Test immunologici cutanei - principio del metodo. I test allergici nella diagnosi delle malattie atopiche. Classificazione dei test allergici cutanei

Il test cutaneo per gli allergeni è un metodo diagnostico per identificare la sensibilità individuale del corpo dovuta all'introduzione di determinate sostanze e la successiva analisi della reazione infiammatoria (gonfiore, scolorimento, dolore). L'indicazione per i test cutanei è costituita dai dati anamnestici delle allergie che mostrano il ruolo di uno o di un gruppo di allergeni nell'insorgenza della malattia.

Le controindicazioni al test cutaneo sono:

Un periodo di forte esacerbazione della malattia di base;

Manifestazione di sintomi asmatici nel paziente;

Infezioni acute (mal di gola, ARVI, influenza);

Malattie del sistema cardiovascolare;

Malattie del sangue;

Processo di tubercolosi;

Gravidanza;

Malattie epatiche e renali;

Stadio acuto di reumatismi;

Terapia ormonale a lungo termine;

Assunzione di antistaminici (Zyrtec, Claritin, Intal).

Test cutanei di scarificazione

Il luogo in cui eseguire i test cutanei di scarificazione è la superficie dell'avambraccio lungo la linea mediana (i test possono essere eseguiti sulla pelle della schiena). Allo stesso tempo, puoi eseguire 10-15 test cutanei con vari allergeni. Tuttavia, per evitare complicazioni, soprattutto in caso di ipersensibilità, si consiglia di eseguire contemporaneamente lo scratch test con solo 2-3 tipi di allergeni (soprattutto nei bambini).

Metodologia

La pelle viene pulita con alcol al 70% e lasciata asciugare. Nel terzo inferiore dell'avambraccio, a 4-6 cm dall'articolazione del polso, applicare una goccia di soluzione di istamina appena preparata (la durata massima di conservazione dell'istamina è di 6 ore). Una reazione positiva con l'istamina indica una reattività cutanea sufficiente. Una goccia del liquido di controllo del test viene applicata più in alto sull'avambraccio (controllo di una reazione negativa). Successivamente, vengono applicate gocce degli allergeni testati lungo la linea mediana a una distanza di 5 cm l'una dall'altra. Con speciali scarificatori, separati per ciascun allergene, vengono applicati due graffi lunghi fino a 6 mm attraverso l'applicazione di gocce di istamina, liquido di controllo del test e gocce di allergeni in modo da non danneggiare i vasi sanguigni della pelle. Per i bambini viene eseguito un graffio. Dopo 15 minuti, le gocce nel sito del graffio vengono tamponate con tamponi sterili, separati per ciascuna goccia.

Prova del cazzo

Il prick test è attualmente considerato più adatto alla ricerca rispetto al prick test. In questo test, il danno superficiale all'epitelio viene effettuato con un ago sottile e incompleto e la pelle viene leggermente sollevata con la punta dell'ago. Se si verifica un sanguinamento, il test non viene valutato. Nei pazienti con elevata sensibilità a determinati tipi di piante, i test cutanei vengono eseguiti sotto forma di applicazione con estratti di queste piante.

Patch test cutanei

I patch skin test vengono eseguiti su aree intatte della pelle. Inumidire un pezzo di benda di 1 cm2 e applicarlo sulla pelle, coprire la parte superiore con polietilene e fissarlo. I risultati vengono analizzati dopo 15-20 minuti, 5 ore, due giorni.

Test intradermici

In caso di risultati negativi dei prick test e dati anamnestici allergici positivi, si consiglia di effettuare test allergici intradermici con lo stesso allergene. Innanzitutto, un liquido di controllo del test viene iniettato nel terzo inferiore della superficie dell'avambraccio a una distanza di 5 cm dall'articolazione del polso, quindi 0,02 ml di ciascun allergene vengono iniettati con siringhe sterili separate a una distanza di 5 cm l'una dall'altra . La reazione viene letta dopo 20 minuti: una reazione di tipo immediato. Un numero molto limitato di pazienti con allergie ai pollini può manifestare reazioni ritardate (dopo 6, 24, 48 ore).

Complicazioni

Con test nettamente positivi, a volte si osserva una reazione generale sotto forma di esacerbazione della malattia di base (rinite, congiuntivite, broncospasmo). Nei pazienti con grave sensibilità a un determinato allergene, in casi molto rari può verificarsi, quindi l'ambulatorio dovrebbe disporre di una serie di farmaci necessari per fornire assistenza di emergenza.

Falsi positivi

La specificità della scarificazione e dei test intradermici non è assoluta. Le cause più comuni di risultati falsi positivi dei test cutanei sono l'aumentata sensibilità dei capillari cutanei allo stress meccanico o al fenolo, che è un conservante nelle soluzioni allergeniche. In questi casi, il liquido di controllo del test dà una reazione positiva. Per evitare ciò, gli strumenti devono essere trattati secondo le istruzioni per evitare la contaminazione con allergeni rimanenti da test precedenti. Eliminando le cause dei test cutanei falsi positivi, è più facile evitare errori nella diagnosi degli allergeni.

Falsi negativi

Occasionalmente, un test cutaneo dell'istamina sarà negativo. Ciò si spiega con la debole sensibilità della pelle (ridotta reattività cutanea): tale reazione è considerata un falso negativo. Per evitare risultati falsi negativi, si consiglia di sospendere antistaminici, adrenalina e ormoni 3 giorni prima della diagnosi specifica. La sensibilità dei test cutanei aumenta in questo ordine: test di scarificazione, prick test, test intradermico. In caso di test cutanei falsi negativi, il test viene ripetuto tre volte con un intervallo di 3 giorni per ottenere risultati affidabili. Alcuni pazienti potrebbero non avere anticorpi fissati nella pelle; in tali pazienti, le reazioni cutanee a questi allergeni saranno negative e dovranno essere eseguiti anche altri test (test provocatori, test ausiliari).

Test diagnostici allergici— metodi per diagnosticare le allergie. Vengono eseguiti dopo che un'accurata raccolta anamnestica ha identificato una serie di sospetti allergeni.
I test vengono eseguiti al di fuori della fase di esacerbazione della malattia e non prima di 2-3 settimane dopo una reazione allergica acuta, perché La sensibilità del corpo all'allergene diminuisce durante questo periodo.

A seconda della tecnica utilizzata, possono essere effettuati test cutanei diretto e indiretto.
Con test cutanei diretti l'allergene viene iniettato per via intradermica o danneggiando l'epidermide mediante iniezione o graffio. Per test cutanei diretti con gocciolamento e applicazione l'allergene (solitamente un farmaco o una sostanza) viene applicato sulla pelle intatta sotto forma di goccia o applicazione. La risposta cutanea è considerata positiva quando compare iperemia, infiltrazione o vescica. Può verificarsi entro 20 minuti (reazione immediata), dopo 6-12 ore (reazione transitoria), dopo 24-48 ore (reazione ritardata). Il tipo di risposta cutanea dipende dalla natura del meccanismo immunologico della reazione allergica (vedi Allergia).
Tra i test cutanei diretti di vario tipo, il più sensibile è quello intradermico, seguito dalla scarificazione, dall'iniezione, dall'applicazione e dalla flebo.

Ai test cutanei indiretti si riferisce alla reazione di Prausnitz-Küstner, in cui il siero sanguigno del paziente viene iniettato per via intradermica in una persona sana e dopo che gli anticorpi si sono fissati sulla pelle del ricevente (dopo 24 ore), l'allergene viene iniettato nello stesso punto. Lo sviluppo della reazione cutanea locale determina la presenza di anticorpi reagina nel siero in esame. Questa reazione non esclude la possibilità di trasferimento dell'agente patogeno con il siero sanguigno in presenza di un'infezione latente nel donatore, quindi il suo utilizzo è limitato.
È consigliabile rilevare gli anticorpi reagina utilizzando varie reazioni immunitarie: il metodo del test immunoenzimatico, ecc. La scelta del tipo di test cutaneo dipende dalla malattia, dal grado di sensibilità previsto, dalla natura dell'allergene e dalla reattività. della pelle. L'assunzione di alcuni farmaci (antistaminici, sedativi) riduce drasticamente la reattività cutanea, pertanto, prima di un esame allergico, è necessario astenersi dall'assumere questi farmaci per 5-7 giorni.

Nella diagnosi delle malattie allergiche, non si può fare affidamento completamente sui test cutanei e sopravvalutare i loro risultati. I test cutanei e la valutazione dei loro risultati vengono eseguiti solo da personale medico appositamente formato.

Se c'è una discrepanza tra l'anamnesi allergica e i risultati dei test cutanei durante il periodo di remissione, test provocatori . Questi test si basano sulla riproduzione delle reazioni allergiche introducendo un allergene nell'organo o nel tessuto il cui danno porta al quadro della malattia.
Esistono test provocativi congiuntivali, nasali e inalatori .
Test provocatorio congiuntivale eseguita instillando l'allergene nel sacco congiuntivale inferiore. La reazione è considerata positiva quando compaiono iperemia congiuntivale, lacrimazione e prurito delle palpebre.
Test di provocazione nasale effettuato per la rinite allergica e il raffreddore da fieno: l'allergene viene instillato in una metà del naso e un liquido di controllo nell'altra. La reazione è considerata positiva se si verificano difficoltà nella respirazione nasale e prurito sul lato dell'instillazione dell'allergene.
Test di sfida inspiratoria utilizzato ai fini della diagnosi eziologica dell'asma bronchiale: utilizzando uno spray aerosol, il paziente inala attraverso la bocca una soluzione allergenica. La reazione è considerata positiva se la capacità vitale dei polmoni diminuisce di oltre il 15%.

I test provocatori includono anche i test del freddo e del caldo, utilizzati per l'orticaria da freddo e da caldo. In assenza di chiari segni di malattia condurre un test provocatorio di esposizione . Si basa sul contatto diretto del paziente con il sospetto allergene nell'ambiente in cui abitualmente si trova il paziente.
L'opposto di questo test è prova di eliminazione - esclusione del sospetto allergene dalla dieta, trasferimento di un paziente affetto da allergie domestiche in un reparto cosiddetto esente da allergeni, ecc.
Test provocativi leucocitopenici e trombocitopenici utilizzato nella diagnosi delle allergie alimentari e delle allergie ai farmaci. Questi test si basano sulla diminuzione del numero di leucociti e piastrine nel sangue dopo la somministrazione dell'allergene in esame al paziente.

Il test cutaneo è un metodo semplice e affidabile per rilevare le IgE specifiche. Esistono test cutanei - puntura e scarificazione - e intradermici. I risultati positivi dei test cutanei (eritema e vesciche nel sito di iniezione dell'allergene) hanno valore diagnostico solo in combinazione con i dati dell'anamnesi, dei test fisici e di laboratorio.

Indicazioni e scelta degli allergeni. L'indicazione principale per i test cutanei è identificare gli allergeni, il cui contatto provoca la malattia. Quando si scelgono gli allergeni da testare, è necessario tenere conto della probabilità di contatto con essi in una determinata area (va notato che il polline, che provoca allergie, è specifico per determinate aree e i microacari, le muffe e l'epidermide animale sono gli stessi ovunque Negli Stati Uniti i preparati diagnostici e terapeutici degli allergeni vengono prodotti sotto forma di estratti concentrati o diluiti.

Esistono preparati diagnostici di allergeni per test cutanei e intradermici. La durata di conservazione degli estratti allergenici concentrati è di 2-3 anni. Dipende dalla concentrazione dei farmaci e dalla loro temperatura di conservazione. A una temperatura di conservazione di 2-8*C, gli estratti diluiti in rapporto 1:100 mantengono le loro proprietà fino a 1 anno, mentre quelli meno concentrati (1:1000) perdono attività dopo alcune settimane o mesi. A questo proposito, i preparati allergenici, soprattutto quelli diluiti, devono essere aggiornati regolarmente. I farmaci dosati in AE, così come i veleni di insetti pungenti e altri allergeni dosati in microgrammi, sono meglio conservati in forma liofilizzata.

Misure precauzionali:

Il test cutaneo non deve essere eseguito durante il broncospasmo.

È necessario eseguire un test cutaneo prima di un test intradermico, poiché il test cutaneo può rilevare una sensibilizzazione con un rischio minimo di reazione sistemica.

Poiché i test cutanei possono causare shock anafilattico, le scorte di emergenza dovrebbero essere sempre a portata di mano.

I test cutanei possono essere eseguiti da un infermiere esperto o da un assistente di laboratorio, ma sempre in presenza di un medico.

È meglio eseguire il test cutaneo sulla schiena, poiché qui è possibile testare più allergeni contemporaneamente.

Tecnica.

Prove di foratura:

La pelle viene pulita con alcol isopropilico o etilico al 70%. Per evitare che le vesciche si uniscano, la distanza tra le punture adiacenti deve essere di almeno 2 cm, i siti di puntura sono contrassegnati e ogni quinto è numerato (questo facilita la registrazione dei risultati). Su ciascun punto mirato si applica una goccia di estratto allergenico diluito 1:10, 1:20 o un preparato standardizzato non diluito e si fora la pelle. I dispositivi per perforare la pelle dovrebbero essere convenienti, economici, usa e getta e fornire anche una profondità di puntura standard. Aghi sterili da 26 G comunemente usati, aghi da cucito sterili, aghi Morrow Brown sterili e aghi Dermapik in plastica. L'ago viene fatto passare attraverso una goccia di estratto allergenico con un angolo di 45° e la pelle viene forata in modo che non fuoriesca sangue. Quando si rimuove l'ago, sollevare leggermente la pelle. L'ago non può essere riutilizzato; viene immediatamente gettato in un apposito contenitore. Gli aghi Morrow Brown e dispositivi simili hanno una lunghezza della punta di 1 mm, che fornisce una profondità di puntura standard. Gli aghi Dermapik contengono un allergene sulla punta. 15-20 minuti dopo la puntura controllare se sono comparsi eritema e vesciche. Misurando il diametro più piccolo e quello più grande del blister, calcola il valore medio in millimetri. Se appare una vescica di diametro superiore a 10 mm meno di 15 minuti dopo la puntura, rimuovere con attenzione l'allergene dalla pelle.

La reazione all'irritazione aspecifica viene valutata mediante un test di controllo negativo con un solvente. Tipicamente si tratta di soluzione salina tamponata con fosfato (pH 7,4) con aggiunta dello 0,4% di fenolo (per inibire la crescita batterica).

I test cutanei nei pazienti con dermografismo ortinario sono considerati positivi se la reazione all'allergene è più pronunciata della reazione al solvente.

Viene eseguito un test di controllo positivo con una soluzione di istamina allo 0,1%. L'area per la conduzione del campione di controllo deve essere situata ad una certa distanza dalla posizione degli altri campioni. Un test di controllo positivo (con punteggio "+++") viene utilizzato per valutare i risultati dei test sugli allergeni e consente anche di identificare la ridotta reattività cutanea osservata nei bambini, negli anziani e nei pazienti che assumono bloccanti H1.

L'applicatore multi-test è un dispositivo monouso per test con puntura, che consente la somministrazione simultanea di diversi allergeni. I risultati ottenuti utilizzando questo dispositivo coincidono con i risultati dei test intradermici, del test radioallergoassorbente e dei dati anamnestici. Il vantaggio principale dell'applicatore è che consente di standardizzare il più possibile le condizioni per l'esecuzione dei test cutanei (profondità della puntura della pelle, distanza tra le punture, dose di allergene), lo svantaggio principale è l'alto costo.

I test di scarificazione sono meno sensibili dei test di puntura e richiedono più tempo.

Se i risultati dei test di puntura sono dubbi, vengono eseguiti test intradermici. Per sviluppare una reazione positiva durante il test intradermico, è necessaria una dose inferiore di allergene. L'allergene che ha causato un test di puntura positivo, se somministrato per via intradermica, può portare a una reazione locale pronunciata e persino sistemica. Se meno di cinque test di puntura risultano positivi, è possibile eseguire immediatamente i test intradermici. Se i test di puntura risultano più positivi, il giorno successivo vengono eseguiti i test intradermici. Per evitare una reazione sistemica, i test intradermici con allergeni cross-reattivi, in particolare estratti vegetali, vengono eseguiti in giorni diversi. La selezione degli allergeni tenendo conto delle condizioni climatiche e geografiche e dei dati anamnestici ci consente di ridurre al minimo il numero di campioni. Non vengono eseguiti test intradermici con allergeni alimentari.

Test intradermici:

Per i test intradermici si utilizzano estratti allergenici alla diluizione 1:100. Come controllo positivo viene utilizzata una soluzione di istamina allo 0,01%, la cui reazione viene valutata come “+++”; come controllo negativo viene utilizzato un solvente. La distanza tra i siti di iniezione dell'allergene e i campioni di controllo dovrebbe essere maggiore rispetto a quando si eseguono test di puntura.

Per i test intradermici, utilizzare il terzo superiore della superficie interna dell'avambraccio o la superficie esterna della spalla. Nei bambini di età compresa tra 2 e 5 anni è più conveniente iniettare gli allergeni nella pelle della schiena.

La pelle viene pulita con alcool e vengono contrassegnati i siti di iniezione, la distanza tra i quali deve essere di almeno 2,5 cm.

0,1 ml di estratto allergenico vengono aspirati in una siringa da tubercolina sterile monouso. Poiché la comparsa di una vescica durante l'iniezione intradermica di aria può essere confusa con una reazione positiva, è necessario rimuovere completamente le bolle d'aria dalla siringa.

La pelle viene tesa e l'ago viene inserito con un angolo di 45* con il taglio rivolto verso il basso. Il taglio dell'ago deve essere completamente immerso nella pelle.

Dopo aver iniettato circa 0,02 ml di soluzione, dovrebbe formarsi una papula del diametro di 1-3 mm. Se la soluzione penetra sotto la pelle o fuoriesce, non c'è papula. In questo caso, l'allergene viene reintrodotto in un'altra posizione.

La reazione viene valutata dopo 15-30 minuti. Esistono due modi per valutare i risultati. Secondo uno di essi vengono misurati i diametri massimo e minimo dell'eritema e della vescica, quindi viene calcolato il valore medio, come quando si valutano i risultati dei test cutanei; secondo l'altro viene misurato solo il diametro massimo. Per rendere più chiaramente visibili i confini della vescica, la pelle attorno ad essa viene schiacciata con due dita. Nel valutare i risultati, prestare attenzione alla forma del blister. Se i confini della vescica non sono uniformi, ciò viene annotato nel protocollo dello studio.

Alcuni autori preferiscono introdurre prima soluzioni più diluite di allergeni, ad esempio 1:100.000, e poi soluzioni la cui concentrazione viene successivamente aumentata di 10 volte. Per ciascun allergene viene prelevata la dose massima consentita; in assenza di reazione al suo raggiungimento il campione è considerato negativo.

Test diagnostici allergici - Metodi diagnostici delle allergie. Vengono eseguiti dopo che un'accurata raccolta anamnestica ha identificato una serie di sospetti allergeni. I test vengono eseguiti al di fuori della fase di esacerbazione della malattia e non prima di 2-3 settimane dopo aver subito una reazione allergica acuta, perché La sensibilità del corpo all'allergene diminuisce durante questo periodo.

A seconda della tecnica utilizzata, i test cutanei possono essere diretti o indiretti. Per i test cutanei diretti, l'allergene viene iniettato per via intradermica o danneggiando l'epidermide pungendo o grattando. Nei test cutanei diretti con gocce e cerotti, l’allergene (solitamente un farmaco o una sostanza) viene applicato sulla pelle intatta sotto forma di goccia o cerotto. La risposta cutanea è considerata positiva quando compare iperemia, infiltrazione o vescica. Può verificarsi entro 20 minuti (reazione immediata), dopo 6-12 ore (reazione transitoria), dopo 24-48 ore (reazione ritardata). Il tipo di risposta cutanea dipende dalla natura del meccanismo immunologico della reazione allergica. Tra i test cutanei diretti di vario tipo, il più sensibile è quello intradermico, seguito da scarificazione, iniezione, applicazione e flebo.

I test cutanei indiretti includono la reazione di Prausnitz-Küstner, in cui il siero sanguigno del paziente viene somministrato per via intradermica a una persona sana e dopo che gli anticorpi si sono fissati sulla pelle del ricevente (dopo 24 ore) l'allergene viene iniettato nello stesso punto. Lo sviluppo della reazione cutanea locale determina la presenza di anticorpi reagina nel siero in esame. Questa reazione non esclude la possibilità di trasferimento dell'agente patogeno con il siero sanguigno in presenza di un'infezione latente nel donatore, quindi il suo utilizzo è limitato. È consigliabile rilevare gli anticorpi reagina utilizzando varie reazioni immunitarie: il metodo del test immunoenzimatico, ecc. La scelta del tipo di test cutaneo dipende dalla malattia, dal grado di sensibilità previsto, dalla natura dell'allergene e dalla reattività. della pelle. L'assunzione di alcuni farmaci (antistaminici, sedativi) riduce drasticamente la reattività cutanea, pertanto, prima di un esame allergico, è necessario astenersi dall'assumere questi farmaci per 5-7 giorni.

Nella diagnosi delle malattie allergiche, non si può fare affidamento completamente sui test cutanei e sopravvalutare i loro risultati. I test cutanei e la valutazione dei loro risultati vengono eseguiti solo da personale medico appositamente formato.

Se c'è una discrepanza tra la storia delle allergie e i risultati dei test cutanei durante il periodo di remissione, sono indicati i test provocativi. Questi test si basano sulla riproduzione delle reazioni allergiche introducendo un allergene nell'organo o nel tessuto il cui danno porta al quadro della malattia. Esistono test provocativi congiuntivali, nasali e inalatori. Un test di provocazione congiuntivale viene eseguito instillando l'allergene nel sacco congiuntivale inferiore. La reazione è considerata positiva quando compaiono iperemia congiuntivale, lacrimazione e prurito delle palpebre. Viene eseguito un test di provocazione nasale per la rinite allergica e il raffreddore da fieno: un allergene viene instillato in una metà del naso e un liquido di controllo nell'altra. La reazione è considerata positiva se si verificano difficoltà nella respirazione nasale e prurito sul lato dell'instillazione dell'allergene. Ai fini della diagnosi eziologica dell'asma bronchiale viene utilizzato un test di provocazione inalatoria: utilizzando uno spray aerosol, il paziente inala una soluzione allergenica attraverso la bocca. La reazione è considerata positiva se la capacità vitale dei polmoni diminuisce di oltre il 15%.

I test provocatori includono anche i test del freddo e del caldo, utilizzati per l'orticaria da freddo e da caldo. In assenza di chiari segni della malattia, viene eseguito un test provocatorio dell'esposizione. Si basa sul contatto diretto del paziente con il sospetto allergene nell'ambiente in cui abitualmente si trova il paziente. L'opposto di questo test è un test di eliminazione: esclusione del sospetto allergene dalla dieta, trasferimento di un paziente affetto da allergie domestiche in un cosiddetto reparto privo di allergeni, ecc. I test provocativi leucocitopenici e trombocitopenici vengono utilizzati nella diagnosi di allergie alimentari e allergie ai farmaci. Questi test si basano sulla diminuzione del numero di leucociti e piastrine nel sangue dopo la somministrazione dell'allergene in esame al paziente.

ISTRUZIONI METODOLOGICHE

1.Reazione di precipitazione dell'anellosecondo Ascoli. In una stretta provetta contenente una piccola quantità di siero precipitante non diluito, mantenendola in posizione inclinata, si stratifica lentamente con una pipetta lungo la parete lo stesso volume di Ag. estratto mediante bollitura da varie materie prime agricole. Per evitare di mescolare i due liquidi, la provetta viene posizionata con attenzione in verticale. Se la reazione in provetta è positiva, dopo 5-10 minuti appare un anello bianco-grigiastro sul confine tra il siero e l'estratto da testare. La reazione è necessariamente accompagnata da controlli di siero e antigene.

La reazione Ascoli viene utilizzata per identificare l'antrace, la tularemia e la peste Ag. Ha trovato applicazione anche nella medicina legale per determinare le specie di proteine, in particolare le macchie di sangue, nella pratica sanitaria quando si identificano adulterazioni di carne, pesce, prodotti farinacei e impurità nel latte. Lo svantaggio di questo RP è l'instabilità del precipitato (anello), che scompare anche con una leggera agitazione. Inoltre non può essere utilizzato per determinare la composizione quantitativa degli Ag coinvolti nella formazione del precipitato.

Reazioni di neutralizzazione delle tossine con siero antitossico in vitro.

2. Rilevazione della tossigenicità dell'agente eziologico della difterite nella reazione del precipitatozioni in gel secondo Ouchterlony. La reazione viene condotta su piastre Petri nei pozzetti di gel di agar. L'agar trasparente ben lavato viene utilizzato come gel. Ag e siero vengono aggiunti al gel di agar in modo che i pozzetti che li contengono siano ad una certa distanza. Diffondendosi l'uno verso l'altro e combinandosi tra loro, l'anticorpo e l'antigene formano dopo 24-48 ore un complesso immunitario sotto forma di una striscia bianca. In presenza di un precipitinogeno complesso compaiono diverse bande. In questo caso, le bande di antigeni sierologicamente correlati si fondono e le bande di dissimili si intersecano, il che consente di determinare i dettagli della struttura antigenica delle sostanze studiate. Ampiamente usato per diagnosticare malattie causate da virus e batteri che producono esotossine.

I test cutanei, essendo uno dei principali metodi di diagnosi specifica, non possono sempre essere utilizzati. Le seguenti sono controindicazioni al loro utilizzo:
- 1. Periodo di inasprimento di una malattia allergica;
- 2. Malattie acute intercorrenti (ARVI, bronchite, ecc.). In entrambi i casi, è possibile eseguire un test cutaneo 3-4 settimane dopo il sollievo;
- 3. Malattie scompensate e sottocompensate del sistema cardiovascolare, fegato e reni, sistema endocrino;
- 4. Reumatismi in periodi acuti e subacuti;
- 5. Processo di tubercolosi nella fase acuta. Per gli ultimi tre gruppi di patologie il test cutaneo può essere eseguito dopo 6 mesi di remissione clinica e laboratoristica;
- 6. Malattie ematiche maligne e malattie tumorali;
- 7. Malattie mentali e neurologiche. Negli ultimi due gruppi di malattie i test cutanei sono assolutamente controindicati;
- 8. Trattamento a lungo termine con ormoni corticosteroidi. Il test cutaneo è possibile non prima di 3 mesi dopo la loro interruzione;
- 9. Storia precedente di shock anafilattico (una controindicazione assoluta per il test cutaneo);
- 10. Il periodo in cui il paziente assume antistaminici, anti-liberatori (ketotifen, zaditen, intal), xantine, agonisti adrenergici, che possono sopprimere la reazione allergica cutanea. Questi farmaci devono essere interrotti 3-5 giorni prima del test cutaneo.

La sottovalutazione delle controindicazioni e il mancato rispetto delle regole fondamentali per l'esecuzione dei test cutanei può portare a complicazioni o risultati poco chiari (falsi positivi, falsi negativi), che possono portare ad una diagnosi eziologica errata e ad una terapia inadeguata.

Le cause dei risultati falsi positivi possono includere un'alterata reattività cutanea; aumento della sensibilità della pelle alle irritazioni meccaniche; aumento della sensibilità del paziente al fenolo, che fa parte delle soluzioni allergeniche e del liquido di controllo del test (in tutti questi casi si nota un risultato positivo dei test cutanei con tutti gli allergeni e il liquido di diluizione); contaminazione delle siringhe con allergeni rimasti da test precedenti (pertanto, gli strumenti devono essere trattati secondo le istruzioni ed è necessaria la loro marcatura); aumento individuale della distruzione spontanea dei mastociti; la presenza di reazioni crociate con allergeni correlati, ad esempio tra polline o tra polline e cibo.

Le ragioni dei risultati falsi negativi sono la ridotta reattività cutanea (come evidenziato da un test dell'istamina negativo); condurre test mentre i pazienti assumono antistaminici, anti-liberatori, adrenomimetici e ormoni glucocorticoidi; violazione della tecnica (somministrazione sottocutanea dell'allergene anziché intradermica, profondità di scarificazione insufficiente); mancanza di anticorpi nella pelle (questo è particolarmente frequente nei bambini del primo anno di vita, poiché le loro reazioni sono debolmente fissate nella pelle); assenza dell'allergene “colpevole” nel kit utilizzato per i test cutanei.

Se sussistono controindicazioni al test cutaneo o se si ottengono risultati falsi positivi e falsi negativi, è possibile utilizzare un test cutaneo indiretto: la reazione di trasferimento passivo di ipersensibilità (RPH) di Prausnitz-Küstner, che consente di identificare potenziali allergeni senza rischi per la pelle. paziente.

Il PKK viene effettuato sulla pelle di una persona sana, il ricevente. La reazione si basa sul rilevamento degli anticorpi reagina nel siero del paziente che, una volta introdotti nella pelle del ricevente, si fissano sui mastociti del derma e, con la successiva introduzione dell'allergene corrispondente in quest'area, il sistema immunitario risultante complesso provoca la formazione di una vescica e iperemia dovuta al rilascio di istamina dai mastociti. La reazione cutanea viene valutata in base alla loro dimensione.

Le indicazioni per l'RPC sono: 1) tutte le condizioni dei pazienti in cui il test cutaneo diretto è controindicato; 2) risultati poco chiari dei test cutanei, loro discrepanza con i dati dell'anamnesi; 3) diagnosi differenziale dei risultati dei test cutanei subclinici e falsi positivi; 4) risultato falso negativo dei test cutanei diretti.