Diagnosi e test dell'infezione da HIV. Negli Stati Uniti vengono utilizzati numerosi test che consentono di identificare le persone affette da HIV con un grado sufficiente di affidabilità.Diagnosi primaria di laboratorio dell'infezione da HIV

La diagnosi dell'HIV è uno dei compiti principali che devono affrontare i lavoratori della clinica di dermatovenerologia, nonché il personale della clinica.

La malattia è definita dai medici molto insidiosa. È caratterizzato da un decorso cronico e non può essere completamente trattato. È importante rilevarlo tempestivamente per prenderne il controllo e prevenirne la diffusione incontrollata. Quali sono le caratteristiche del virus dell'immunodeficienza umana e come si può contrarre l'infezione, sono spesso domande ai pazienti.

Quali sono i metodi per diagnosticare la malattia e quali segni suggeriscono l’infezione?

Oggi ovunque si sente parlare della pericolosità dell'infezione da HIV. Tuttavia, poche persone spiegano quale sia questo pericolo. Di conseguenza, i pazienti dispongono di un insieme di informazioni incompleto e, di conseguenza, non prendono sul serio la minaccia. Ma l’HIV è estremamente pericoloso. È classificata come una malattia virale lentamente progressiva che tende ad essere cronica. Il sistema immunitario è colpito principalmente da questa patologia.

I medici attirano l'attenzione dei pazienti sul fatto che la morte non avviene a causa del virus dell'immunodeficienza in quanto tale.

Una persona muore per infezioni concomitanti, dalle quali l'organismo non è più in grado di fornire una protezione completa. Inoltre, la causa della morte sono i tumori cancerosi, che il sistema immunitario ridotto non è in grado di combattere.

In effetti, il meccanismo attraverso il quale l’infezione da HIV colpisce il sistema immunitario è piuttosto complesso. Come notano i medici, i pazienti non hanno bisogno di capirlo a fondo. Basta sapere che la malattia può ridurre il livello di immunità a livelli critici. Di conseguenza, il corpo non sarà in grado di proteggersi da varie influenze esterne, che prima o poi porteranno alla morte.

Come avviene l'infezione?

È importante capire che oggi l’infezione da HIV è circondata da un gran numero di miti diversi.

I pazienti sono molto poco informati su quando possono contrarre l’infezione e su quando la loro salute non è in pericolo.

La prima cosa da ricordare è che l’HIV è molto instabile nell’ambiente. Ciò significa che il microrganismo patogeno è in grado di vivere pienamente e per lungo tempo solo nel corpo umano. Non tollera il calore superiore a 50 gradi (muore all'istante). Inoltre non è in grado di resistere ai processi di essiccazione. Non tutti i fluidi corporei contengono abbastanza virus perché si verifichi l’infezione.

Il pericolo maggiore è rappresentato da:

• sangue;
• pre-cum;
• sperma;
• secrezione dalla vagina femminile;
• linfa;
• latte materno.

Se qualcuno di questi liquidi entra in contatto con le mucose che presentano microtraumi, o con la pelle colpita da un trauma, si verifica un'infezione.

È anche possibile se il fluido estraneo entra direttamente nel flusso sanguigno. La saliva e le lacrime, contrariamente alla credenza popolare, non rappresentano una minaccia. A causa delle caratteristiche del virus e del suo basso tasso di sopravvivenza, si trasmette in diversi modi:

• tratto sessuale, ad es. durante i rapporti sessuali non protetti, che comportano inevitabilmente il contatto di fluidi biologici e mucose del corpo sensibili all'agente patogeno;
• via parenterale, ad es. trasmissione del virus attraverso trasfusioni di sangue o dovuta all'uso di apparecchiature non sterili per scopi medici;
• percorso verticale, ad es. da madre a figlio (oggi, se una donna assume la terapia antiretrovirale e rifiuta l'allattamento al seno, la probabilità di infezione del bambino durante il parto è ridotta al minimo).

È importante capire che mentre per l'infezione attraverso la pelle sono necessari microtraumi o ferite aperte, questa non è una condizione necessaria per l'infezione attraverso la mucosa. La differenza è spiegata dal fatto che le mucose e la pelle del corpo umano hanno strutture completamente diverse. Questa differenza deve essere presa in considerazione.

Quali sono i segnali per sospettare l’HIV?

Molti pazienti sono interessati alla domanda su quali segni possano essere utilizzati solitamente per sospettare un'infezione da virus dell'immunodeficienza umana.

• un aumento irragionevole della temperatura sistemica, che non può essere spiegato da nessun'altra infezione e che persiste per lungo tempo, nonostante le misure adottate per il trattamento;
• un forte aumento delle dimensioni dei linfonodi (sono colpiti principalmente i linfonodi nella zona inguinale, ma è possibile il loro coinvolgimento in tutto il corpo);

• grave perdita di peso corporeo, che non può essere spiegata da diete, stress, squilibri ormonali e altri motivi;
• denunce di disturbi delle feci che perseguitano il paziente da molto tempo e non è possibile trovare il motivo per cui sono comparsi;
• una tendenza pronunciata per qualsiasi malattia infettiva a trasformarsi in forme croniche, e la natura dell'agente patogeno non è particolarmente importante; sia le patologie batteriche che quelle virali diventano croniche;
• Si sviluppano malattie provocate dalla microflora opportunistica, che non rappresentano una minaccia per una persona la cui immunità è pienamente funzionante (ad esempio micoplasmosi, ureaplasmosi, candidosi, ecc.).

La clinica per l'HIV è molto aspecifica, come notano i medici. Per questo motivo spesso ci sono difficoltà nel fare una diagnosi. Molti pazienti ignorano completamente i sintomi allarmanti, preferendo non cercare aiuto medico. Anche se la malattia incide notevolmente sul loro benessere generale.

È importante capire che l'infezione da HIV potrebbe non farsi sentire per molto tempo. E quando compaiono i primi segni, una persona potrebbe anche non associarli alla possibilità di infezione e tentare di farsi curare a casa.

Metodi diagnostici

La diagnostica di laboratorio dell'HIV è stata sviluppata da molto tempo e viene utilizzata con successo per diagnosticare questa pericolosa malattia.

La malattia non può essere identificata solo dai sintomi. Pertanto, la conferma della diagnosi basata su tecniche di laboratorio gioca spesso un ruolo decisivo.

Esistono vari metodi per diagnosticare l’HIV. In Russia, prima di tutto, viene data preferenza all'immunoblotting e alle reazioni ELISA. Questi metodi vengono spesso utilizzati come metodi di screening, ad esempio durante il controllo del personale medico.

Sistemi ELISA

I pazienti spesso chiedono ai loro medici quale metodo avviare una ricerca diagnostica se sospettano un'infezione da virus dell'immunodeficienza umana.

Qualsiasi medico competente dirà che la preferenza dovrebbe essere data al test immunoenzimatico. È questa tecnica la prima fase diagnostica in Russia.

Il principio di funzionamento dell'ELISA è semplice. In laboratorio, i medici hanno creato proteine ​​speciali. Sono in grado di rilevare e interagire con gli anticorpi prodotti dall'organismo in risposta al contatto con l'HIV. Quindi al sistema viene aggiunto uno speciale enzima indicatore, che cambia colore. Nella fase finale, il materiale viene elaborato utilizzando un apparecchio speciale e il medico riceve il risultato finale.

ELISA è molto popolare.

Innanzitutto perché i risultati si possono ottenere anche se non sono trascorse più di poche settimane dall'introduzione dell'agente patogeno nell'organismo.

È importante capire che il test immunoenzimatico non rileva il virus stesso nel sangue, ma gli anticorpi contro di esso.

Molte persone potrebbero iniziare a produrli dopo due settimane, il che può causare risultati fuorvianti. Esistono diverse generazioni di test ELISA.

I più moderni e altamente accurati sono quelli appartenenti alla 3a e 4a generazione. I medici notano che è meglio, se possibile, dare la preferenza ai reagenti europei, poiché la loro precisione raggiunge il 99%. Il tempo necessario per ottenere i risultati ELISA varia in media da 2 a 10 giorni.

Perché l'ELISA potrebbe essere falso

È importante comprendere che i test immunoenzimatici possono produrre risultati sia falsi positivi che falsi negativi. Sebbene il rischio di un tale sviluppo sia estremamente ridotto.

Il paziente può ricevere risultati falsi negativi se il test è stato eseguito troppo presto e gli anticorpi non hanno ancora avuto il tempo di formarsi nel corpo.

Per escludere tale reazione, si consiglia di sottoporre i pazienti a test più volte a intervalli diversi.

In alcune malattie si verifica un test falso positivo. Ad esempio, pazienti con:

• epatite alcolica;
• mielomi in gran numero;
• alcune malattie autoimmuni;
• donne durante la gravidanza, ecc.

Con tali malattie, il sangue di una persona viene reintegrato con anticorpi. Possono assomigliare agli anticorpi dell'HIV nella struttura, il che confonde i reagenti, provocando una reazione. Naturalmente, negli ultimi anni, i sistemi di test sono diventati sempre più sensibili. Tuttavia, il problema dei risultati falsi non è stato ancora completamente risolto.

Immunoblot

Nelle condizioni moderne, è impossibile fare una diagnosi positiva di HIV basandosi solo sull'ELISA. È necessaria la conferma dei risultati ottenuti, che viene eseguita mediante una reazione di immunoblotting (immunoblotting, IB).

Per eseguire l'IS, in laboratorio devono essere disponibili strisce reattive speciali. A loro vengono applicate proteine ​​virali. Prima dell'analisi, il sangue del paziente prelevato da una vena viene preparato in modo speciale.

Il materiale biologico risultante viene aggiunto ad un gel, in cui le proteine ​​vengono separate in base al loro peso. Quindi la striscia precedentemente preparata viene immersa nella massa risultante.

La striscia si bagna (si verifica una macchia) e su di essa vengono rilevate delle bande se il materiale contiene proteine ​​dell'HIV. Se non sono presenti proteine, la bagnatura non modifica l'aspetto della striscia.

Esistono diverse interpretazioni dell'immunoblotting. Tuttavia, indipendentemente dal modo in cui un particolare ospedale o laboratorio esegue la decodifica, la probabilità di una diagnosi corretta è del 99,9%.

L’immunoblotting può dare risultati errati, si chiedono spesso i pazienti? Sì, questo è possibile, ad esempio, se il paziente ha la tubercolosi, è incinta o soffre di cancro.

PCR per aiutare

La PCR è un altro metodo in grado di diagnosticare il virus dell'immunodeficienza umana nel sangue e in altri fluidi biologici, dove la sua concentrazione è piuttosto elevata.

Come notano i medici, la reazione a catena della polimerasi può dare un risultato positivo 10 giorni dopo il primo contatto del corpo con l'infezione.

È importante capire che la PCR in alcuni casi dà risultati falsi positivi. Ciò è spiegato dal fatto che il metodo ha una sensibilità molto elevata.

Di conseguenza, spesso reagisce ad anticorpi simili, indicando processi patologici completamente diversi nel corpo del paziente.

Nonostante la sua elevata sensibilità e la bassa probabilità di ottenere risultati falsi, la PCR non è ampiamente utilizzata. Ciò è spiegato da diversi fattori. In primo luogo, per eseguire la reazione a catena della polimerasi sono necessarie attrezzature speciali, il cui prezzo è piuttosto elevato. In secondo luogo, il personale che lavora con l'attrezzatura deve essere altamente qualificato, il che può anche causare difficoltà. Tutte queste caratteristiche rendono la PCR un metodo diagnostico costoso e, di conseguenza, non accessibile a tutti.

Nonostante la PCR non sia un metodo di screening, viene utilizzata, ad esempio, per testare un neonato per l'infezione da virus dell'immunodeficienza umana.

Sistemi diagnostici espressi

Medici e scienziati hanno dedicato molti sforzi allo sviluppo di test rapidi per valutare l’infezione da HIV. Come notano i medici, quando si utilizzano questi sistemi, è possibile ottenere i risultati entro 15 minuti dall'esecuzione del test.

I test rapidi per l’HIV si basano sul principio dell’immunocromatografia. Il sistema solitamente comprende una striscia impregnata con reagenti speciali.

Il compito del paziente è applicare sangue, sperma o qualsiasi altro fluido biologico che possa contenere anticorpi contro il virus.

Se vengono rilevati, sulla striscia appariranno due strisce colorate, una delle quali è di controllo e l'altra diagnostica. Se non vengono rilevati, verrà rilevata solo la banda di controllo.

È importante capire che i test rapidi non forniscono una garanzia al 100% che una persona non sia infetta o, al contrario, sia infettata dall'infezione da HIV. In ogni caso, i risultati ottenuti con il loro aiuto devono essere confermati in laboratorio mediante immunoblotting.

I sistemi di test rapidi sono convenienti per i pazienti che vogliono rassicurarsi a casa. Tuttavia, come notano i medici, anche se con il loro aiuto una persona ha ricevuto un risultato negativo, se sospetti cambiamenti negativi nel corpo, dovresti comunque consultare un medico.

Quale medico devo contattare se sospetto un'infezione?

Molti pazienti si chiedono a quale medico rivolgersi se sospettano l’infezione da HIV. Prima di tutto, si consiglia di visitare un venereologo. È questo professionista medico specializzato in malattie che possono essere trasmesse da persona a persona attraverso il contatto sessuale.

Un venereologo sarà in grado di condurre un esame competente, raccogliere l'anamnesi e decidere di quali esami il paziente ha bisogno per fare una diagnosi accurata. A sua discrezione può anche indirizzare il paziente a un ospedale per malattie infettive. Soprattutto se sospetta ancora di avere l'HIV.

Il virus dell’immunodeficienza umana è una malattia comune. Qualsiasi persona sessualmente attiva può riscontrarlo.

La conoscenza della distribuzione e della diagnosi di questa malattia nelle realtà moderne è vitale se il paziente vuole preservare la propria salute e longevità. Solo una visita tempestiva dal medico ti permetterà di prendere il controllo dell’infezione e proteggerti da essa!

... la diagnosi di qualsiasi malattia infettiva si basa sul confronto di dati epidemiologici, clinici e di laboratorio e l'esagerazione del significato di uno dei gruppi di questi dati può portare a errori diagnostici.

La diagnosi dell’infezione da HIV comprende due fasi:
IO palcoscenico - stabilire il fatto reale dell’infezione da HIV ;
II palcoscenico - determinazione dello stadio della malattia .

STABILIRE IL FATTO DELL'INFEZIONE DA HIV

Stabilire il fatto reale dell'infezione da HIV (cioè identificare le persone infette da HIV), a sua volta, comprende anche due fasi:
Fase I- test immunoassorbente collegato(ELISA): il metodo ELISA è un metodo di screening (selezione) - la selezione di individui presumibilmente infetti, ovvero il suo obiettivo è identificare individui sospetti ed eliminare individui sani; Gli anticorpi contro l'HIV vengono rilevati utilizzando altri anticorpi contro gli anticorpi desiderati (anticorpi contro altri anticorpi). Questi anticorpi “aiutanti” sono etichettati con un enzima. Tutti i test di screening devono essere altamente sensibili per non perdere un paziente. Per questo motivo, la loro specificità non è molto elevata, cioè l'ELISA può dare una risposta positiva (“probabilmente malata”) in persone non infette (ad esempio, in pazienti con malattie autoimmuni: reumatismi, lupus eritematoso sistemico, ecc.). La frequenza dei risultati falsi positivi quando si utilizzano vari sistemi di test varia dallo 0,02 allo 0,5%. Se il test ELISA di una persona dà un risultato positivo, è necessario un ulteriore esame per confermare il fatto dell’infezione da HIV. Quando si esegue l'ELISA, sono possibili risultati falsi negativi nel 3-5% dei casi - se l'infezione si è verificata relativamente di recente e il livello di anticorpi è ancora molto basso, o nella fase terminale della malattia, caratterizzata da gravi danni al sistema immunitario con una profonda interruzione del processo di formazione degli anticorpi. Pertanto, se vi è evidenza di contatto con persone infette dall'HIV, gli studi vengono solitamente ripetuti dopo 2 - 3 mesi.
Fase II - immunoblotting(Western Blot modificato, Western Blot): è un metodo più complesso e serve a confermare il fatto dell'infezione. Questo metodo non rileva anticorpi complessi contro l'HIV, ma anticorpi contro le sue singole proteine ​​strutturali (p24, gp120, gp41, ecc.). I risultati dell'immunoblotting sono considerati positivi se vengono rilevati anticorpi contro almeno tre proteine, una delle quali è codificata dai geni env, l'altra dai geni gag e la terza dai geni pol. Se vengono rilevati anticorpi contro una o due proteine, il risultato è considerato discutibile e richiede conferma. Nella maggior parte dei laboratori, la diagnosi di infezione da HIV viene fatta se vengono rilevati contemporaneamente anticorpi contro le proteine ​​p24, p31, gp4l e gpl20/gp160. L'essenza del metodo: il virus viene distrutto in componenti (antigeni), che consistono in residui di aminoacidi ionizzati, e quindi tutti i componenti hanno un'origine diversa l'uno dall'altro; quindi, utilizzando l'elettroforesi (corrente elettrica), gli antigeni vengono distribuiti sulla superficie della striscia: se il siero del test contiene anticorpi anti-HIV, interagiranno con tutti i gruppi di antigeni e questo potrà essere rilevato.

Dovrebbe essere ricordato che gli anticorpi dell'HIV compaiono nel 90-95% delle persone infette entro 3 mesi dall'infezione, nel 5-9% delle persone infette gli anticorpi dell'HIV compaiono dopo 6 mesi e nello 0,5-1% delle persone infette gli anticorpi dell'HIV compaiono più tardi. Durante la fase dell'AIDS il numero degli anticorpi può diminuire fino a scomparire completamente.

In immunologia esiste un concetto come "finestra sierologica" - il periodo che intercorre tra l'infezione e la comparsa di una quantità di anticorpi tale da poter essere rilevata. Per l'HIV, questo periodo dura solitamente da 2 a 12 settimane, in rari casi più a lungo. Durante la “finestra sierologica”, secondo i test, una persona è sana, ma in realtà è infettata dall'HIV. È stato accertato che il DNA dell'HIV può rimanere nel genoma umano per almeno tre anni senza segni di attività e che gli anticorpi dell'HIV (marcatori dell'infezione da HIV) non compaiono.

Durante questo periodo (“finestra sierologica”) è possibile identificare una persona infetta da HIV e anche 1-2 settimane dopo l’infezione utilizzando reazione a catena della polimerasi(PCR). Questo è un metodo estremamente sensibile: teoricamente è possibile rilevare 1 DNA per 10 ml di terreno. L'essenza del metodo è la seguente: utilizzando la reazione a catena della polimerasi, si ottengono molte copie di un acido nucleico (un virus è un acido nucleico - DNA o RNA - in un guscio proteico), che vengono poi identificate utilizzando enzimi o isotopi marcati , nonché dalla loro struttura caratteristica. La PCR è un metodo diagnostico costoso, quindi non viene utilizzata per lo screening o di routine.

DETERMINARE LO STADIO DELLA MALATTIA

Lo sviluppo dell'AIDS si basa su, prima di tutto, la distruzione dei linfociti T-aiutanti, contrassegnati da anticorpi monoclonali - cluster di differenziazione - come CD4. A questo proposito, la diagnosi e il monitoraggio della progressione della malattia sono impossibili senza il monitoraggio della sottopopolazione di cellule T helper, operazione che viene eseguita più comodamente utilizzando un laser cell sorter.

Per una lieve infezione da HIV Il numero di linfociti T è un indicatore estremamente variabile. In generale, si riscontra una diminuzione della conta delle cellule CD4 (assoluta e relativa) negli individui la cui infezione da HIV si è verificata almeno un anno fa. D'altra parte, nelle prime fasi dell'infezione si verifica spesso un forte aumento del numero di cellule T soppressori (CD8) sia nel sangue periferico che nei linfonodi ingrossati.

Con un grave AIDS La maggioranza assoluta dei pazienti presenta un numero totale ridotto di linfociti T (meno di 1.000 in 1 μl di sangue, compresi i linfociti CD4 - meno di 22 in 1 μl, mentre il valore assoluto del contenuto di CD8 rimane entro limiti normali). Di conseguenza, il rapporto CD4/CD8 diminuisce drasticamente. Le risposte delle cellule T in vitro agli antigeni standard e ai mitogeni sono ridotte in stretta conformità con la conta relativamente ridotta dei CD4.

Per gli stadi avanzati dell'AIDS Caratterizzato da linfopenia generale, neutropenia, trombocitopenia (rispettivamente, diminuzione del numero di linfociti, neutrofili e piastrine), anemia. Questi cambiamenti possono essere una conseguenza dell'inibizione centrale dell'ematopoiesi dovuta al danno agli organi ematopoietici da parte del virus, nonché alla distruzione autoimmune delle sottopopolazioni cellulari nella periferia. Inoltre, l'AIDS è caratterizzato da un moderato aumento della quantità di gammaglobuline con un aumento dominante del contenuto di IgG. I pazienti con sintomi gravi di AIDS hanno spesso livelli elevati di IgA. In alcune fasi della malattia, il livello dei marcatori dell'AIDS come 1-microglobulina, interferone acido-stabile e 1-timosina aumenta in modo significativo. Lo stesso accade con la secrezione della neopterina libera, un metabolita dei macrofagi. Non è ancora possibile valutare l'importanza relativa di ciascuno dei test elencati, il cui numero è in costante aumento. Pertanto, dovrebbero essere considerati in interazione con i marcatori dell'infezione da HIV, sia immunovirologici che citologici. Un esame del sangue clinico è caratterizzato da leucopenia, linfopenia (rispettivamente, una diminuzione del numero di leucociti e linfociti).

Fase 1 - " fase di incubazione» - non sono stati ancora rilevati anticorpi contro l'HIV; la diagnosi di infezione da HIV in questa fase viene effettuata sulla base di dati epidemiologici e deve essere confermata in laboratorio mediante il rilevamento del virus dell’immunodeficienza umana, dei suoi antigeni e degli acidi nucleici dell’HIV nel siero del paziente;
Fase 2 - " stadio delle manifestazioni primarie» - in questo periodo si ha già la produzione di anticorpi:;
Fase 2A - “ asintomatico» - L'infezione da HIV si manifesta solo con la produzione di anticorpi;
Fase 2B - “ infezione acuta da HIV senza malattie secondarie» - linfociti a plasma largo: nel sangue dei pazienti possono essere rilevate "cellule mononucleate" e spesso si osserva una diminuzione transitoria del livello dei linfociti CD4 (un'infezione clinica acuta si osserva nel 50-90% degli individui infetti nei primi 3 mesi dopo l'infezione; l'inizio del periodo di infezione acuta, di regola, precede la sieroconversione, cioè la comparsa di anticorpi contro l'HIV);
Fase 2B - “ infezione acuta da HIV con malattie secondarie» - sullo sfondo di una diminuzione del livello dei linfociti CD4 e della conseguente immunodeficienza, compaiono malattie secondarie di varia eziologia (angina, polmonite batterica e da Pneumocystis, candidosi, infezione erpetica, ecc.);
Fase 3 - " latente» - in risposta alla progressione dell'immunodeficienza, si verifica una modifica della risposta immunitaria sotto forma di riproduzione eccessiva delle cellule CD4, seguita da una diminuzione graduale del livello dei linfociti CD4, in media ad una velocità di 0,05-0,07x109/l per anno; gli anticorpi contro l'HIV vengono rilevati nel sangue;
Fase 4 - " stadio delle malattie secondarie» - deplezione dei linfociti della popolazione CD4, la concentrazione di anticorpi contro il virus diminuisce in modo significativo (a seconda della gravità delle malattie secondarie, si distinguono gli stadi 4A, 4B, 4B);
Fase 5 - " fase terminale» - tipicamente una diminuzione del numero di cellule CD4 al di sotto di 0,05x109/l; la concentrazione di anticorpi contro il virus diminuisce in modo significativo oppure gli anticorpi potrebbero non essere rilevati.

1. Metodi sierologici il rilevamento degli anticorpi (AT) contro l'HIV è lo standard per la diagnosi dell'infezione da HIV (i sistemi di test ELISA basati su peptidi sintetici hanno quasi il 100% di sensibilità e specificità). L'ELISA consente di rilevare gli Ag dell'HIV, che possono essere indicatori di un'infezione precoce o, al contrario, dello sviluppo tardivo-avanzato dell'infezione da HIV (p24 Ag)

2. Test di conferma— immunoblotting (IB), immunofluorescenza indiretta (IIF) e radioimmunoprecipitazione (RIP).

a) L'OMS raccomanda di considerare positivo un siero contenente anticorpi contro due proteine ​​dell'involucro e una delle proteine ​​interne dell'HIV. I pazienti che risultano positivi all'ELISA ma hanno risultati indeterminati all'IB devono essere esaminati clinicamente e valutati con altri mezzi, visita medica, immunologica e dopo 3-6 mesi il loro siero sanguigno deve essere testato per gli anticorpi contro l'HIV.

b) metodo di immunofluorescenza indiretta (IIF) - utilizzato come test di conferma in molti laboratori o come test di screening.

c) la radioimmunoprecipitazione è un metodo altamente sensibile e specifico basato sull'utilizzo di aminoacidi marcati con isotopi radioattivi. Il metodo è altamente sensibile per la rilevazione degli anticorpi contro le proteine ​​di superficie ed è quindi altamente specifico, poiché questi componenti del virus sono presenti in quasi tutti gli individui infetti da HIV dopo la sieroconversione.

3. Metodi biologici molecolari: metodo di ibridazione molecolare degli acidi nucleici, PCR

1) come metodo di conferma alternativo e aggiuntivo per rilevare la presenza di un virus nell'organismo in relazione ai metodi sierologici di diagnosi di laboratorio;

2) come primo metodo di analisi specifica nella diagnosi precoce dell'infezione da HIV, quando ancora non esistono anticorpi antivirali specifici;

3) per diagnosticare l'infezione da HIV nei neonati di madri affette da HIV;

4) determinare la carica virale e prescrivere una terapia antiretrovirale specifica e monitorarne l'attuazione;

5) come metodo chiarificatore in caso di risultati sierologici poco chiari e in caso di discrepanza tra test sierologici e colturali;

6) quando si studiano i partner sessuali di persone infette da HIV;

7) come metodo di diagnosi differenziale dell'HIV-1 e dell'HIV-2;

4. Metodo virologico.

1. Principi della terapia antiretrovirale: il trattamento dovrebbe iniziare prima dello sviluppo di un'immunodeficienza significativa; la terapia iniziale dovrebbe includere combinazioni di almeno tre farmaci; la modifica della terapia dovrebbe consistere nella sostituzione o nell'aggiunta di almeno due nuovi farmaci; È estremamente importante misurare il livello delle cellule CD4+ e la carica virale; una diminuzione della carica virale a un livello inferiore al limite di rilevamento dei metodi sensibili riflette l'effetto ottimale del trattamento.

2. Esistono tre gruppi di moderni farmaci antiretrovirali:

a) inibitori nucleosidici della trascrittasi inversa (NRTI): zidovudina (azidotimidina, retrovir); didanosina (ddI, Videx); zalcitabina (ddC, hivid); stavudina (zerit, d4T); lamivudina (3TC, epivir); abacavir; adefovir; combivir (zidovudina + abacavir); trizivir (zidovudina+lamivudina+abacavir); adefovir (inibitori nucleotidici della trascrittasi inversa).

b) inibitori non nucleosidici della trascrittasi inversa (NNRTI): delaverdina(rescrittore); nevirapina (viramune); efavirenz

c) inibitori della proteasi (PI): saquinavir; ritonavir (norvir); indinavir (Crixivan); nelfinavir (Viracept); amprenavir (Agenerase); lopinavir (aluviran); Kaletra (lopinavir + ritonavir).

3. La monoterapia con qualsiasi farmaco non può fornire una soppressione sufficientemente pronunciata e duratura della replicazione dell'HIV. Inoltre, con la monoterapia aumenta il rischio della comparsa di ceppi resistenti e dello sviluppo di resistenza crociata ai farmaci dello stesso gruppo. L'unica eccezione è l'uso della zidovudina in monoterapia per ridurre il rischio di trasmissione perinatale dell'HIV.

4. Il criterio più importante per l'efficacia della terapia è la dinamica della carica virale, che dovrebbe essere determinata: senza trattamento - ogni 6-12 mesi, durante il trattamento - ogni 3-6 mesi e anche 4-8 settimane dopo la inizio della terapia antivirale.

Oltre alla terapia antiretrovirale è necessario il trattamento delle malattie secondarie.

34.3 AIDS (varianti cliniche, malattie opportunistiche).

Malattie opportunistiche- malattie gravi e progressive che si sviluppano in un contesto di crescente immunosoppressione e non si verificano in persone con un sistema immunitario normalmente funzionante (malattie che definiscono l'AIDS).

a) primo gruppo- si tratta di malattie caratteristiche solo di immunodeficienza grave (livello CD4+< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

b) secondo gruppo- malattie che possono svilupparsi sia in un contesto di grave immunodeficienza, sia in alcuni casi senza di essa: 1. Infezioni batteriche, combinate o ricorrenti nei bambini di età inferiore a 13 anni (più di due casi in 2 anni di osservazione): setticemia, polmonite , meningiti, lesioni ossee o articolari, ascessi causati da Haemophilus influenzae, streptococchi. 2. Coccidioidomicosi disseminata (localizzazione extrapolmonare). 3. Encefalopatia da HIV 4. Istoplasmosi, disseminata con localizzazione extrapolmonare. 5. Isosporosi con diarrea che persiste per più di 1 mese. 6. Sarcoma di Kaposi nelle persone di qualsiasi età. 7. Linfomi a cellule B (eccetto la malattia di Hodgkin) o linfomi con immunofenotipo sconosciuto. 8. Tubercolosi extrapolmonare. 9. La setticemia da Salmonella è ricorrente. 10. Distrofia da HIV.

Le più comuni sono la polmonite da Pneumocystis, la meningoencefalite criptococcica, l'infezione generalizzata da citomegalovirus (encefalite, retinite, esofagite, epatite, colite), la sepsi ad eziologia mista, la forma generalizzata del sarcoma di Kaposi, la tubercolosi polmonare.

Tutte queste malattie si manifestano con danni a uno o più organi e sistemi: cervello, polmoni, fegato, tratto gastrointestinale e sono gravemente progressive. Le malattie che definiscono l'AIDS si manifestano in varie combinazioni e anche una terapia adeguata non produce l'effetto atteso.

Varianti cliniche dell'AIDS: AIDS infettivo, neuro-oncologico, a seconda della prevalenza delle diverse cliniche.

HIV: diagnosi e trattamento, prevenzione

La sindrome da immunodeficienza acquisita è da oltre quarant'anni uno dei problemi chiave della società moderna. Pertanto, la diagnosi dell’HIV attira ora molta attenzione e risorse. Dopotutto, prima viene rilevato un virus che distrugge il sistema immunitario del corpo, maggiori sono le possibilità di evitare la morte.

Dietro l'abbreviazione HIV si nasconde la definizione di virus dell'immunodeficienza umana, uno dei più pericolosi tra quelli attualmente esistenti. Sotto la sua influenza, tutte le proprietà protettive del corpo vengono profondamente soppresse. Ciò, a sua volta, porta alla comparsa di vari tumori maligni e infezioni secondarie.

L’infezione da HIV può progredire in diversi modi. A volte la malattia distrugge una persona in 3-4 anni, ma in alcuni casi può durare più di 20 anni. Vale la pena sapere che questo virus è instabile e muore rapidamente se si trova al di fuori del corpo dell’ospite.

L'HIV può essere trasmesso artificialmente, attraverso il contatto sanguigno e attraverso un meccanismo di biocontatto.

Se c'è stato un unico contatto con un portatore del virus, il rischio di infezione sarà basso, ma con un'interazione costante aumenta in modo significativo. La diagnosi dell’infezione da HIV è qualcosa da non trascurare, soprattutto quando si cambia partner sessuale

Vale la pena prestare attenzione alla via parenterale dell'infezione. Può verificarsi durante trasfusioni di sangue contaminato, iniezioni con aghi contaminati dal sangue di persone infette da HIV, nonché durante procedure mediche non sterili (tatuaggi, piercing, procedure dentistiche utilizzando strumenti non adeguatamente trattati). .

Allo stesso tempo, vale la pena sapere che non è necessario aver paura del contatto e della trasmissione domestica del virus. Ma resta il fatto: una persona è altamente suscettibile all'infezione da HIV. E se un soggetto di età superiore ai 35 anni viene infettato, lo sviluppo dell'AIDS avviene molto più velocemente rispetto a chi non ha ancora superato la soglia dei trent'anni.

Naturalmente, il modo migliore per identificare il problema, o la sua mancanza, è attraverso una diagnosi di HIV. Ma quali ragioni potrebbe avere una persona che conduce uno stile di vita sano per andare a controllarsi per l'infezione? Naturalmente tale iniziativa deve essere in qualche modo giustificata. Pertanto, è importante sapere quali sintomi possono indicare processi distruttivi che sopprimono il sistema immunitario.

È improbabile che sia possibile identificare lo stadio di incubazione del virus senza un esame del sangue, poiché il corpo in questo momento non reagisce ancora in alcun modo agli elementi ostili.

Anche la seconda fase (manifestazioni primarie) può passare inosservata senza l'aiuto del medico. Ma a volte si verifica una replicazione attiva del virus e il corpo inizia a reagire a questo: si notano febbre, varie eruzioni cutanee polimorfiche, sindrome lineare e faringite. Nella seconda fase è possibile aggiungere malattie secondarie come herpes, infezioni fungine, polmonite, ecc.

Il terzo stadio latente è caratterizzato da un graduale aumento dell'immunodeficienza. A causa del fatto che le cellule del sistema protettivo muoiono, la dinamica della loro produzione aumenta e ciò consente di compensare perdite significative. In questa fase possono infiammarsi diversi linfonodi appartenenti a sistemi diversi. Ma non si osservano forti sensazioni dolorose. In media, il periodo di latenza dura dai 6 ai 7 anni, ma può durare fino a 20.

Durante lo stadio delle malattie secondarie, che è il quarto, compaiono infezioni concomitanti di origine fungina, protozoaria batterica, virale e formazioni maligne. Tutto ciò avviene sullo sfondo di una grave immunodeficienza.

Metodi per diagnosticare l'infezione da HIV

Parlando della profonda soppressione dei meccanismi di difesa del corpo dovuta all'esposizione al virus, vale la pena notare che il futuro del paziente in questo caso dipende direttamente da una diagnosi tempestiva e accurata.

A questo scopo, la medicina moderna utilizza vari sistemi di test, che si basano su esami del sangue immunochemiluminescenti e immunoassorbenti legati a enzimi. Queste tecniche permettono di determinare la presenza di anticorpi appartenenti a classi diverse. Questo risultato aiuta ad aumentare significativamente il contenuto informativo dei metodi di specificità analitica, clinica e sensibilità quando si lavora con malattie infettive.

Interessante è anche il fatto che sia stato il metodo della reazione a catena della polimerasi a rendere possibile portare la diagnosi dell'HIV a un livello fondamentalmente nuovo. Per la ricerca sono adatti diversi materiali biologici: plasma sanguigno, biopsia, raschiamento, siero, liquido cerebrospinale o pleurico.

Se parliamo di metodi di ricerca di laboratorio, si concentrano principalmente sull'identificazione di diverse malattie chiave. Stiamo parlando dell'infezione da HIV, della tubercolosi, di tutte le infezioni trasmesse sessualmente e dell'epatite virale.

Per identificare il virus dell’immunodeficienza vengono utilizzati anche test genetici e sierologici molecolari. Nel primo caso si determina l'RNA del virus e il DNA del provirus; nel secondo caso si analizzano gli anticorpi anti-HIV e si rileva l'antigene P24.

Nelle cliniche che utilizzano, per così dire, metodi diagnostici classici, utilizzano principalmente il protocollo standard dei test sierologici.

Diagnosi precoce dell'HIV

Questo tipo di accertamento del fatto dell'infezione è necessario per identificare il prima possibile la minaccia di danni al sistema immunitario. Ciò, in primo luogo, consente di evitare la diffusione dell'infezione e, in secondo luogo, di influenzare la malattia nella fase iniziale.

Se consideriamo l'esempio della Russia, nell'esercito e nella marina della Federazione Russa è stata introdotta una classificazione clinica dell'infezione da HIV. Ciò ha prodotto risultati positivi: il processo di diagnosi clinica precoce è diventato molto più semplice.

I sintomi più comuni che indicano un possibile danno al sistema immunitario includono mal di testa, sudorazione notturna e stanchezza immotivata. È anche possibile sviluppare febbre accompagnata da segni di tonsillite. Ciò significa che la temperatura sale a 38 gradi o più e allo stesso tempo le tonsille si ingrossano e appare dolore durante la deglutizione. Tutto ciò è completato da una rapida perdita di peso. Tuttavia, questi sintomi sono spesso complessi.

In alcuni casi, l'infezione da HIV nelle fasi iniziali può manifestarsi sotto forma di vari cambiamenti nello stato della pelle. Stiamo parlando di macchie, roseola, pustole, foruncolosi, ecc. La diagnosi precoce dell'HIV comprende anche il trattamento di sintomi come l'ingrossamento generalizzato o limitato dei linfonodi periferici.

Se si verifica una crescita simultanea di più linfonodi, che dura tre mesi o più, e in gruppi diversi, ad eccezione della zona inguinale, allora ci sono tutte le ragioni per sospettare la presenza di un virus del sistema immunitario umano.

Parlando della diagnosi in un periodo successivo, è necessario prestare attenzione alla manifestazione dell'immunodeficienza secondaria, che spesso si presenta sotto le spoglie di vari sintomi clinici. Stiamo parlando delle seguenti manifestazioni:

• linfoadenopatia periferica generalizzata immotivata;
• artralgia di eziologia sconosciuta, che ha un decorso ondulato;
• ARVI (ARI), lesioni infiammatorie dei polmoni e delle vie respiratorie, che si fanno sentire abbastanza spesso;
• febbri di origine sconosciuta e febbricola prolungata;
• intossicazione generale, che si manifesta attraverso debolezza immotivata, stanchezza, letargia, ecc.

La diagnosi dell'HIV in fase avanzata prevede l'esame di una malattia come il sarcoma di Kaposi, che si manifesta con la comparsa di molteplici neoplasie, spesso nella parte superiore del corpo nei giovani, seguite da uno sviluppo dinamico e metastasi.

Reazione a catena della polimerasi

Quando si considerano vari metodi per diagnosticare l'infezione da HIV, vale la pena prestare particolare attenzione. Va subito notato che questo esame del sangue può essere mirato a caratteristiche quantitative e qualitative.

Lo scopo di questo metodo di rilevamento di un virus può essere definito come segue:

• diagnosi precoce dell'infezione da HIV;
• chiarire la presenza di risultati discutibili a seguito di uno studio di immunoblotting;
• identificazione di uno stadio specifico della malattia;
• monitorare l’efficacia del trattamento volto a sopprimere il virus.

Se parliamo di infezione primaria, va notato che questa tecnica consente di determinare l’RNA dell’HIV nel sangue del paziente dopo 14 giorni dal momento dell’infezione. Questo è un ottimo risultato. In questo caso, il risultato dello studio stesso avrà un'espressione qualitativa: positivo (il virus è presente) o negativo.

Espressione quantitativa della PCR

Questo tipo di reazione a catena della polimerasi viene utilizzata per determinare il probabile tasso di progressione dell'AIDS e per prevedere l'aspettativa di vita del paziente.

La determinazione quantitativa delle cellule dell'RNA dell'HIV nel sangue consente di capire quando la malattia entra nella fase clinica.

Vale la pena prestare attenzione al fatto che i metodi diagnostici di laboratorio per l'HIV forniscono risultati più accurati se il biomateriale richiesto per l'analisi viene determinato correttamente e la sua raccolta viene effettuata in modo competente.

Per effettuare un monitoraggio di alta qualità delle persone infette, è necessario (se possibile) utilizzare un approccio integrato per studiare lo stato immunitario del paziente. Stiamo parlando della determinazione quantitativa e funzionale di tutte le parti del sistema di difesa: immunità cellulare, umorale e resistenza aspecifica in quanto tale.

Diagnostica di laboratorio

Sempre più spesso, nelle moderne condizioni di laboratorio, viene utilizzato un metodo a più fasi per valutare lo stato del sistema immunitario. Questa tecnica spesso comporta la determinazione di una sottopopolazione di immunoglobuline e linfociti nel sangue. Ciò significa che viene preso in considerazione il rapporto delle cellule CD4/CD8. Se il risultato è inferiore a 1,0, c'è motivo di sospettare un'immunodeficienza.

La diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV deve includere questo test, poiché questo virus è caratterizzato da un danno selettivo ai linfociti CD4, che porta ad una notevole violazione del rapporto sopra menzionato (meno di 1,0).

Per valutare lo stato immunologico, i medici possono condurre un test per la presenza di difetti “grossolani” o generali nel sistema immunitario umorale e cellulare. Stiamo parlando di ipogammaglobulinemia o ipergammaglobulinemia nella fase terminale, nonché di una diminuzione della produzione di citochine, di un aumento della concentrazione di complessi immuni circolanti e di un indebolimento della risposta dei linfociti ai mitogeni e agli antigeni.

Vale la pena prestare attenzione al fatto che la diagnosi di laboratorio dell'HIV prevede due fasi chiave:

1. Laboratorio di screening. Se si ottiene un risultato positivo nell'ELISA (saggio immunoassorbente legato all'enzima), viene ripetuto altre due volte nello stesso sistema e senza modificare il siero. Nel caso in cui due dei tre esami portino a rilevare l'influenza del virus, il siero viene inviato per ulteriori analisi ad un laboratorio di riferimento.
2. La seconda fase, che comprende metodi diagnostici di laboratorio per l'infezione da HIV, determina lo stato del sistema immunitario. Viene effettuato nel laboratorio di riferimento sopra menzionato. In questo caso il siero positivo viene nuovamente testato in ELISA, ma utilizzando un sistema di test diverso, che differisce dal precedente nella composizione di antigeni, anticorpi o nel formato dei test stessi. Se viene determinato un risultato negativo, viene eseguito un test ripetuto in un terzo sistema di test. Se alla fine l'impatto del virus non è stato rilevato, viene registrata l'assenza di infezione da HIV. Ma se il risultato è positivo, il siero viene esaminato in modo lineare o immunoblot.

Alla fine, un tale algoritmo porta a risultati positivi, neutri o negativi.

Ogni cittadino dovrebbe sapere che è a sua disposizione la diagnosi dell’HIV. L'AIDS può essere individuato nelle istituzioni del sistema sanitario privato, municipale o statale.

Naturalmente l'identificazione del virus sarebbe di scarsa utilità in assenza di diversi metodi per influenzare l'infezione. E sebbene al momento non esista ancora un vaccino in grado di neutralizzare completamente il virus, la diagnosi competente, il trattamento dell'HIV e la successiva prevenzione possono migliorare significativamente le condizioni del paziente, prolungandone così la vita. Questa tesi è confermata dal fatto che l'aspettativa di vita media degli uomini che hanno iniziato tempestivamente il trattamento contro l'HIV è di 38 anni. Le donne che iniziano a combattere il virus dell’immunodeficienza vivono in media 41 anni.

Una volta effettuata la diagnosi, il trattamento dell'HIV si riduce all'uso di diverse tecniche. Una delle più comuni è la terapia antiretrovirale attiva, nota anche come HAART. Se questo tipo di trattamento viene applicato tempestivamente e correttamente, è possibile rallentare significativamente lo sviluppo dell'AIDS o fermarlo del tutto.

L'essenza della HAART è che vengono utilizzati contemporaneamente più farmaci, il cui scopo è influenzare vari meccanismi di sviluppo del virus dell'immunodeficienza.

Dopo che vari metodi diagnostici dell'HIV hanno determinato il fatto dell'infezione, possono essere utilizzati farmaci che hanno i seguenti effetti:

Immunologico. Il sistema immunitario viene stabilizzato, il livello dei linfociti T aumenta e viene ripristinata la protezione contro varie infezioni.

Clinico. Si previene lo sviluppo dell'AIDS e di tutte le sue manifestazioni, si allunga la vita dei pazienti e si preservano tutte le funzioni del corpo.

Virologico. La moltiplicazione del virus viene bloccata, di conseguenza la carica virale diminuisce e successivamente viene fissata a un livello basso.

È difficile sopravvalutare l’importanza di tali misure nell’influenzare la malattia come diagnosi, trattamento e prevenzione dell’infezione da HIV. Pertanto, la cosa migliore che si può fare dopo un risultato positivo al test per l'infezione è iniziare immediatamente a combattere la malattia. Un altro metodo che può aiutare a raggiungere questo obiettivo è il trattamento virologico.

In questo caso stiamo parlando dell'uso di farmaci che non consentono al virus di attaccarsi ai linfociti T e di entrare nel corpo. Questi farmaci sono chiamati inibitori della penetrazione. Un esempio concreto è Celsentry.

Gli inibitori della proteasi virale possono essere utilizzati per sopprimere l’HIV. Lo scopo di questo gruppo di farmaci è prevenire l'infezione di nuovi linfociti. Questi sono farmaci come Viracept, Reyataz, Kaletra, ecc.

Il terzo gruppo di farmaci topici sono gli inibitori della trascrittasi inversa. Sono necessari per bloccare l'enzima che permette all'RNA del virus di moltiplicarsi nel nucleo del linfocita. Tali metodi possono avere un impatto significativo su un problema come l’infezione da HIV. La diagnosi, il trattamento e la prevenzione dell'AIDS sono opera di medici qualificati, quindi l'algoritmo per l'uso dei farmaci dovrebbe essere elaborato da loro.

Se necessario, possono essere utilizzati anche interventi immunologici e clinici.

L’Organizzazione Mondiale della Sanità suggerisce i seguenti metodi per combattere l’infezione da HIV:

Prevenzione della trasmissione sessuale. Questi includono il sesso protetto, la distribuzione di preservativi, il trattamento delle malattie sessualmente trasmissibili e programmi educativi.

Per le donne incinte a cui è stata diagnosticata l'infezione da HIV: diagnosi, prevenzione con l'uso di prodotti chimici appropriati, nonché consulenza e trattamento professionali.

Organizzazione della prevenzione attraverso gli emoderivati. In questo caso si tratta del trattamento antivirus e dello screening dei donatori.

Assistenza socio-sanitaria ai pazienti e alle loro famiglie.

Per garantire che la diagnosi dell’HIV non riveli la presenza del virus, è necessario seguire semplici regole di sicurezza:

se il sangue di una persona infetta viene a contatto con la pelle, deve essere immediatamente lavato via con acqua e sapone, quindi trattare l'area di contatto con alcol;

se il danno è stato causato da un oggetto contenente elementi di un virus, la ferita deve essere compressa, il sangue spremuto, l'area trattata con acqua ossigenata e i bordi cauterizzati con iodio;

non utilizzare mai siringhe la cui sterilità sia stata compromessa;

Usa il preservativo durante i rapporti sessuali ed è meglio controllare inizialmente l'infezione del tuo partner.

Grazie al fatto che la diagnosi dell'HIV non si ferma, migliaia di persone hanno l'opportunità di iniziare il trattamento in tempo e aumentare significativamente la propria aspettativa di vita. La cosa principale è non ignorare i sintomi evidenti e non aver paura di andare dal medico.

Diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV

Sono soggetti al test per l’infezione da HIV:

2. Soggetti con diagnosi sospetta o confermata di: infezione batterica nei bambini di età inferiore a 13 anni, multipla e ricorrente; candidosi dell'esofago, della trachea, dei bronchi o dei polmoni; cancro invasivo cervicale; coccidioidomicosi disseminata o extrapolmonare; criptococcosi extrapolmonare; criptosporidiosi con diarrea per 1 mese o più; infezione da citomegalovirus di altri organi, ad eccezione del fegato, della milza, dei linfonodi in pazienti di età superiore a 1 mese; retinite da citomegalovirus con perdita della vista; infezione erpetica che provoca ulcere multifocali che non guariscono entro 1 mese, oppure bronchite, polmonite, esofagite; istoplasmosi disseminata o extrapolmonare; isosporosi con diarrea per più di 1 mese; tubercolosi diffusa o extrapolmonare; tubercolosi polmonare negli adulti o negli adolescenti di età superiore ai 13 anni; tubercolosi extrapolmonare; un'altra malattia causata da micobatteri diversi dal M. tuberculosis disseminato o extrapolmonare; polmonite causata da pneumocystis; leucoencefalopatia multifocale progressiva; Setticemia da Salmonella (eccetto Salmonella typhi), ricorrente; toxoilosi cerebrale nei bambini di età superiore a 1 mese; Sarcoma di Kaposi; polmonite interstiziale linfoide nei bambini di età inferiore a 13 anni; linfoma di Burkitt; linfoma immunoblastico; linfoma cerebrale primario; sindrome da deperimento, epatite B, portatore di HBsAg; mononucleosi infettiva; herpes zoster ricorrente nelle persone di età superiore ai 60 anni; Malattie trasmesse sessualmente.

In un laboratorio altamente specializzato si effettua:

a) determinazione di anticorpi, antigeni e immunocomplessi circolanti nel sangue; coltivare il virus, identificandone il materiale genomico e gli enzimi;

b) valutazione delle funzioni della parte cellulare del sistema immunitario. Il ruolo principale appartiene ai metodi diagnostici sierologici volti a determinare gli anticorpi, nonché gli antigeni patogeni nel sangue e in altri fluidi biologici del corpo.

Il test degli anticorpi HIV viene effettuato per:

a) sicurezza delle trasfusioni di sangue e dei trapianti;

b) sorveglianza, test volti a monitorare la prevalenza dell'infezione da HIV e studiare la dinamica della sua prevalenza in una determinata popolazione;

c) diagnosi di infezione da HIV, ovvero analisi volontaria del siero di persone praticamente sane o di pazienti con vari segni e sintomi clinici simili all'infezione da HIV o all'AIDS.

Il sistema per la diagnosi di laboratorio dell’infezione da HIV si basa su un principio in tre fasi. La prima fase è lo screening, inteso ad eseguire esami del sangue primari per la presenza di anticorpi contro le proteine ​​dell'HIV. La seconda fase è referenziale: consente, utilizzando speciali tecniche metodologiche, di chiarire (confermare) il risultato positivo primario ottenuto nella fase di screening. La terza fase è la fase esperta, destinata alla verifica finale della presenza e della specificità dei marcatori di infezione da HIV identificati nelle fasi precedenti della diagnostica di laboratorio. La necessità di diverse fasi della diagnostica di laboratorio è dovuta principalmente a considerazioni economiche.

In pratica vengono utilizzati diversi test che consentono di identificare le persone infette da HIV con un sufficiente grado di affidabilità:

Il test ELISA (saggio immunoassorbente legato all'enzima) per la rilevazione del primo livello, è caratterizzato da un'elevata sensibilità, sebbene meno specificità rispetto al seguente;

Immune blot (Western-blot), un test molto specifico e molto utilizzato che permette di differenziare l'HIV-1 e l'HIV-2;

Test dell'antigenemia p25, efficace nelle fasi iniziali dell'infezione;

Reazione a catena della polimerasi (PCR).

Nei casi di screening di massa di campioni di sangue, si consiglia di testare miscele di sieri provenienti da un gruppo di soggetti, compilate in modo tale che la diluizione finale di ciascun campione non superi 1:100. Se la miscela siero-corrente è positiva, viene testato ciascun siero nella miscela positiva. Questo metodo non porta ad una perdita di sensibilità sia nell'ELISA che nell'immunoblot, ma riduce i costi di manodopera e il costo dell'esame iniziale del 60-80%.

Durante la sierodiagnosi primaria dell'infezione da HIV, gli anticorpi totali vengono determinati utilizzando test di screening - ELISA e reazioni di agglutinazione. Nella seconda fase (arbitrato), viene utilizzato un test più complesso: un immunoblot, che consente non solo di confermare o rifiutare la conclusione iniziale, ma anche di farlo a livello di determinazione degli anticorpi contro le singole proteine ​​del virus.

Saggio immunoassorbente collegato(ELISA) è il metodo principale e più utilizzato per determinare gli anticorpi contro l’HIV. Ma gli svantaggi dell’utilizzo dell’ELISA nella sierodiagnosi dell’infezione da HIV includono frequenti risultati falsi positivi. A questo proposito il risultato dell'ELISA non costituisce la base per una conclusione sulla sieropositività all'HIV del soggetto. Ciò è dovuto alla purificazione insufficiente dell'immunoassorbente dalle proteine ​​di zavorra; legame spontaneo degli anticorpi sierici con la plastica, se le sue aree non occupate dall'immunoassorbente non sono sufficientemente bloccate o non sono bloccate affatto da una speciale proteina neutra; interazione crociata con le proteine ​​dell'HIV dell'immunoassorbente di varie proteine ​​presenti nel sangue di persone affette da alcuni processi patologici, spesso autoimmuni, come la sclerosi multipla, il LES, la tubercolosi; con donazioni frequenti, malattie infettive e oncologiche, ustioni, gravidanze, trasfusioni ripetute di sangue, trapianti di organi e tessuti, nonché persone in emodialisi; con la presenza del fattore reumatoide nel sangue, che spesso provoca reazioni false positive all'HIV; la presenza nel sangue delle persone in esame di anticorpi contro le proteine ​​gag dell'HIV e, soprattutto, contro la proteina p24 (ovviamente si formano anticorpi verso retrovirus eso o endogeni non ancora identificati). Poiché l'anti-p24 viene sintetizzato senza problemi nelle prime fasi della sieroconversione dell'HIV, viene effettuato un ulteriore monitoraggio immunologico dei soggetti con anticorpi contro le proteine ​​gag dell'HIV, nonché la loro esclusione dalla donazione.

La sensibilità e la specificità dei test immunoenzimatici sono in costante aumento. Di conseguenza, gli ELISA di quarta generazione non sono inferiori nelle loro capacità diagnostiche all'immunoblotting e possono essere utilizzati non solo nello screening, ma anche nella fase di conferma della diagnosi di infezione da HIV [Smolskaya T. T., 1997].

Immunoblotè il metodo finale di diagnosi sierologica, che consente di trarre una conclusione definitiva sulla positività o negatività del soggetto all'HIV.

Esiste una chiara correlazione tra i risultati dello studio dei sieri nell'immunoblotting e nell'ELISA: sieri doppi positivi in ​​ELISA con diversi sistemi di test nel 97-98% dei casi risultano poi positivi all'HIV nell'immunoblotting. Se all'ELISA i sieri risultano positivi solo in uno dei due sistemi di test utilizzati, all'immunoblot risultano positivi solo nel 4% dei casi. Nel 5% dei casi, quando si conducono studi di conferma su individui con dati positivi, l'immunoblot ELISA può dare risultati "incerti" e, tra questi, in circa il 20% dei casi, i risultati "incerti" sono causati da anticorpi contro le proteine ​​gag dell'HIV-1 (pag.55, pag.25, pag.18). La presenza di anticorpi solo contro le proteine ​​gag dell'HIV-1 è un motivo per un ulteriore esame del siero del sangue per l'infezione da HIV-2.

La valutazione dei risultati dell'immunoblotting viene effettuata rigorosamente in conformità con le istruzioni fornite con il sistema di test. Se le istruzioni non forniscono indicazioni su come interpretare i risultati, dovrebbero essere utilizzati i criteri dell’OMS.

Se si ottengono risultati positivi della ricerca nella fase di riferimento della diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV e si ottiene un risultato negativo del test di immunoblotting, viene effettuata una diagnosi specialistica ripetuta obbligatoria 6 mesi dopo il primo esame.

Se i risultati dell'immunoblotting 12 mesi dopo lo studio del primo campione rimangono negativi o indeterminati, in assenza di fattori di rischio, sintomi clinici o altri fattori associati all'infezione da HIV, il soggetto viene rimosso dall'osservazione del dispensario.

Tra i metodi sierologici, in caso di risultati indeterminati, l'immunoblot viene utilizzato come diagnosi specialistica radioimmunoprecipitazione(RIP). Si basa sull'utilizzo di proteine ​​virali marcate con iodio radioattivo e la rilevazione dei precipitati avviene mediante contatori beta. Gli svantaggi del metodo includono l'alto costo delle attrezzature e la necessità di attrezzare locali speciali per questi scopi.

Le persone con diagnosi di infezione da HIV sono soggette a un monitoraggio dinamico costante con esami di laboratorio obbligatori ogni 6 mesi.

La reazione a catena della polimerasi (PCR) rivela sequenze nucleotidiche premoltiplicate specifiche per il genoma di un dato agente patogeno. La moltiplicazione isolata di un gene o di un suo frammento, chiamata amplificazione, PCR consente di effettuare in vitro utilizzando l'enzima DNA polimerasi termostabile. In 2-3 ore la PCR consente di ottenere milioni di copie di una specifica regione del virus. Durante l'infezione da HIV, dall'RNA cellulare, compreso l'RNA del virus, se è stato riprodotto in una cellula o è stato integrato nel suo genoma, mediante trascrizione inversa e ibridazione con “sonde” oligonucleotidiche marcate, si ottiene una quantità sufficiente di DNA provirale per analisi, che viene identificata e caratterizzata quantitativamente, in relazione all'appartenenza al genoma dell'HIV, utilizzando un'etichetta radioattiva o altra sonda, stabilendo l'omologia del DNA e delle sequenze di aminoacidi specifiche del virus. La sensibilità della PCR è il rilevamento dei geni virali in una cellula su cinquemila.

La PCR, anche quantitativa, può essere utilizzata solo per determinare la carica virale nel plasma per decidere se iniziare il trattamento farmacologico di un paziente o cambiare farmaco antiretrovirale. La PCR non può essere raccomandata per diagnosticare l'infezione da HIV, poiché anche i metodi e i reagenti più all'avanguardia possono determinare la carica virale non inferiore a un certo livello: 50 copie/ml. Inoltre, la complessità del test PCR e il suo costo elevato (circa 200 dollari) ne impediscono l’uso diffuso come metodo di diagnosi di laboratorio di routine dell’infezione da HIV. Pertanto, la PCR rimane indispensabile solo per valutare la carica virale nel plasma in pazienti con una diagnosi già accertata di infezione da HIV al fine di risolvere il problema della terapia del paziente.

Le fasi della diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV sono mostrate schematicamente in Fig. 1.

Riso. 1. Fasi della diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV

Durante l’infezione da HIV c’è un periodo di “finestra oscura del laboratorio” in cui la quantità di anticorpi contro l’HIV è insufficiente per la sensibilità dei sistemi di test. Questo periodo varia da una settimana a tre mesi dal momento dell'infezione da HIV, a seconda del livello di sensibilità del sistema di test. Tenendo conto di questo fenomeno, sorgono difficoltà nell'esame del sangue donato da persone che si trovano nel periodo di infezione da HIV menzionato. Pertanto, nella maggior parte dei paesi del mondo, è stato introdotto un sistema di utilizzo del sangue solo dopo che è stato conservato per 3-6 mesi al fine di effettuare un riesame obbligatorio per l'infezione da HIV dei donatori di queste dosi di sangue e dei suoi componenti .

Lo stadio delle manifestazioni primarie è caratterizzato dall'attività del processo replicativo. La viremia e l'antigenemia che ne derivano provocano la formazione di anticorpi specifici della classe IgM: anti-p24, anti-gp41, anti-gp120. In alcune persone infette l'antigene p24 può essere rilevato nel sangue mediante ELISA già 2 settimane dopo l'infezione e può essere rilevato fino all'ottava settimana. Inoltre nel decorso clinico dell'infezione da HIV si osserva un secondo aumento del livello della proteina p24 nel sangue, che si verifica durante la formazione dello stadio dell'AIDS.

La comparsa di una sieroconversione completa, quando nel sangue periferico si registra un livello elevato di anticorpi IgG specifici contro le proteine ​​strutturali dell'HIV gp41, p24, gpl20, facilita significativamente la diagnosi di infezione da HIV. La maggior parte dei kit commerciali sono progettati per indicare proprio tali anticorpi.

Difficoltà nel rilevare gli anticorpi nei pazienti con infezione da HIV possono sorgere durante periodi di viremia e antigenemia massiccia, quando gli anticorpi specifici esistenti nel sangue vengono utilizzati per legare le particelle virali e il processo replicativo precede la produzione di nuovi anticorpi antivirali.

Negli individui con un sistema immunitario inizialmente indebolito, viremia e antigenemia compaiono prima e rimangono a livelli elevati fino all'esito della malattia. Allo stesso tempo, questi pazienti hanno un basso contenuto di anticorpi liberi contro l'HIV, per due ragioni: produzione insufficiente di anticorpi da parte dei linfociti B e legame dei virioni dell'HIV e delle proteine ​​solubili da parte degli anticorpi, pertanto, per determinare l'infezione, testare sistemi con sono necessarie una maggiore sensibilità o modifiche dei metodi di analisi per determinare lo stadio di rilascio degli anticorpi dagli immunocomplessi.

Nonostante l'abbondanza di marcatori specifici dell'infezione da HIV, quello più spesso determinato è la presenza di anticorpi totali contro le proteine ​​dell'HIV. Il termine “totale” implica la presenza di due classi di anticorpi (IgG e IgM) e di un'ampia gamma di anticorpi contro varie proteine ​​dell'HIV, principalmente strutturali.

Determinazione delle cellule CD4. Il principale indicatore clinico e di laboratorio per diagnosticare lo stadio dell'infezione da HIV e il grado di distruzione del sistema immunitario nei pazienti nella vita di tutti i giorni è diventato la determinazione del contenuto dei linfociti CD4+: una diminuzione del livello al di sotto di 200 cellule/mm3 è il criterio principale per diagnosticare l’AIDS. Si ritiene che tutti gli individui infetti da HIV con una conta linfocitaria CD4+ pari o inferiore a 200 cellule/mm3 necessitino sia di terapia antivirale che di profilassi contro la polmonite da Pneumocystis. E sebbene 1/3 delle persone infette da HIV con una conta di linfociti CO4+ inferiore a 200 cellule/mm3 non presentino manifestazioni cliniche, l'esperienza ha dimostrato che i loro sintomi si sviluppano nei prossimi 2 mesi, per cui sono tutti considerati pazienti al Fase dell'AIDS.

Diagnosi di infezione da HIV

Come scoprire se una persona ha l'HIV? Il metodo più comune per diagnosticare l’infezione da HIV è il test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). I sistemi di test immunoassorbenti enzimatici vengono utilizzati per rilevare gli anticorpi dell'HIV nel siero del sangue.

L'infezione da HIV viene confermata da due diversi test: un test di screening e un test di conferma. A causa della loro elevata sensibilità, i test di screening possono produrre risultati falsi positivi. Pertanto, solitamente, quando si ottiene un primo risultato positivo, si preleva lo stesso campione di sangue e si duplica il test di screening una seconda volta e, se risulta nuovamente positivo, solo allora si esegue un test di conferma di tipo diverso. I test di conferma vengono eseguiti solo su campioni di sangue che risultano ripetutamente positivi (sono “reattivi”).

Il test di screening più comune è il test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). In genere, l'immunoblotting viene utilizzato come test di conferma. La combinazione di due diverse tipologie di test garantisce che i risultati ottenuti siano “altamente accurati”.

I sistemi di test di screening utilizzano proteine ​​dell’HIV create artificialmente che “catturano” anticorpi specifici prodotti dall’organismo in risposta alle proteine ​​virali. Una volta catturati, gli anticorpi "possono essere rilevati da reagenti utilizzati insieme a un indicatore, come un enzima, che provoca un cambiamento di colore". I cambiamenti di colore vengono letti da una macchina, che determina il risultato. L'immunoblotting funziona in modo simile, ma utilizza un campo elettrico per distinguere i diversi componenti in base al loro peso molecolare. Ciò consente di rilevare gli anticorpi contro specifici antigeni virali, che vengono poi raffigurati su carta come “strisce” distinguibili. I moderni sistemi di test possono rilevare l’infezione da HIV in 3-5 settimane nella maggior parte delle persone.

Se ci fosse il rischio di infezione da HIV, quando puoi fare il test?

Il test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA), utilizzato per diagnosticare l’HIV, può mostrare risultati solo diverse settimane dopo l’infezione. Questo tipo di analisi determina non il virus stesso, ma gli anticorpi contro di esso. In alcune persone, gli anticorpi sono presenti in quantità sufficiente nel sangue dopo 2 settimane. Tuttavia, nella maggior parte delle persone occorre più tempo perché gli anticorpi si formino (sieroconversione). Affinché il risultato del test sia sufficientemente attendibile è necessario che siano trascorsi circa 3 mesi dalla situazione di rischio. A volte la formazione di anticorpi richiede più tempo, da 3 a 6 mesi.

Se il risultato del test è negativo dopo 3 mesi, è necessario ripetere il test dopo 6 mesi?

Per la stragrande maggioranza delle persone, il test è abbastanza affidabile dopo 3 mesi (nella maggior parte delle persone, gli anticorpi compaiono anche prima). Puoi escludere completamente la possibilità di infezione facendo il test dopo 6 mesi.

Quanto tempo devo aspettare per i risultati del test?

Ciò dipende dalle caratteristiche del laboratorio in cui viene effettuato il test. Il test ELISA può essere effettuato entro lo stesso giorno, ma nella maggior parte dei laboratori questo periodo può variare da 1-2 giorni a 2 settimane. Considerando che l'attesa dei risultati può essere un periodo molto spiacevole, è meglio chiarire questo aspetto in anticipo, prima di sostenere il test. Puoi anche scoprire se i fine settimana e i giorni festivi influenzeranno la tempistica del test.

Quanto è affidabile un risultato positivo del test?

A volte l'ELISA dà risultati falsi positivi (in circa l'1% dei casi), la causa di tale risultato può essere una gravidanza, varie infezioni virali o un semplice incidente. Dopo aver ricevuto un risultato positivo, è necessario un test più accurato: un immunoblot, in base ai risultati del quale viene effettuata la diagnosi. Un risultato positivo dell'immunoblot dopo un ELISA positivo è affidabile al 99,9%: questa è la massima precisione per qualsiasi test medico. Se l'immunoblot è negativo, significa che il primo test era falso positivo e infatti la persona non ha l'HIV.

Cos’è un risultato incerto (dubbio)?

Se l'ELISA è positivo o negativo, l'immunoblot può essere positivo, negativo o indeterminato. Risultato immunoblot indeterminato, ad es. la presenza di almeno una proteina del virus nell'immunoblot può essere osservata se l'infezione è avvenuta di recente e ci sono ancora pochi anticorpi anti-HIV nel sangue, nel qual caso l'immunoblot diventerà positivo dopo un po' di tempo. Inoltre, un risultato incerto può apparire in assenza di infezione da HIV con epatite, alcune malattie metaboliche croniche o durante la gravidanza. In questo caso o l'immunoblot diventerà negativo oppure si troverà la causa del risultato indeterminato.

Devo fare il test HIV quando faccio domanda per un lavoro?

Secondo la legislazione della Federazione Russa, il test HIV può essere obbligatorio solo per i donatori di sangue, i cittadini stranieri e gli apolidi che desiderano entrare nel territorio della Federazione Russa per un periodo superiore a tre mesi, nonché il personale medico che lavora direttamente con sangue; persone in carcere. Tutti gli altri cittadini si sottopongono volontariamente al test HIV.

Infezione da HIV– una malattia derivante dall’infezione da virus dell’immunodeficienza umana (HIV).

L’HIV è un virus a RNA appartenente alla famiglia dei retrovirus.

Una proprietà comune dei retrovirus è la presenza di un enzima - trascrittasi inversa (revertasi), che "rimuove" una copia geneticamente accurata sotto forma di DNA dall'RNA. In base alla morfologia, alla struttura del genoma e ad altre caratteristiche, l'HIV appartiene alla famiglia dei lentivirus, cioè virus delle infezioni lente. Le caratteristiche generali delle malattie causate dai virus di questa famiglia includono: un lungo periodo di incubazione che non ha date precise (da 1 mese a 10 anni o più); insorgenza poco appariscente e asintomatica della malattia; quadro clinico in lento aumento; La patogenesi è mediata dal sistema immunitario e dall'alto tasso di variabilità genetica del virus. Tutto ciò complica notevolmente la diagnosi, il trattamento e la prevenzione dell'infezione da HIV.

Attualmente esistono due tipi conosciuti di HIV: HIV-1 e HIV-2. La malattia causata dall'HIV-2 è caratterizzata da una dinamica lenta e da un decorso più lungo.

Epidemiologia e vie di trasmissione:

L'infezione da HIV è un'antroponosi, l'unica fonte dell'agente patogeno per una persona è un portatore di virus e un malato di AIDS.

Le particelle virali (virioni) sono presenti in tutti i fluidi biologici del corpo, ma in concentrazioni variabili. I livelli più alti del virus si trovano nel sangue e nel liquido seminale.

Il virus si trasmette in tre modi:

- dalla madre al feto/neonato.

L'HIV non si trasmette attraverso i normali contatti domestici o attraverso le goccioline trasportate dall'aria. Non sono stati registrati casi di trasmissione dell'HIV attraverso la puntura di insetti succhiatori di sangue.

Tuttavia, l’HIV non è contagioso come le altre malattie sessualmente trasmissibili. Pertanto, su oltre 1.600 partner sessuali esaminati di persone infette da HIV, solo il 15% è stato infettato da questo virus.

Lo sviluppo dell'infezione da HIV è determinato da due fattori interagenti: la principale proprietà patogena dell'HIV, che è quella di indebolire il sistema immunitario di una persona infetta, e la risposta immunitaria specifica dell'organismo che si sviluppa durante il decorso della malattia.

L’HIV è pantropico, ma le sue principali cellule bersaglio sono le cellule T-helper, che trasportano centinaia di molecole di recettori CD4+ sulla loro membrana. Nell'organismo, il virus si trasforma da uno stato meno aggressivo a uno più aggressivo, che si esprime in una progressiva diminuzione del numero di linfociti CD4+ nel sangue fino alla loro completa scomparsa e porta ad un peggioramento del quadro clinico.

Dal momento dell'infezione alla comparsa degli anticorpi antivirali specifici, solitamente trascorrono 6-8 settimane. Il periodo che intercorre tra l’infezione e la comparsa di anticorpi rilevabili contro l’HIV nel siero del sangue è chiamato periodo “finestra”.

Da un lato il sistema immunitario è un bersaglio per il virus, dall’altro produce esso stesso anticorpi specifici. Allo stesso tempo, nel sistema immunitario si verifica lo sviluppo di processi autoimmuni, che aggravano il processo di distruzione delle cellule e dei tessuti del corpo.

L'infezione da HIV è caratterizzata dall'assenza di un quadro clinico specifico e la sua diagnosi viene solitamente effettuata sulla base di un'anamnesi medica accuratamente raccolta in combinazione con una serie di segni confermati dalla diagnostica di laboratorio. Nel 1983, l’OMS ha sviluppato alcuni criteri in base ai quali è possibile determinare la presenza dell’infezione da HIV se la diagnostica sierologica non è disponibile (criteri di Bangui). Questi includono:

- perdita di peso corporeo superiore al 10% dell'originale;

- diarrea cronica da più di un mese;

- febbre prolungata per un mese (costante o intermittente).

- tosse persistente per più di un mese;

- dermatite pruriginosa generalizzata;

- storia di herpes zoster;

- infezione erpetica cronica progressiva o disseminata (herpes simplex);

Una diagnosi di infezione da HIV utilizzando questi criteri può essere fatta a un paziente se si scopre che ne è affetto contemporaneamente almeno due cartelli “grandi” e un cartello “piccolo”. Una base sufficiente per fare una diagnosi di AIDS può essere la scoperta del sarcoma di Kaposi generalizzato o della meningite criptococcica in un paziente. A causa della bassa sensibilità e specificità di questi criteri, l’OMS ha successivamente richiesto la conferma sierologica della diagnosi.

Classificazione clinica dell’infezione da HIV:

Stadio delle manifestazioni primarie:

A. fase febbrile acuta;

B. fase asintomatica;

B. linfoadenopatia generalizzata persistente.

Stadio delle malattie secondarie:

A. Perdita di peso inferiore a 10 kg, lesioni superficiali batteriche, virali, fungine della pelle e delle mucose, herpes zoster, faringiti ripetute, sinusiti.

B. Perdita di peso progressiva superiore a 10 kg, diarrea inspiegabile, febbre per più di 1 mese, leucoplachia pelosa, tubercolosi polmonare, lesioni batteriche, fungine, virali, protozoarie ripetute o persistenti degli organi interni (senza diffusione) o lesioni profonde degli organi interni. pelle e mucose, herpes zoster ripetuto e disseminato, sarcoma di Kaposi localizzato.

La presenza di anticorpi contro l'HIV dipende dallo stadio della malattia.

Anticorpi contro l'HIV nel sangue

Risultato del test HIV

II. Manifestazioni primarie

B. Fase asintomatica

III. Malattie secondarie

Dopo che il virus è entrato nel corpo, si moltiplica nel sangue. Nel 50% degli individui infetti, durante questo periodo può svilupparsi uno stato prodromico, accompagnato da un aumento della temperatura corporea fino a 38,5-39,5 °C e altri sintomi simili alla mononucleosi, che dura da 3 a 10 giorni. Questa condizione scompare, ricordando il periodo di recupero dopo un'infezione influenzale.

A partire da 6-8 settimane di malattia si verifica un aumento del livello di anticorpi nel sangue, cioè la sieroconversione. Durante questo periodo si possono sviluppare linfoadenopatia generalizzata e immunodeficienza minore, ma in alcuni pazienti le manifestazioni cliniche dell'infezione da HIV sono minime. Nella sindrome da immunodeficienza acquisita grave (AIDS), si sviluppano rapidamente infezioni opportunistiche degli organi interni e il sistema nervoso viene colpito. L'attivazione della flora saprofita si osserva sulla pelle e sulle mucose. Si sviluppano il sarcoma di Kaposi e altri tumori. Possono diventare più attive infezioni come tubercolosi, sifilide, micosi profonde, ecc.. Una malattia caratteristica delle persone infette da HIV è la polmonite da Pneumocystis. In alcuni pazienti, il fegato e la milza sono ingrossati, il che è un segno sfavorevole che indica una rapida progressione del processo. Esistono forme cerebrali di infezione da HIV, come la meningite causata da lieviti, ascessi cerebrali toxoplasmici, encefalite acuta e subacuta, tumori cerebrali isolati (linfomi). I pazienti possono presentare varie lesioni vascolari.

I metodi diagnostici non specifici includono quanto segue: determinazione del contenuto delle sottopopolazioni di linfociti T nel sangue, valutazione dell'attività della reattività dei linfociti T del sangue periferico o materiale bioptico.

I metodi diagnostici specifici includono:

— rilevamento del DNA del provirus o dell'RNA del virus HIV nelle cellule umane mediante PCR;

— rilevamento di virioni infettivi maturi in fluidi biologici e cellule;

— determinazione delle proteine ​​virali solubili (antigeni);

— determinazione degli anticorpi anti-HIV (ELISA, immunoblot, reazione di agglutinazione, radioimmunoprecipitazione).

Il metodo di screening diagnostico più comune è l’ELISA. Un risultato negativo può indicare:

— sull'assenza di infezione;

— sulla conduzione dello studio prima dell'inizio della sieroconversione (durante il periodo “finestra” o durante altri periodi di scomparsa del titolo anticorpale).

I risultati positivi possono essere veri o falsi. Falsi positivi possono essere ottenuti durante l'esame di pazienti con malattie croniche infettive, autoimmuni o oncologiche, donne incinte non infette, pazienti dopo trasfusioni di sangue e pazienti con alcolismo cronico. Il primo momento per il rilevamento degli anticorpi anti-HIV è di 3-4 settimane dalla data dell'infezione.

Analisi confermativa. Immunoblot.

Dopo il test di screening, tutti i risultati positivi vengono controllati in un altro sistema di dosaggio immunoenzimatico e quindi in un test più sensibile: l'immunoblot. I sieri confermati da questo test possono essere considerati veri positivi.

Prima di effettuare un test HIV, il paziente deve essere informato (consulenza pre-test) sui motivi per cui il test è necessario e, dopo aver ricevuto il risultato, deve essere effettuata una consulenza post-test per spiegare il risultato dello studio. La riservatezza deve essere mantenuta in tutte le fasi della diagnosi e del successivo trattamento.

Esistono quattro approcci principali al trattamento dell'infezione da HIV: eziologico, immunostimolante, immunosostitutivo e patogenetico (contro le infezioni secondarie).

Gli analoghi nucleotidici o gli inibitori di altre classi hanno la capacità di sopprimere la trascrittasi inversa virale. Il primo farmaco per curare i pazienti affetti da AIDS era un analogo nucleotidico, l’azidotimidina. Il farmaco provoca effetti collaterali, che colpiscono principalmente l'ematopoiesi e nella maggior parte dei pazienti, con un uso a lungo termine (più di 6 mesi), si sviluppa resistenza ad esso. Attualmente vengono utilizzati oltre 10 nuovi farmaci: inibitori della proteasi e della trascrittasi inversa. Il processo di creazione di farmaci efficaci è notevolmente complicato dal rapido tasso di mutazione dell’HIV nel corpo, accompagnato dall’emergere di ceppi resistenti al trattamento.

Solo un approccio combinato può limitare la replicazione virale e prevenire lo sviluppo della resistenza ai farmaci. La tripla terapia antiretrovirale (una combinazione di tre farmaci basata su due analoghi nucleosidici e inibitori della proteasi) è diventata standard.

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Peggio Migliore

Sono soggetti al test per l’infezione da HIV:

2. Soggetti con diagnosi sospetta o confermata di: infezione batterica nei bambini di età inferiore a 13 anni, multipla e ricorrente; candidosi dell'esofago, della trachea, dei bronchi o dei polmoni; cancro invasivo cervicale; coccidioidomicosi disseminata o extrapolmonare; criptococcosi extrapolmonare; criptosporidiosi con diarrea per 1 mese o più; infezione da citomegalovirus di altri organi, ad eccezione del fegato, della milza, dei linfonodi in pazienti di età superiore a 1 mese; retinite da citomegalovirus con perdita della vista; infezione erpetica che provoca ulcere multifocali che non guariscono entro 1 mese, oppure bronchite, polmonite, esofagite; istoplasmosi disseminata o extrapolmonare; isosporosi con diarrea per più di 1 mese; tubercolosi diffusa o extrapolmonare; tubercolosi polmonare negli adulti o negli adolescenti di età superiore ai 13 anni; tubercolosi extrapolmonare; un'altra malattia causata da micobatteri diversi dal M. tuberculosis disseminato o extrapolmonare; polmonite causata da pneumocystis; leucoencefalopatia multifocale progressiva; Setticemia da Salmonella (eccetto Salmonella typhi), ricorrente; toxoilosi cerebrale nei bambini di età superiore a 1 mese; Sarcoma di Kaposi; polmonite interstiziale linfoide nei bambini di età inferiore a 13 anni; linfoma di Burkitt; linfoma immunoblastico; linfoma cerebrale primario; sindrome da deperimento, epatite B, portatore di HBsAg; mononucleosi infettiva; herpes zoster ricorrente nelle persone di età superiore ai 60 anni; Malattie trasmesse sessualmente.

In un laboratorio altamente specializzato si effettua:

a) determinazione di anticorpi, antigeni e immunocomplessi circolanti nel sangue; coltivare il virus, identificandone il materiale genomico e gli enzimi;

b) valutazione delle funzioni della parte cellulare del sistema immunitario. Il ruolo principale appartiene ai metodi diagnostici sierologici volti a determinare gli anticorpi, nonché gli antigeni patogeni nel sangue e in altri fluidi biologici del corpo.

Il test degli anticorpi HIV viene effettuato per:

a) sicurezza delle trasfusioni di sangue e dei trapianti;

b) sorveglianza, test volti a monitorare la prevalenza dell'infezione da HIV e studiare la dinamica della sua prevalenza in una determinata popolazione;

c) diagnosi di infezione da HIV, ovvero analisi volontaria del siero di persone praticamente sane o di pazienti con vari segni e sintomi clinici simili all'infezione da HIV o all'AIDS.

Il sistema per la diagnosi di laboratorio dell’infezione da HIV si basa su un principio in tre fasi. La prima fase è lo screening, inteso ad eseguire esami del sangue primari per la presenza di anticorpi contro le proteine ​​dell'HIV. La seconda fase è referenziale: consente, utilizzando speciali tecniche metodologiche, di chiarire (confermare) il risultato positivo primario ottenuto nella fase di screening. La terza fase è la fase esperta, destinata alla verifica finale della presenza e della specificità dei marcatori di infezione da HIV identificati nelle fasi precedenti della diagnostica di laboratorio. La necessità di diverse fasi della diagnostica di laboratorio è dovuta principalmente a considerazioni economiche.

In pratica vengono utilizzati diversi test che consentono di identificare le persone infette da HIV con un sufficiente grado di affidabilità:

Il test ELISA (saggio immunoassorbente legato all'enzima) per la rilevazione del primo livello, è caratterizzato da un'elevata sensibilità, sebbene meno specificità rispetto al seguente;

Immune blot (Western-blot), un test molto specifico e più utilizzato per distinguere tra HIV-1 e HIV-2;

Test dell'antigenemia p25, efficace nelle fasi iniziali dell'infezione;

Reazione a catena della polimerasi (PCR).

Nei casi di screening di massa di campioni di sangue, si consiglia di testare miscele di sieri provenienti da un gruppo di soggetti, compilate in modo tale che la diluizione finale di ciascun campione non superi 1:100. Se la miscela siero-corrente è positiva, viene testato ciascun siero nella miscela positiva. Questo metodo non porta ad una perdita di sensibilità sia nell'ELISA che nell'immunoblot, ma riduce i costi di manodopera e il costo dell'esame iniziale del 60-80%.

Durante la sierodiagnosi primaria dell'infezione da HIV, gli anticorpi totali vengono determinati utilizzando test di screening - ELISA e reazioni di agglutinazione. Nella seconda fase (arbitrato), viene utilizzato un test più complesso: un immunoblot, che consente non solo di confermare o rifiutare la conclusione iniziale, ma anche di farlo a livello di determinazione degli anticorpi contro le singole proteine ​​del virus.

Saggio immunoassorbente collegato(ELISA) è il metodo principale e più utilizzato per determinare gli anticorpi contro l’HIV. Ma gli svantaggi dell’utilizzo dell’ELISA nella sierodiagnosi dell’infezione da HIV includono frequenti risultati falsi positivi. A questo proposito il risultato dell'ELISA non costituisce la base per una conclusione sulla sieropositività all'HIV del soggetto. Ciò è dovuto alla purificazione insufficiente dell'immunoassorbente dalle proteine ​​di zavorra; legame spontaneo degli anticorpi sierici con la plastica, se le sue aree non occupate dall'immunoassorbente non sono sufficientemente bloccate o non sono bloccate affatto da una speciale proteina neutra; interazione crociata con le proteine ​​dell'HIV dell'immunoassorbente di varie proteine ​​presenti nel sangue di persone affette da alcuni processi patologici, spesso autoimmuni, come la sclerosi multipla, il LES, la tubercolosi; con donazioni frequenti, malattie infettive e oncologiche, ustioni, gravidanze, trasfusioni ripetute di sangue, trapianti di organi e tessuti, nonché persone in emodialisi; con la presenza del fattore reumatoide nel sangue, che spesso provoca reazioni false positive all'HIV; la presenza nel sangue delle persone in esame di anticorpi contro le proteine ​​gag dell'HIV e, soprattutto, contro la proteina p24 (ovviamente si formano anticorpi verso retrovirus eso o endogeni non ancora identificati). Poiché l'anti-p24 viene sintetizzato senza problemi nelle prime fasi della sieroconversione dell'HIV, viene effettuato un ulteriore monitoraggio immunologico dei soggetti con anticorpi contro le proteine ​​gag dell'HIV, nonché la loro esclusione dalla donazione.

La sensibilità e la specificità dei test immunoenzimatici sono in costante aumento. Di conseguenza, gli ELISA di quarta generazione non sono inferiori nelle loro capacità diagnostiche all'immunoblotting e possono essere utilizzati non solo nello screening, ma anche nella fase di conferma della diagnosi di infezione da HIV [Smolskaya T. T., 1997].

Immunoblotè il metodo finale di diagnosi sierologica, che consente di trarre una conclusione definitiva sulla positività o negatività del soggetto all'HIV.

Esiste una chiara correlazione tra i risultati dello studio dei sieri nell'immunoblotting e nell'ELISA: sieri doppi positivi in ​​ELISA con diversi sistemi di test nel 97-98% dei casi risultano poi positivi all'HIV nell'immunoblotting. Se all'ELISA i sieri risultano positivi solo in uno dei due sistemi di test utilizzati, all'immunoblot risultano positivi solo nel 4% dei casi. Nel 5% dei casi, quando si conducono studi di conferma su individui con dati positivi, l'immunoblot ELISA può dare risultati "incerti" e, tra questi, in circa il 20% dei casi, i risultati "incerti" sono causati da anticorpi contro le proteine ​​gag dell'HIV-1 (pag.55, pag.25, pag.18). La presenza di anticorpi solo contro le proteine ​​gag dell'HIV-1 è un motivo per un ulteriore esame del siero del sangue per l'infezione da HIV-2.

La valutazione dei risultati dell'immunoblotting viene effettuata rigorosamente in conformità con le istruzioni fornite con il sistema di test. Se le istruzioni non forniscono indicazioni su come interpretare i risultati, dovrebbero essere utilizzati i criteri dell’OMS.

Se si ottengono risultati positivi della ricerca nella fase di riferimento della diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV e si ottiene un risultato negativo del test di immunoblotting, viene effettuata una diagnosi specialistica ripetuta obbligatoria 6 mesi dopo il primo esame.

Se i risultati dell'immunoblotting 12 mesi dopo lo studio del primo campione rimangono negativi o indeterminati, in assenza di fattori di rischio, sintomi clinici o altri fattori associati all'infezione da HIV, il soggetto viene rimosso dall'osservazione del dispensario.

Tra i metodi sierologici, in caso di risultati indeterminati, l'immunoblot viene utilizzato come diagnosi specialistica radioimmunoprecipitazione(RIP). Si basa sull'utilizzo di proteine ​​virali marcate con iodio radioattivo e la rilevazione dei precipitati avviene mediante contatori beta. Gli svantaggi del metodo includono l'alto costo delle attrezzature e la necessità di attrezzare locali speciali per questi scopi.

Le persone con diagnosi di infezione da HIV sono soggette a un monitoraggio dinamico costante con esami di laboratorio obbligatori ogni 6 mesi.

La reazione a catena della polimerasi (PCR) rivela sequenze nucleotidiche premoltiplicate specifiche per il genoma di un dato agente patogeno. La moltiplicazione isolata di un gene o di un suo frammento, chiamata amplificazione, PCR consente di effettuare in vitro utilizzando l'enzima DNA polimerasi termostabile. In 2-3 ore la PCR consente di ottenere milioni di copie di una specifica regione del virus. Durante l'infezione da HIV, dall'RNA cellulare, compreso l'RNA del virus, se è stato riprodotto in una cellula o è stato integrato nel suo genoma, mediante trascrizione inversa e ibridazione con “sonde” oligonucleotidiche marcate, si ottiene una quantità sufficiente di DNA provirale per analisi, che viene identificata e caratterizzata quantitativamente, in relazione all'appartenenza al genoma dell'HIV, utilizzando un'etichetta radioattiva o altra sonda, stabilendo l'omologia del DNA e delle sequenze di aminoacidi specifiche del virus. La sensibilità della PCR è il rilevamento dei geni virali in una cellula su cinquemila.

La PCR, anche quantitativa, può essere utilizzata solo per determinare la carica virale nel plasma per decidere se iniziare il trattamento farmacologico di un paziente o cambiare farmaco antiretrovirale. La PCR non può essere raccomandata per diagnosticare l'infezione da HIV, poiché anche i metodi e i reagenti più all'avanguardia possono determinare la carica virale non inferiore a un certo livello: 50 copie/ml. Inoltre, la complessità del test PCR e il suo costo elevato (circa 200 dollari) ne impediscono l’uso diffuso come metodo di diagnosi di laboratorio di routine dell’infezione da HIV. Pertanto, la PCR rimane indispensabile solo per valutare la carica virale nel plasma in pazienti con una diagnosi già accertata di infezione da HIV al fine di risolvere il problema della terapia del paziente.

Le fasi della diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV sono mostrate schematicamente in Fig. 1.

Riso. 1. Fasi della diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV

Durante l’infezione da HIV c’è un periodo di “finestra oscura del laboratorio” in cui la quantità di anticorpi contro l’HIV è insufficiente per la sensibilità dei sistemi di test. Questo periodo varia da una settimana a tre mesi dal momento dell'infezione da HIV, a seconda del livello di sensibilità del sistema di test. Tenendo conto di questo fenomeno, sorgono difficoltà nell'esame del sangue donato da persone che si trovano nel periodo di infezione da HIV menzionato. Pertanto, nella maggior parte dei paesi del mondo, è stato introdotto un sistema di utilizzo del sangue solo dopo che è stato conservato per 3-6 mesi al fine di effettuare un riesame obbligatorio per l'infezione da HIV dei donatori di queste dosi di sangue e dei suoi componenti .

Lo stadio delle manifestazioni primarie è caratterizzato dall'attività del processo replicativo. La viremia e l'antigenemia che ne derivano provocano la formazione di anticorpi specifici della classe IgM: anti-p24, anti-gp41, anti-gp120. In alcune persone infette l'antigene p24 può essere rilevato nel sangue mediante ELISA già 2 settimane dopo l'infezione e può essere rilevato fino all'ottava settimana. Inoltre nel decorso clinico dell'infezione da HIV si osserva un secondo aumento del livello della proteina p24 nel sangue, che si verifica durante la formazione dello stadio dell'AIDS.

La comparsa di una sieroconversione completa, quando nel sangue periferico si registra un livello elevato di anticorpi IgG specifici contro le proteine ​​strutturali dell'HIV gp41, p24, gpl20, facilita significativamente la diagnosi di infezione da HIV. La maggior parte dei kit commerciali sono progettati per indicare proprio tali anticorpi.

Difficoltà nel rilevare gli anticorpi nei pazienti con infezione da HIV possono sorgere durante periodi di viremia e antigenemia massiccia, quando gli anticorpi specifici esistenti nel sangue vengono utilizzati per legare le particelle virali e il processo replicativo precede la produzione di nuovi anticorpi antivirali.

Negli individui con un sistema immunitario inizialmente indebolito, viremia e antigenemia compaiono prima e rimangono a livelli elevati fino all'esito della malattia. Allo stesso tempo, questi pazienti hanno un basso contenuto di anticorpi liberi contro l'HIV, per due ragioni: produzione insufficiente di anticorpi da parte dei linfociti B e legame dei virioni dell'HIV e delle proteine ​​solubili da parte degli anticorpi, pertanto, per determinare l'infezione, testare sistemi con sono necessarie una maggiore sensibilità o modifiche dei metodi di analisi per determinare lo stadio di rilascio degli anticorpi dagli immunocomplessi.

Nonostante l'abbondanza di marcatori specifici dell'infezione da HIV, quello più spesso determinato è la presenza di anticorpi totali contro le proteine ​​dell'HIV. Il termine “totale” implica la presenza di due classi di anticorpi (IgG e IgM) e di un'ampia gamma di anticorpi contro varie proteine ​​dell'HIV, principalmente strutturali.

Determinazione delle cellule CD4. Il principale indicatore clinico e di laboratorio per diagnosticare lo stadio dell'infezione da HIV e il grado di distruzione del sistema immunitario nei pazienti nella vita di tutti i giorni è diventato la determinazione del contenuto dei linfociti CD4+: una diminuzione del livello al di sotto di 200 cellule/mm3 è il criterio principale per diagnosticare l’AIDS. Si ritiene che tutti gli individui infetti da HIV con una conta linfocitaria CD4+ pari o inferiore a 200 cellule/mm3 necessitino sia di terapia antivirale che di profilassi contro la polmonite da Pneumocystis. E sebbene 1/3 delle persone infette da HIV con una conta di linfociti CO4+ inferiore a 200 cellule/mm3 non presentino manifestazioni cliniche, l'esperienza ha dimostrato che i loro sintomi si sviluppano nei prossimi 2 mesi, per cui sono tutti considerati pazienti al Fase dell'AIDS.

La diagnosi dell’infezione da HIV è un fattore importante nel percorso verso una pronta guarigione; il processo aiuta a garantire una terapia tempestiva per il paziente.

L'infezione da HIV è causata dal virus dell'immunodeficienza umana, che colpisce attivamente l'intero sistema immunitario del paziente, a causa del quale quest'ultimo viene soppresso e senza un intervento tempestivo si sviluppa l'AIDS (la nota sindrome da immunodeficienza acquisita). Comprendere come si verifica il processo patologico e come colpisce l’intero organismo aiuta a comprendere meglio perché è importante una diagnosi precoce e accurata. Esiste un enorme rischio che si sviluppino malattie che di solito non sono tipiche delle persone che hanno un sistema immunitario normale e forte. Senza un intervento tempestivo, questa condizione porterà alla morte.

Sintomi

Tutti dovrebbero conoscere i sintomi di questa comune infezione e il suo decorso. Il pericolo è che l'HIV sia una malattia a insorgenza lenta, che nelle fasi iniziali presenta sintomi non specifici, in una certa misura simili alle manifestazioni della mononucleosi. E poi la malattia rimane asintomatica per qualche tempo. Tenendo conto di ciò, è necessario conoscere ulteriori indicazioni cliniche per testare un paziente per l'HIV:

Diagnostica

La diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV, di regola, ha 3 direzioni e obiettivi principali:

1. Determinazione diretta della presenza dell'infezione da HIV nel corpo.
2. Determinare in quale degli 8 stadi si trova la malattia e identificare le malattie concomitanti in un corpo indebolito.
3. Previsione della possibile progressione durante il decorso clinico della malattia e monitoraggio costante del trattamento mediante test di screening per gli anticorpi. Monitoraggio dei possibili effetti collaterali dei farmaci antiretrovirali assunti.

Nei primi mesi, soprattutto in assenza di un trattamento adeguato, una persona infetta da HIV sperimenterà un rapido aumento del carico su tutto il corpo (cioè aumenta il contenuto di RNA infetto nel plasma). A causa della rapida infezione non solo delle cellule, ma anche del sangue e dei linfonodi, diventa possibile determinare il DNA provirale.

Il problema nel fare una diagnosi è che gli anticorpi anti-HIV non compaiono immediatamente, ma i metodi ELISA e immunoblotting rimangono i più affidabili.

In immunologia, questo fenomeno è chiamato finestra sierologica: questo è il periodo più importante dall'inizio dell'infezione fino alla comparsa di un numero tale di anticorpi che possono essere rilevati mediante test. Quanto dura questo momento dipende dallo stato del sistema immunitario di ogni persona individualmente, ma in media dura da 2 a 12 settimane. In questo momento, i test mostreranno che la persona è sana, ma in realtà è già infetta. A volte possono essere necessari fino a 3 anni, mentre gli anticorpi dell'HIV, mentre si trovano nel corpo umano, non mostrano alcun segno di attività (questo accade nel 10% delle persone infette).

La diagnosi di infezione da HIV comprende 3 fasi di analisi del sangue effettuate in un laboratorio speciale. Il primo si chiama screening e viene utilizzato per determinare se sono presenti anticorpi contro le proteine ​​dell'HIV.

Il secondo metodo diagnostico è di riferimento; utilizzando metodi speciali, il risultato dello screening primario viene chiarito o confermato. La terza fase diagnostica, detta anche fase esperta, è necessaria per la verifica finale dei marcatori dell'infezione da HIV identificati nelle fasi precedenti della diagnostica di laboratorio. Cioè, è necessario sia per confermare che per eliminare un possibile errore. Tutti questi test sono piuttosto costosi e complessi e pertanto vengono eseguiti solo in laboratori dotati di attrezzature speciali. Durante l'esame del siero del sangue, si è notato che a volte la reazione è falsa positiva o indeterminata. Ciò avviene nelle donne in gravidanza e in quelle affette da alcune malattie autoimmuni; in questo caso, i test vengono ripetuti dopo un mese e mezzo, durante il quale la concentrazione di anticorpi specifici nell'organismo raggiungerà il livello richiesto (se presente) e il risultato sarà più preciso.

Se almeno uno dei metodi di ricerca sierologica mostra un risultato positivo per l'HIV, l'ulteriore esame dovrebbe essere dinamico e regolare fino al completo ripristino delle funzioni del sistema immunitario.

Determinazione dello stadio

La malattia viene determinata come segue: circa 2 settimane dopo la sospetta infezione, viene utilizzato il metodo dell'immunoblotting; questa analisi ha la sensibilità più alta, circa il 97%. Se il risultato è negativo, viene utilizzato un altro metodo ancora più sensibile: reazione a catena della polimerasi (PCR) o ELISA. Teoricamente, questo test ultrasensibile può rilevare un DNA per 10 mg di terreno. Succede che l'immunoblotting mostri un risultato negativo, ma l'ELISA è positivo. Ciò suggerisce che in questa fase c'è un periodo iniziale di sieroconversione, cioè la concentrazione di anticorpi specifici nel corpo aumenterà e un'analisi ripetuta mediante immunoblotting mostrerà un risultato positivo dopo un po' di tempo.

Come funziona? Utilizzando il metodo della reazione a catena della polimerasi, viene prodotto un gran numero di copie dell'acido nucleico perché il virus è contenuto in un guscio proteico. Tra le copie ottenute, le cellule colpite dal virus vengono determinate in base alla loro struttura distintiva e con l'aiuto di enzimi marcati. Il problema con questo metodo è che questo metodo diagnostico è troppo costoso e non viene utilizzato di routine a meno che il paziente non sia disposto a pagarlo individualmente o in una clinica privata.

La diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV aiuta a distinguere 5 fasi di come si sviluppa la patologia. Queste fasi si svolgono allo stesso modo, l'unica differenza è nei tempi, poiché tutto dipende dallo stato del sistema immunitario di ogni singola persona.

• fase latente di incubazione;
• stadio dei segni evidenti primari;
• decorso asintomatico della malattia;
• infezione acuta da HIV senza malattie secondarie;
• forma acuta della malattia con patologie secondarie;
• stadio clinicamente latente (dura fino a 7 anni);
• stadio delle malattie secondarie;
• la fase terminale, quando praticamente i sistemi e gli organi umani sono colpiti in modo irreversibile dalla malattia.

Sulla base dei test, del numero di cellule colpite in esso contenute e delle condizioni generali, i medici possono determinare con precisione in quale stadio della malattia si trova una persona.

Periodo di incubazione. In questo momento, i virus e gli acidi nucleici colpiti dall'HIV non sono ancora stati rilevati nel sangue, quindi, entrando nella finestra sierologica asintomatica, una persona potrebbe non scoprire la sua malattia.

Stadio delle manifestazioni primarie. In questo momento compaiono i sintomi caratteristici sopra elencati, gli anticorpi si formano nel corpo.

Stadio asintomatico. Il più pericoloso, durante questo periodo della malattia, anche quei segni apparsi nella seconda fase svaniscono, la malattia passa senza sintomi evidenti.

Infezione acuta da HIV senza malattie secondarie. Un esame ripetuto del sangue del paziente rivela leucociti plasmatici larghi con una diminuzione parallela del numero di linfociti. Un aumento del contenuto del primo indica un'infiammazione che si verifica nel corpo; la maggior parte dei pazienti ha un'infezione acuta.

Infezione acuta da HIV con malattie secondarie. A causa della rapida diminuzione dei linfociti nel corpo, si sviluppa un'immunodeficienza persistente, sullo sfondo della quale compaiono varie altre malattie. Ad esempio, candidosi, polmonite, allergie, tutti i tipi di infezioni, mal di gola, ecc.

Fase latente. L'immunodeficienza progredisce, la malattia peggiora e la persona stessa perde in media il 10% del suo peso corporeo.

Stadio delle malattie secondarie. Anche questo penultimo periodo ha le sue 3 fasi, le cosiddette 4A, 4B, 4C. In assenza di un trattamento adeguato, la forza e le capacità del corpo sono notevolmente ridotte.

Stadio terminale. Una diminuzione critica delle cellule CD è inferiore a 0,05-109 cellule/l. La concentrazione anticorpale è praticamente determinata.

Esami del sangue per l'HIV nei bambini

Per molto tempo dopo la nascita, gli anticorpi materni contro l’infezione da HIV rimangono nel sangue del bambino. Un esame del sangue effettuato nel primo mese di vita del bambino potrebbe non confermare l’infezione, ma l’assenza di anticorpi anti-HIV non significa che il virus non abbia attraversato la placenta. Questi bambini devono essere osservati per i primi 3 anni, con l'esecuzione di test appropriati.

Per eliminare il più possibile l'errore, i risultati delle risposte di laboratorio dovrebbero essere considerati solo insieme ai dati dell'esame clinico generale.

La moderna diagnosi delle infezioni da HIV elimina quasi completamente i possibili errori, ad eccezione di alcuni punti, è importante approfittarne il prima possibile.