica a due siti delle proteine che per saggi competitivi diretti di apteni basati sul principio di legame.
2) avere sensibilità, accuratezza e intervallo di lavoro adeguati delle concentrazioni determinate con una dispersione minima dei risultati sull'intero intervallo.
3) facile da migliorare per aumentare ulteriormente la sensibilità e semplificare l'analisi.
Potenzialmente, la tecnica dovrebbe avere la possibilità di essere migliorata e applicata all'analisi di altre sostanze, alle analisi fuori laboratorio e senza separazione e alla determinazione simultanea di più sostanze (il cosiddetto immunodosaggio multiplo). I metodi ideali di immunodosaggio sono più simili ai metodi luminescenti o a fotoemissione, in cui l'etichetta viene rilevata registrando l'emissione di luce.
La luminescenza è l'emissione di luce da parte di una sostanza in uno stato elettronicamente eccitato. Esistono diversi tipi di luminescenza, che differiscono solo per le fonti di energia che trasferiscono gli elettroni in uno stato eccitato, cioè ad un livello energetico più elevato, vale a dire:
1) Radioluminescenza, in cui l'eccitazione del corrispondente fluoroforo è ottenuta assorbendo l'energia rilasciata durante il processo di decadimento radioattivo irreversibile. Il fluoroforo eccitato emette luce, ritornando allo stato fondamentale.
2) Chemiluminescenza, in cui l'eccitazione si ottiene a seguito di una reazione chimica (solitamente una reazione di ossidazione irreversibile). Se una reazione chimica viene effettuata in sistemi biologici sotto l'azione di enzimi, in questo caso viene solitamente utilizzato il termine bioluminescenza. Se una reazione chimica viene avviata da un aumento della temperatura dei reagenti, allora questo tipo di luminescenza si chiama termochemiluminescenza, ma se la reazione viene avviata da un potenziale elettrico, il fenomeno corrispondente si chiama elettrochemiluminescenza.
3) Fotoluminescenza, in cui l'eccitazione è causata da fotoni di luce infrarossa, visibile o ultravioletta. La fotoluminescenza può essere ulteriormente suddivisa in fluorescenza, dove la molecola eccitata ritorna rapidamente al suo stato originale attraverso uno stato di singoletto, e fosforescenza, dove la molecola eccitata ritorna al suo stato originale attraverso uno stato di tripletto. L'emissione di fosforescenza decade molto più lentamente. I quanti di luce emessi hanno una lunga lunghezza d'onda. La fotoluminescenza differisce dalla radio e dalla chemiluminescenza in quanto è solitamente reversibile e quindi può essere indotta ripetutamente in un dato sistema (poiché la formazione di un intermedio eccitato e la sua successiva inattivazione mediante emissione di luce non porta a trasformazioni chimiche).
Oltre a questi metodi, i metodi chimici per la determinazione di numerose sostanze (solitamente metaboliti di ormoni e loro precursori) non hanno perso del tutto la loro importanza. Sono spesso utilizzati per purificare le frazioni proteiche e studiare gli ormoni. cromatografia . La cromatografia liquida è ampiamente utilizzata come metodo analitico rapido e selettivo per la separazione e l'identificazione di varie sostanze. La cromatografia liquida (LC) nella sua versione classica (a pressione atmosferica) e ad alta velocità o HPLC a pressione elevata è il metodo ottimale per analizzare molecole chimicamente e termicamente instabili, sostanze ad alto peso molecolare con volatilità ridotta, il che si spiega con il ruolo speciale della fase mobile: a differenza dell'eluente gassoso nella chimica liquida non svolge solo una funzione di trasporto. La natura e la struttura dei componenti della fase mobile controllano il comportamento cromatografico delle sostanze separate. Tra gli oggetti più tipici della cromatografia liquida ci sono proteine, acidi nucleici, amminoacidi, coloranti, polisaccaridi, esplosivi, farmaci, metaboliti vegetali e animali. La cromatografia liquida, a sua volta, si divide in adsorbimento liquido (la separazione dei composti avviene a causa della loro diversa capacità di essere adsorbiti e desorbiti dalla superficie dell'adsorbente), liquido-liquido o distribuzione (la separazione viene effettuata a causa della diversa solubilità nella fase mobile - fase eluente e fase stazionaria, adsorbite fisicamente o innestate chimicamente sulla superficie di un adsorbente solido), cromatografia a scambio ionico, dove la separazione è ottenuta attraverso l'interazione reversibile delle sostanze ionizzanti analizzate con i gruppi ionici dell'adsorbente - ione scambiatore. Un posto speciale nell'uso dei metodi di cromatografia liquida in medicina è occupato dalla cromatografia ad esclusione dimensionale o su gel e dalla cromatografia di affinità o biospecifica. Questa versione di LC si basa sul principio di separare una miscela di sostanze in base al loro peso molecolare. Nella cromatografia ad esclusione (dall'esclusione inglese - eccezione; nome obsoleto - setaccio), le molecole di sostanze sono separate per dimensione a causa della loro diversa capacità di penetrare nei pori dell'assorbente. La fase mobile è un liquido e la fase stazionaria è lo stesso liquido che ha riempito i pori dell'assorbente (gel). Se questi pori sono inaccessibili alle molecole dell'analita, il composto corrispondente lascerà la colonna prima di quello con dimensioni molecolari inferiori. Le molecole o gli ioni le cui dimensioni sono comprese tra il diametro massimo e minimo dei pori del gel sono divisi in zone separate. La cromatografia ad esclusione dimensionale ha ricevuto uno sviluppo particolarmente intenso negli ultimi due decenni, facilitato dall'introduzione nella pratica chimica e biochimica del Sephadex - gel di destrano reticolato con epicloridrina. Su vari tipi di Sephadex, le sostanze chimiche con diversi pesi molecolari possono essere frazionate, quindi sono ampiamente utilizzate per l'isolamento e la purificazione di biopolimeri, peptidi, oligo e polisaccaridi, acidi nucleici e persino cellule (linfociti, eritrociti), nella produzione industriale di vari preparati proteici, in particolare enzimi e ormoni. 5 La cromatografia di affinità è caratterizzata dalla selettività estremamente elevata inerente alle interazioni biologiche. Spesso, una procedura cromatografica può purificare la proteina desiderata migliaia di volte. Ciò giustifica lo sforzo richiesto per preparare un assorbente per affinità, compito non sempre facile a causa del rischio che le molecole biologiche perdano la capacità di interagire specificamente durante il loro attacco covalente alla matrice. 6
Quando si studia lo stato funzionale delle ghiandole endocrine, vengono utilizzati i seguenti approcci metodologici:
1. Determinazione del livello iniziale di un particolare ormone.
2. Determinazione del livello ormonale nel tempo, tenendo conto del ritmo circadiano della secrezione.
3. Determinazione del livello ormonale nelle condizioni di un test funzionale.
4. Determinazione del livello del metabolita dell'ormone.
Tabella 1. Patogenesi delle malattie endocrine 7
Molto spesso nella pratica clinica viene utilizzata la determinazione del livello basale di un particolare ormone. Il sangue viene solitamente prelevato al mattino a stomaco vuoto, sebbene l'assunzione di cibo non influisca sulla produzione di molti ormoni. Per valutare l'attività di molte ghiandole endocrine (tiroide, paratiroidi), è sufficiente valutare il livello basale degli ormoni. Quando si determina il livello basale di un ormone, possono sorgere alcune difficoltà a causa della circolazione nel sangue di diverse forme molecolari dello stesso ormone. Prima di tutto, questo riguarda l'ormone paratiroideo.
La maggior parte degli ormoni circolano nel sangue legati alle proteine trasportatrici. Di norma, il livello dell'ormone libero e biologicamente attivo nel sangue è decine o centinaia di volte inferiore al livello totale dell'ormone.
I livelli della maggior parte degli ormoni hanno una caratteristica dinamica quotidiana (ritmo circadiano di secrezione) e molto spesso questa dinamica acquisisce un significato clinico. La più importante ed illustrativa a questo riguardo è la dinamica della produzione di cortisolo (Fig. 1.1). 8
Altri esempi in questo senso sono la prolattina e l’ormone della crescita, il cui ritmo di secrezione è determinato anche dal ciclo sonno-veglia. La patogenesi di numerose malattie endocrine si basa su un'interruzione del ritmo circadiano della produzione ormonale.
Oltre al ritmo circadiano, la maggior parte dei parametri biologici può riflettersi nel livello dell’ormone nel sangue. Per molti ormoni i valori di riferimento dipendono in gran parte dall'età (Fig. 1.2)9, dal sesso e dalla fase del ciclo mestruale.
Il livello di numerosi ormoni può essere influenzato non solo da malattie somatiche concomitanti e dai farmaci assunti per curarle, ma anche da fattori quali stress (cortisolo, adrenalina), caratteristiche ambientali (livelli di tiroxina in regioni con diverso consumo di iodio) e il livello di composizione del cibo assunto il giorno prima (C-peptide) e molti altri.
Il principio fondamentale per valutare l'attività delle ghiandole ipofisi (tiroide, corteccia surrenale, gonadi) e di numerose altre ghiandole endocrine è la determinazione delle cosiddette coppie diagnostiche di ormoni. Nella maggior parte dei casi, la produzione ormonale è regolata da un meccanismo di feedback negativo. Il feedback può verificarsi tra ormoni appartenenti allo stesso sistema (cortisolo e ACTH), oppure tra gli ormoni e il suo effettore biologico (ormone paratiroideo e calcio). Inoltre, non deve esserci un'interazione diretta tra gli ormoni che compongono la coppia. Talvolta è mediata da altri fattori umorali, elettrolitici e parametri fisiologici (volume del flusso sanguigno renale, livello di potassio e angiotensina per la coppia renina-aldosterone). Una valutazione isolata degli indicatori che compongono una coppia può portare a una conclusione errata.
Nonostante il miglioramento dei metodi di analisi ormonale, i test funzionali hanno ancora un grande valore diagnostico nella diagnosi delle endocrinopatie. I test funzionali si dividono in stimolativi e soppressivi (soppressivi). Il principio generale dei test è che i test di stimolazione sono prescritti per sospetta insufficienza della ghiandola endocrina e test soppressivi sono prescritti per sospetta iperfunzione.
Oltre a valutare il livello degli ormoni nel sangue, in alcuni casi la determinazione della loro escrezione nelle urine può avere un certo valore diagnostico. Il valore diagnostico di questi studi, che determinano ad esempio l'escrezione del cortisolo libero, è significativamente inferiore a quello dei moderni test funzionali. Allo stesso modo, l'uso della determinazione dell'escrezione dei metaboliti ormonali è ormai quasi completamente cessato, con l'unica eccezione della determinazione del livello dei metaboliti delle catecolamine per la diagnosi del feocromocitoma.
Negli ultimi anni si sono diffusi metodi completamente automatizzati di ricerca ormonale, che riducono il numero di errori come prelievo, conservazione, consegna del sangue errati e altri “fattori umani”.
Da metodi strumentali Gli studi utilizzano più comunemente gli ultrasuoni (US), la radiografia, la tomografia computerizzata (CT) e la risonanza magnetica (MRI). Inoltre, in endocrinologia vengono utilizzati metodi speciali: angiografia con campionamento selettivo del sangue che scorre dalla ghiandola endocrina, studio dei radioisotopi (scintigrafia tiroidea), densitometria ossea. I principali metodi strumentali utilizzati per lo studio delle ghiandole endocrine sono presentati nella Tabella 2.
Metodi di ricerca genetica molecolare.
Il rapido sviluppo della scienza negli ultimi decenni e la ricerca nel campo della biologia molecolare, della genetica medica, della biochimica, della biofisica, strettamente intrecciati con la microbiologia, l'immunologia, l'oncologia, l'epidemiologia, ecc., hanno portato alla creazione e all'implementazione attiva di metodi molecolari metodi di laboratori diagnostici biologici per la ricerca sul genoma di esseri umani, animali, piante, batteri e virus. Questi metodi sono spesso chiamati ricerca sul DNA.
I metodi di ricerca del DNA consentono una diagnosi precoce e più completa di varie malattie, una diagnosi differenziale tempestiva e il monitoraggio dell'efficacia della terapia. Lo sviluppo attivo dei metodi diagnostici del DNA e la loro introduzione nella pratica suggerisce che non è lontano il momento in cui questi metodi restringeranno significativamente la portata dei compiti degli studi diagnostici più tradizionali, come i metodi citogenetici, e forse li sposteranno dalla medicina pratica alla medicina pratica. la sfera scientifica.
Tabella 2. Metodi strumentali di base
ricerca sulle ghiandole endocrine 10
Attualmente esistono due aree della diagnostica del DNA: l'analisi dell'ibridazione degli acidi nucleici e la diagnostica mediante la reazione a catena della polimerasi.
La PCR è stata immediatamente introdotta nella pratica, il che ha permesso di elevare la diagnostica medica a un livello qualitativamente nuovo. Il metodo è diventato così popolare che oggi è difficile immaginare di lavorare nel campo della biologia molecolare senza il suo utilizzo. Il metodo PCR ha avuto uno sviluppo particolarmente rapido grazie al programma internazionale Genoma Umano. Sono state create moderne tecnologie di sequenziamento (decifrazione di sequenze nucleotidiche del DNA). Se nel recente passato ci voleva una settimana per decifrare il DNA di 250 coppie di nucleotidi (bp), i moderni sequenziatori automatici possono determinare fino a 5000 bp. al giorno. Ciò, a sua volta, contribuisce alla crescita significativa dei database contenenti informazioni sulle sequenze nucleotidiche nel DNA. Attualmente sono state proposte varie modifiche della PCR, sono state descritte dozzine di diverse applicazioni del metodo, inclusa la “long-PCR”, che consente di copiare sequenze di DNA ultra lunghe. Per la scoperta della PCR, K. W. Mullis è stato insignito del Premio Nobel per la Chimica nel 1993.
Tutti gli approcci alla diagnostica genetica possono essere suddivisi in diversi gruppi principali:
1. Metodi per identificare sezioni specifiche del DNA.
2. Metodi per determinare la sequenza primaria dei nucleotidi nel DNA.
3. Metodi per determinare il contenuto di DNA e analisi del ciclo cellulare. undici
La PCR consente di trovare nel materiale in studio una piccola sezione di informazioni genetiche contenute in una sequenza specifica di nucleotidi del DNA di qualsiasi organismo tra un numero enorme di altre sezioni di DNA e moltiplicarla molte volte. La PCR è un analogo “in vitro” della reazione biochimica della sintesi del DNA in una cellula.
La PCR è un processo ciclico, in ogni ciclo del quale avviene la denaturazione termica del doppio filamento del DNA bersaglio, la successiva aggiunta di primer oligonucleotidici corti e la loro estensione utilizzando la DNA polimerasi aggiungendo nucleotidi. Di conseguenza, si accumula un gran numero di copie del DNA bersaglio originale, che vengono facilmente rilevate.
La scoperta della PCR ha portato all’immediato utilizzo pratico del metodo. Nel 1985 è stato pubblicato un articolo che descriveva un sistema di test basato sulla PCR per diagnosticare l'anemia falciforme. Dal 1986. Ad oggi sono state dedicate alla PCR più di 10.000 pubblicazioni scientifiche. Le prospettive per l'utilizzo della PCR sembrano più che impressionanti. 12
Metodi di ricerca citochimica.
Questi metodi sono varianti degli studi biologici in vitro descritti. Di solito hanno una sensibilità maggiore rispetto ai metodi radioimmunologici, ma sono molto più ingombranti e costosi per la determinazione. I risultati degli studi biologici citochimici vengono valutati quantitativamente su sezioni istologiche utilizzando un dispositivo speciale: un microdensitometro.
Le sezioni istologiche vengono preparate da tessuti ormone-specifici o cellule bersaglio che sono state precedentemente esposte a diverse concentrazioni dell'ormone standard e di prova. Utilizzando un densitometro, viene scansionata un'area con un diametro di 250 - 300 nm per quantificare la reazione cromatica causata da un cambiamento nello stato redox dell'oggetto sotto l'influenza della stimolazione ormonale. Per l'analisi quantitativa vengono utilizzati coloranti istologici sensibili a questi cambiamenti.
Il primo sistema di analisi biologica citochimica è stato sviluppato per l'ACTH e il tessuto bersaglio in questo sistema era la corteccia surrenale. Altri metodi per la determinazione biologica dell'ACTH sono troppo insensibili o richiedono grandi volumi di plasma. Pertanto, la determinazione citochimica dello stato redox del tessuto è un mezzo prezioso per analizzare la funzione normale e alterata del sistema ipotalamo-ipofisi-surrene in base ai livelli di ACTH.
È stato sviluppato un metodo citochimico per la determinazione dell'LH, ma sono state incontrate notevoli difficoltà associate a fluttuazioni significative nei risultati di diverse determinazioni e alla sensibilità variabile dell'oggetto, che può riflettere differenze biologiche note nei diversi animali. Sono stati proposti metodi citochimici specifici e sensibili per la determinazione dell'ormone paratiroideo, dell'ADH e della tireotropina.
Con l'ulteriore sofisticazione delle apparecchiature, che aumenterà il numero di studi in una determinazione, questo metodo potrebbe trovare un'applicazione più ampia. È particolarmente interessante perché non richiede l'uso di composti radioattivi. I metodi citochimici non sono ampiamente utilizzati in clinica e vengono utilizzati principalmente come metodo sensibile nella ricerca scientifica. 13
1.3. Metodi moderni per studiare il sistema endocrino usando l'esempio dello studio della ghiandola tiroidea
Nel mio lavoro, di portata limitata, prenderò in considerazione i metodi moderni di studio del sistema endocrino in condizioni normali e patologiche usando l'esempio dello studio della ghiandola endocrina, che è rilevante a causa dell'elevata prevalenza delle malattie della tiroide nella Repubblica del Bashkortostan.
1. Esame ecografico.
L'ecografia consente di verificare dati di palpazione piuttosto soggettivi. I sensori con una frequenza di 7,5 MHz e 10 MHz sono ottimali per la ricerca. Attualmente viene utilizzata la mappatura color Doppler, che consente la visualizzazione di piccoli vasi nella ghiandola tiroidea e fornisce informazioni sulla direzione e la velocità media del flusso. Le capacità del metodo dipendono dall'esperienza e dalle qualifiche dello specialista che conduce la ricerca. Il principio del metodo è che gli ultrasuoni, inviati con impulsi frequenti, penetrano negli organi umani, si riflettono nell'interfaccia tra mezzi con diversa resistenza ultrasonica, vengono percepiti dal dispositivo e riprodotti sullo schermo e sulla carta ultravioletta. Il metodo è innocuo e non presenta controindicazioni (Fig. 1.3).
Fig.1.3. Ecografia della tiroide.
Esami ecografici complessi utilizzando Mappatura color Doppler (CDC), (Fig. 1.4). 14
Riso. 1.4. AIT con formazione di noduli tiroidei in modalità CD.
2. Biopsia con ago sottile della ghiandola tiroidea.
La biopsia con ago sottile della ghiandola tiroidea è l'unico metodo preoperatorio per valutare direttamente i cambiamenti strutturali e stabilire i parametri citologici delle formazioni nella ghiandola tiroidea. L'efficienza nell'ottenimento di materiale citologico adeguato durante la biopsia con ago sottile aumenta significativamente se questa procedura diagnostica viene eseguita sotto controllo ecografico, che consente di identificare le aree più alterate della ghiandola tiroidea, nonché di selezionare la direzione e la profondità ottimali della foratura. 15
3. Esame citologico.
La diagnosi citologica delle formazioni nella ghiandola tiroidea si basa su una serie di alcune caratteristiche, come la quantità di materiale ottenuto, la sua composizione cellulare, le caratteristiche morfologiche delle cellule e i loro gruppi strutturali, la qualità dello striscio, ecc.
4. Studio dei radioisotopi (scansione), scintigrafia.
La scansione dei radioisotopi (scansione) è un metodo per ottenere un'immagine bidimensionale che riflette la distribuzione di un radiofarmaco in vari organi utilizzando uno scanner.
Fig.1.6. Risultato della scansione del radioisotopo
ghiandola tiroidea
La scansione consente di determinare la dimensione della ghiandola tiroidea, l'intensità dell'accumulo di iodio radioattivo in essa e nelle sue singole aree, che consente di valutare lo stato funzionale sia dell'intera ghiandola che delle formazioni focali (Fig. 1.6).
Scintigrafia- un metodo di imaging funzionale, che consiste nell'introdurre nel corpoisotopi radioattivie ottenere un'immagine determinando l'emesso radiazione . Il paziente viene dato indicatore radiofonico - un farmaco costituito da una molecola vettore e un marcatore radioattivo. La molecola vettore viene assorbita da una determinata struttura del corpo (organo, liquido). L'etichetta radioattiva funge da “trasmettitore”: emette raggi gamma, che vengono registrati da una gamma camera. La quantità di radiofarmaco somministrato è tale che la radiazione emessa viene facilmente catturata, ma non ha un effetto tossico sull'organismo.
Per la scintigrafia tiroidea, l’isotopo del tecnezio più comunemente utilizzato è il 99m Tc-pertecnetato. L'uso dello iodio 131 è limitato all'identificazione delle metastasi funzionanti del cancro alla tiroide. Per diagnosticare il gozzo retrosternale e aberrante, nonché in alcuni casi l'ipotiroidismo congenito (aterosi, distopia, difetto di organizzazione), viene utilizzato lo iodio 123. 16
5. Determinazione dei livelli di TSH e di ormone tiroideo.
Lo studio del livello del TSH e degli ormoni tiroidei (tiroxina libera e triiodotironina) è indicato per tutti coloro che sospettano una patologia tiroidea. Attualmente è più opportuno studiare le frazioni libere degli ormoni tiroidei in combinazione con la determinazione del livello di TSH.
6. Determinazione del livello di tireoglobulina nel sangue.
Un aumento del contenuto di tireoglobulina nel sangue è caratteristico di molte malattie della tiroide; viene rilevato entro 2-3 settimane dopo una biopsia puntura, nonché entro 1-2 mesi dopo l'intervento chirurgico sulla ghiandola tiroidea.
7. Determinazione del livello di calcitonina nel sangue.
Nei pazienti con una storia familiare di cancro midollare della tiroide (sindrome da neoplasie endocrine multiple di tipo 2 e 3), deve essere determinato il livello di calcitonina nel sangue. In tutti gli altri casi la determinazione della calcitonina non è indicata.
Il livello normale di calcitonina nel sangue non supera i 10 pg/ml e il livello di questo marcatore, superiore a 200 pg/ml, costituisce il criterio diagnostico più importante per il cancro midollare della tiroide.
8. Test di funzionalità tiroidea.
I test di funzionalità tiroidea sono esami del sangue utilizzati per valutare l’efficacia del funzionamento della ghiandola tiroidea. Questi test includono il test dell'ormone stimolante la tiroide (TSH), il test della tiroxina (T4), il test della triiodotironina (T3), il test della globulina legante la tiroxina (TBG), il test del catrame della triiodotironina (T3RU) e il test dello stimolante tiroideo a lungo termine (LATS). .
I test di funzionalità tiroidea vengono utilizzati per:
- aiuto nella diagnosi di una ghiandola tiroidea ipoattiva (ipotiroidismo) e di una ghiandola tiroidea iperattiva (ipertiroidismo)
valutazione dell’attività tiroidea
monitorare la risposta alla terapia tiroidea
Il TSH dice alla ghiandola tiroidea di rilasciare gli ormoni tiroxina (T4) e triiodotironina (T3). Prima di utilizzare i test del TSH, venivano utilizzati esami del sangue standard che misuravano i livelli di T4 e T3 per determinare se la ghiandola tiroidea funzionava correttamente. Il test della triiodotironina (T3) misura la quantità di questo ormone nel sangue. Il T3 è solitamente presente in quantità molto piccole ma ha un effetto significativo sul metabolismo. È un componente attivo degli ormoni tiroidei.
Test della globulina legante la tiroxina (TBG). testa i livelli ematici di questa sostanza, prodotta nel fegato. La GTD si lega a T3 e T4, impedendo agli ormoni di essere eliminati dal sangue dai reni e rilasciandoli quando e dove sono necessari per regolare le funzioni del corpo.
Test di assorbimento del catrame della triiodotironina (T3RU) misura i livelli di T4 nel sangue. L'analisi di laboratorio di questo test richiede diversi giorni e viene utilizzata meno frequentemente rispetto ai test i cui risultati sono disponibili più rapidamente.
Test dello stimolatore tiroideo a lunga durata d'azione (LATS) indica se il sangue contiene uno stimolante tiroideo ad azione prolungata. Se presente in modo anomalo nel sangue, la LATS induce la tiroide a produrre e rilasciare quantità anormalmente elevate di ormoni.
9. Computer, risonanza magnetica, tomografia ottica a trasmissione.
La TC e la risonanza magnetica sono metodi non invasivi altamente informativi che visualizzano la ghiandola tiroidea. Tuttavia, questi studi vengono attualmente eseguiti piuttosto raramente a causa dei costi elevati e della scarsa disponibilità di attrezzature adeguate. Oltre a valutare la localizzazione della ghiandola tiroidea, i suoi contorni, forma, dimensione, struttura, relazione con i tessuti adiacenti, dimensione e struttura dei linfonodi regionali, la TC consente di determinare la densità densitometrica delle formazioni nella ghiandola tiroidea. Sia la TC che la RM sono i metodi di scelta nella diagnosi del gozzo retrosternale. La tomografia computerizzata (TC) è un metodo di esame a raggi X basato sull'assorbimento ineguale della radiazione a raggi X da parte di vari tessuti del corpo, utilizzato principalmente nella diagnosi di patologie della tiroide, dell'area addominale (fegato, cistifellea, pancreas, reni, ghiandole surrenali, ecc.)
La tomografia computerizzata consente di ottenere informazioni sulla configurazione, dimensione, posizione ed estensione di qualsiasi formazione, poiché questo metodo differenzia i tessuti duri e molli in base alla densità.
La risonanza magnetica (MRI) è un metodo diagnostico strumentale utilizzato in endocrinologia per valutare le condizioni del sistema ipotalamo-ipofisi-surrene, dello scheletro, degli organi addominali e pelvici.
La risonanza magnetica consente di ottenere informazioni sulla configurazione delle ossa, dimensione, posizione ed estensione di qualsiasi formazione, poiché questo metodo differenzia i tessuti duri e molli in base alla densità.
La RM, negli ultimi anni, ha acquisito sempre più importanza nella diagnosi della patologia della regione ipotalamo-ipofisaria e sta diventando la metodica di scelta nell'esame di pazienti con sospette lesioni in questa particolare area (Fig. 1.7).
Fig.1.7. Preparazione per una risonanza magnetica.
Durante la risonanza magnetica, un lettino mobile con il paziente si muove attraverso un “tunnel” che genera un campo elettromagnetico, che a sua volta crea radiazioni che consentono di ottenere un'immagine tridimensionale della struttura interna del corpo.
Malattie diagnosticate mediante risonanza magnetica:
- ? tumori ipofisari (esprolattinoma
, malattia di Itsenko-Cushing)
- ? masse surrenaliche (p. es., sindrome di Cushing, aldosteroma, feocromocitoma)
- ? osteoporosi
- ? e così via.
- ? permette di ottenere sezioni di spessore 2-3 mm su qualsiasi piano
- ? la capacità di giudicare dalla natura del segnale non solo la presenza di una formazione, ma anche la sua struttura interna (emorragie, cisti, ecc.)
- ? assenza di esposizione alle radiazioni ionizzanti sul paziente e innocuità quasi completa, che è importante quando si esaminano i bambini, nonché, se necessario, ripetuti esami ripetuti.
Riso. 1.8. Il sistema CTLM è uno dei primi tomografi ottici seriali al mondo.
10. Studio immunoistochimico del tessuto tumorale tiroideo.
Vengono eseguiti nel tessuto dei tumori tiroidei ottenuti a seguito di un intervento chirurgico. Lo scopo principale di questo studio è prognostico. Nel tessuto tiroideo viene determinata la presenza di sostanze come p53 (gene soppressore della crescita tumorale), CD44, Met (proteoglicani responsabili delle metastasi), PTC, ras-oncogeni (oncogeni che regolano la progressione del tumore) e altri. La cosa più importante nella pratica clinica è la rilevazione dell’immunoreattività p53, Met e PTC nel tessuto tumorale della tiroide. La presenza di questi marcatori nel tessuto tumorale è un segno di rapido sviluppo (entro 2-5 mesi) della malattia metastatica nel paziente operato. Lo studio è costoso e richiede attrezzature di laboratorio speciali. Attualmente, la determinazione dei marcatori tumorali viene effettuata principalmente in cliniche oncologiche specializzate per determinate indicazioni, vale a dire se il paziente presenta altri segni prognostici di recidiva del tumore o sviluppo di malattia metastatica (cancro della tiroide scarsamente differenziato, età del paziente superiore a 55 anni, invasione dei tessuti circostanti dal tumore, ecc.). 18
11. Metodi immunologici.
I metodi immunologici comprendono principalmente il test immunoassorbente legato all'enzima (ELISA). L'ELISA è un metodo per la rilevazione di antigeni o anticorpi, basato sulla determinazione del complesso antigene-anticorpo dovuto a:
- fissazione preliminare dell'antigene o dell'anticorpo sul substrato;
aggiungere il campione di analisi e legare l'antigene o l'anticorpo fisso all'antigene bersaglio o all'anticorpo bersaglio;
successiva aggiunta di un antigene o anticorpo marcato con un marcatore enzimatico con sua rilevazione mediante un apposito substrato che cambia colore sotto l'azione dell'enzima. Un cambiamento nel colore della miscela di reazione indica la presenza di una molecola bersaglio nel campione.La determinazione dei prodotti delle reazioni enzimatiche durante lo studio dei campioni di prova viene effettuata rispetto ai campioni di controllo.
Studio dei livelli di anticorpi antitiroidei – metodo immunochemiluminescente. È stata studiata la prevalenza degli anticorpi contro gli antigeni del tessuto tiroideo: tireoglobulina, perossidasi tiroidea e recettore del TSH in pazienti con gozzo tossico diffuso e oftalmopatia endocrina. All'esame, tali pazienti presentano un elevato livello di anticorpi contro il recettore del TSH, che diminuisce con la terapia tireostatica. 20 È stato dimostrato che la determinazione degli anticorpi contro il recettore del TSH e la tireoglobulina dovrebbe servire come criterio diagnostico aggiuntivo durante l'esame. 21
Metodi per determinare gli anticorpi contro il recettore del TSH:
1. Definizione di TBII
1.1. Metodo dei radiorecettori
1.1.1. Utilizzo dell'rTSH suino (TRAK)
1.1.2. Utilizzando rTSH umano espresso da cellule CHO (CHO-R)
1.1.3. Utilizzando rTSH espresso in cellule leucemiche (K562)
1.2. FACS
1.3. Immunoprecipitazione
2. Metodi biologici per la determinazione degli anticorpi stimolanti (TSAb) e bloccanti (TBAb).
2.1. Valutazione della produzione di cAMP (determinata utilizzando RIA)
2.1.1. nelle cellule FRTL-5
eccetera.................
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