Descrizione del Bacillus subtilis. Utilizzare durante la gravidanza e l'allattamento. Testo del lavoro scientifico sul tema "Meccanismi d'azione dei probiotici a base di Bacillus subtilis"

Bacillus subtilis O bastone di fieno(lat. Bacillus subtilis) - un tipo di batteri aerobi sporigeni gram-positivi, rappresentanti del genere Bacillus ( Bacillo). Bacillus subtilis- uno dei microrganismi più ben studiati.

Nome bastone di fieno si verifica perché in precedenza Bacillus subtilis isolato esclusivamente da decotti di fieno. Bacillus subtilis ha l'aspetto di un bastoncino diritto incolore, di circa 0,7 micron di spessore e 2-8 micron di lunghezza. Bacillus subtilis Può riprodursi per divisione e spore. A volte separati Bacillus subtilis, dopo la divisione trasversale, rimangono collegati in fili.

Bacillus subtilis(bacillus subtilis), per gli antibiotici che produce e la capacità di acidificare l'ambiente, è antagonista di microrganismi patogeni ed opportunisti, come salmonella, proteus, stafilococchi, streptococchi, funghi lieviti; produrre enzimi che rimuovono i prodotti di decadimento dei tessuti putrefattivi; sintetizzare aminoacidi, vitamine e fattori immunoattivi. Alcuni ceppi Bacillus subtilis sono produttori di acido ialuronico.

Bacillus subtilis può causare intossicazione alimentare umana (codice ICD-10 A05.4).

Bacillus subtilis - principio attivo medicinali

Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) è il principio attivo di alcuni farmaci. In questo contesto, il termine “Bacillus subtilis” si riferisce a uno o più ceppi specifici di batteri della specie Bacillus subtilis. Secondo l'indice farmacologico, il Bacillus subtilis appartiene ai gruppi “Antidiarroici” e “Altri immunomodulatori”. Secondo l'ATC, Bacillus subtilis ha il codice “A07FA Microrganismi antidiarroici”. Indicazioni per l'uso di Bacillus subtilis:

• infezioni intestinali acute nei bambini
• disbiosi intestinali di varia natura
• vaginosi batterica
• prevenzione delle complicanze purulento-settiche nel periodo postoperatorio.

La massa microbica liofilizzata di un ceppo vivente antagonisticamente attivo viene utilizzata come principio attivo dei farmaci Bacillus subtilis 534 o ceppo Bacillus subtilis 3H,
selezionato per la resistenza cromosomica all'antibiotico - rimfapicina da un ceppo di produzione Bacillus subtilis 534. Imprese russe 48 Istituto centrale di ricerca del Ministero della difesa russo FGU, Ekaterinburg, ZAO Biopharma e diverse imprese ucraine producono il farmaco Biosporin contenente una miscela Bacillus subtilis ceppo 2335 (chiamato anche Bacillus subtilis 3) e Bacillus licheniformis 2336 (chiamato anche Bacillus licheniformis 31) in un rapporto di 3:1.

Medicinali in cui si trovava il principale ingrediente attivo Bacillus subtilis:(ceppo 534), Bactisporina (ceppo N 3H).

Preparati a base di Bacillus subtilis Bacillus subtilis(Sporobacterin, Biosporin, Bactisporin) e microorganismi simili Bacillus cereus(Bactisubtil) hanno attività antimicrobica e possono essere utilizzati per le infezioni batteriche quando è impossibile assumere antibiotici o per la decontaminazione selettiva dell'intestino tenue nella sindrome da sovracrescita batterica. Le spore di questi batteri, trasformandosi in forme attive nel colon, durante la loro vita producono metaboliti acidi - acidi organici. Allo stesso tempo, il pH nel colon si sposta verso il lato acido e viene soppressa la crescita di microrganismi patogeni e opportunisti (Belousova E.A., Zlatkina A.R.).

La composizione del farmaco Enzymtal, il cui permesso per l'uso in Ucraina (poi ritirato) contiene amilasi fungina, un enzima amilolitico ottenuto dai funghi Aspergillus oryzae e colture batteriche non patogene Bacillus subtilis(Kirik D.L., Polyakova I.F.).

Bacillus subtilis - probiotico

Oltre ai farmaci probiotici sopra elencati, ceppi Bacillus subtilis sono inclusi negli integratori alimentari. In Russia, integratori alimentari contenenti Bacillus subtilis: Baktistatin, Supradin Kinder gel (prodotto in Germania), Vetom e altri.

L'integratore alimentare di bactistatina contiene metaboliti di un liquido di coltura privo di cellule Bacillus subtilis ceppo 3 (inclusa vitamina E), carrier zeolite, idrolisato di farina di soia fermentata, agente antiagglomerante stearato di calcio (o aerosil), ingredienti della capsula (gelatina medica, biossido di titanio, indigotina). La baktistatina è raccomandata da vari autori, in particolare, per la correzione della sindrome da proliferazione batterica lieve (Loginov V.A.), come rimedio aggiuntivo: per la sindrome insufficienza intestinale(Levchenko S.A.), H. pylori- gastrite associata (Grischenko E.B.) e altri.

Tensioni Bacillus subtilis utilizzato in una gamma di medicinali e prodotti veterinari e agricoli. In particolare, il probiotico “Subtilis” (forma liquida “Subtilis-Z” e polvere “Subtilis-S”), che comprende una massa microbica di spore batteriche viventi Bacillus subtilis E Bacillus licheniformis utilizzato nel bestiame, nel pollame e nella piscicoltura per la prevenzione e il trattamento delle malattie gastrointestinali eziologia batterica, disbatteriosi, infezioni polmonari, aumento della produttività, ottenimento di prole sana, soppressione della crescita di microrganismi patogeni e condizionatamente patogeni (

Tesi

Gataullin, Airat Gafuanovich

Titolo accademico:

Candidato di Scienze Biologiche

Luogo di discussione della tesi:

Codice specialità HAC:

Specialità:

Microbiologia

Numero di pagine:

ARTICOLO DI LETTERATURA

Capitolo 1. Antagonismo microbico: la base per la creazione di farmaci bioterapeutici per la correzione delle condizioni disbiotiche

Capitolo 2. Probiotici sporali e loro effetti sul macroorganismo

2.1. Preparati di batteri del genere Bacillus

2.2. Rappresentazioni moderne sui meccanismi dell'azione terapeutica e profilattica dei probiotici da batteri del genere Bacillus

2.3. Sostanze biologicamente attive prodotte dall'attività aerobica sporigeno batteri

2.4. Fattori patogeni dei batteri del genere Bacillus 34 RICERCA PROPRIA

Capitolo 3. Oggetti e metodi di ricerca

3.1. Oggetti di ricerca

3.2. Metodi di ricerca 43 3.2.1. Attrezzature e tecniche

Capitolo 4. Caratteristiche dei ceppi isolati

4.1. Studio delle proprietà morfologiche e fisiologico-biochimiche dei ceppi

4.2. Attività antagonista e adesiva dei ceppi di B.subtilis negli esperimenti in vitro

4.3. Definizione resistenza agli antibiotici e profilo plasmidico dei ceppi di B.subtilis

Capitolo 5. Effetto del ceppo B.subtilis 1719 sul macroorganismo

5.1. Studio di tossicità, tossigenicità, virulenza e attività probiotica del ceppo B.subtilis 1719 in esperimenti in vivo

5.2. Studio dell'influenza del ceppo B. subtilis 1719 sui parametri immunitari in esperimenti in vivo con disbiosi sperimentale

Capitolo 6. Caratteristiche tecnologiche del ceppo B.subtilis 1719 come base di un preparato probiotico

6.1. Valutazione delle proprietà di crescita su vari terreni nutritivi liquidi

6.2. Studio della vitalità e dell'attività antagonista del ceppo B.subtilis 1719 durante la conservazione

Capitolo 7. Caratteristiche comparative proprietà del ceppo B.subtilis\l\9 e dei ceppi che costituiscono la base di alcune preparazioni probiotiche commerciali. CONCLUSIONE

Introduzione della tesi (parte dell'abstract) Sul tema "Proprietà biologiche dei ceppi di Bacillus subtilis promettenti per la creazione di nuovi probiotici"

Rilevanza del problema

Allo stato attuale della microbiologia medica, sono comparsi nuovi dati che confermano l'uso della microflora saprofita, che è in grado di produrre sostanze biologicamente attive (BAS) durante i loro processi vitali che sopprimono la crescita di microrganismi patogeni, tumori maligni e normalizzano varie patologie e processi biochimici nel corpo umano.

Nell'ultimo decennio, i prodotti biologici basati su colture microbiche viventi sono stati ampiamente utilizzati per la prevenzione e il trattamento delle malattie del tratto gastrointestinale. sporigeno

I batteri del genere Bacillus, uno dei gruppi di microrganismi più diversi e diffusi, sono componenti importanti della flora esogena dell'uomo e degli animali.

Il genere Bacillus ha attirato l'attenzione dei ricercatori fin dall'antichità. Le conoscenze accumulate nel campo della microbiologia, fisiologia, biochimica e genetica dei batteri indicano i vantaggi dei Bacillus come produttori biologici sostanze attive: enzimi, antibiotici, insetticidi. L'elevata adattabilità alle varie condizioni di vita (presenza o assenza di ossigeno, crescita e sviluppo in un ampio intervallo di temperature, uso di vari composti organici o inorganici come fonti di cibo, ecc.) contribuisce alla diffusione dei bacilli nel suolo, nell'acqua, aria, prodotti alimentari e altri oggetti dell'ambiente esterno, nonché nel corpo di esseri umani e animali.

La diversità dei processi metabolici, la variabilità genetica e biochimica, la resistenza agli enzimi litici e digestivi, sono serviti come base logica per l'uso dei bacilli in vari campi della medicina. La Food and Drug Administration statunitense ha assegnato al Bacillus subtilis GRAS (generalmente considerato sicuro) lo status di organismo completamente sicuro, che è prerequisito per l’utilizzo di questi batteri nella produzione di medicinali.

L'attività dei bacilli si manifesta contro una vasta gamma di microrganismi patogeni e condizionatamente patogeni. Grazie alla sintesi di vari enzimi e altre sostanze, regolano e stimolano la digestione, hanno effetti anallergici e antitossici. Quando si utilizzano i bacilli, la resistenza non specifica del macroorganismo aumenta in modo significativo. Questi microrganismi sono facili da produrre, stabili a magazzino e, soprattutto, rispettosi dell’ambiente.

I farmaci terapeutici e profilattici basati su microbi viventi non patogeni, in grado di fornire, attraverso un metodo di somministrazione naturale, effetti benefici sulle funzioni fisiologiche e biochimiche dell'organismo ospite attraverso l'ottimizzazione del suo stato microbiologico, sono attualmente classificati come farmaci probiotici.

Tra i bacilli, i ceppi di B. subtilis sono di maggiore interesse. In termini di conoscenza delle proprietà genetiche e fisiologiche, occupano il secondo posto dopo l'E. coli. Il grande potenziale di B. subtilis in biotecnologia è evidenziato dalla creazione di una banca dati sulla genetica molecolare di questo ceppo - SubtiList, nella quale sono inserite tutte le informazioni sul genoma batterico.

L'analisi dei risultati della ricerca scientifica condotta nel nostro Paese e all'estero indica l'entità dell'utilizzo dei batteri del genere Bacillus per ottenere prodotti dalla biomassa batterica o dai loro metaboliti. Metodi conosciuti coltivazione

Sulla base di batteri viventi del genere Bacillus, sono stati creati preparati probiotici che sono innocui per il macroorganismo, hanno una vasta gamma di effetti terapeutici e profilattici e sono sicuri per l'ambiente. I risultati sull’utilizzo di colture microbiche vive del genere Bacillus per il trattamento delle malattie gastrointestinali nell’uomo e negli animali da allevamento sono di grande importanza scientifica e pratica.

Attualmente, i noti farmaci probiotici sono ampiamente utilizzati nell'assistenza sanitaria pratica: bactisubtil, sporobacterin, biosporin, bactisporin, subalin, cereobiogen, enterogermin e altri.

Le indicazioni per l'uso terapeutico e l'efficacia terapeutica di questi farmaci sono limitate dalle proprietà dei ceppi utilizzati per la loro produzione. Di importanza decisiva è lo spettro di attività antagonista contro i microrganismi patogeni e opportunisti che causano disturbi microecologici in vari biotopi del corpo umano o animale. Inoltre, non si può ignorare la capacità dei bacilli di produrre sostanze biologicamente attive (antibiotici polipeptidici, enzimi, ecc.) e la loro resistenza agli antibiotici.

Diversità ed emergenti resistenza agli antibiotici microrganismi coinvolti nello sviluppo di disturbi disbiotici, da un lato, e nella variabilità biosintetico opportunità per ceppi diversi B.subtilis, invece, consigliano un monitoraggio costante dei ceppi che hanno attività probiotica mirata e/o sono produttori di diverse sostanze biologicamente attive.

Obiettivo del lavoro:

Studiare le proprietà biologiche di ceppi isolati di B. subtilis e valutare la possibilità del loro utilizzo per lo sviluppo di un probiotico sporale originale.

Gli obiettivi della ricerca:

1. Studiare le proprietà morfologiche, fisiologiche-biochimiche, antagoniste, adesive e altre proprietà delle colture isolate di B. subtilis in esperimenti in vitro e selezionare il ceppo più promettente per ulteriori ricerche.

2. Valutare l'attività probiotica del ceppo B.subtilis selezionato in esperimenti in vivo.

3. Selezionare un mezzo nutritivo ottimale per l'accumulo di biomassa del ceppo B.subtilis studiato.

4. Determinare la vitalità e l'attività antagonista del ceppo B.subtilis selezionato durante la conservazione.

5. Confrontare le proprietà del ceppo originale di B. subtilis e delle colture utilizzate per la produzione di preparati probiotici commerciali.

Novità scientifica.

Sulla base dello studio delle proprietà morfologiche, fisiologiche-biochimiche, genetiche e di altro tipo dei ceppi isolati, è stato selezionato un ceppo privo di plasmidi B. subtilis 1719, che mostra antagonismo contro microrganismi condizionatamente patogeni e patogeni di vari tassonomico gruppi, con bassa attività adesiva, resistenti a gentamicina, polimixina ed eritromicina.

Gli approcci alla creazione della tecnologia di produzione sono stati comprovati sperimentalmente, compreso lo studio delle proprietà di crescita del ceppo B. subtilis 1719 sui terreni nutritivi originali, le condizioni per stabilizzare la sua vitalità e l'attività antagonista come fasi nell'ottenimento di un nuovo farmaco probiotico.

È stata presentata domanda di invenzione (n. 2005111301 del 19 aprile 2005): "Il ceppo batterico Bacillus subtilis 1719 è un produttore di biomassa antagonisticamente attiva contro i microrganismi patogeni, nonché di enzimi proteolitici, amilolitici e lipolitici".

Significato pratico.

Il ceppo isolato e identificato B.subtilis 1719 è stato depositato nella Collezione Statale delle Culture GISC da cui prende il nome. J.I.A. Tarasevich con il n. 277 e può essere raccomandato per lo sviluppo della tecnologia industriale per la produzione di un farmaco probiotico bioterapeutico originale.

Principali provvedimenti presentati a difesa:

1. I tre ceppi identificati di colture batteriche corrispondono alla specie B. subtilis per proprietà morfologiche, fisiologiche, biochimiche e di altro tipo. Non contengono plasmidi, sono antagonisticamente attivi contro batteri opportunistici e patogeni di diversi gruppi tassonomici e hanno un livello di adesione basso o medio.

2. Il ceppo B.subtilis 1719 ha proprietà probiotiche, manifestate nell'eliminazione di microrganismi opportunistici e patogeni con il ripristino della composizione quantitativa e qualitativa della microflora normale nella disbiosi sperimentale, e ha anche un effetto immunomodulatore sul macroorganismo.

3. Sulla base delle sue caratteristiche tecnologiche, il ceppo B.subtilis 1719 può essere indicato come candidato per la creazione di un farmaco probiotico originale.

ARTICOLO DI LETTERATURA

Conclusione della tesi sul tema "Microbiologia", Gataullin, Airat Gafuanovich

1. Sulla base delle proprietà morfologiche e fisiologico-biochimiche, i ceppi isolati sono stati identificati come B.subtilis. Non sono stati trovati plasmidi nelle preparazioni di DNA di ceppi di B. subtilis, il che indica apparentemente il controllo cromosomico della resistenza agli antibiotici.

2. Utilizzando un modello di disbiosi di topo bianco, è stata dimostrata l'attività probiotica del ceppo B.subtilis 1719, che si manifesta nell'eliminazione di microrganismi opportunistici e patogeni con il ripristino della qualità e composizione quantitativa microflora normale.

3. Il terreno ottimale per l'accumulo di biomassa durante la coltivazione del ceppo B.subtilis 1719 è il terreno VK-2 con l'aggiunta di glucosio o saccarosio come fonte di carboidrati.

4. È stato stabilito che il ceppo B.subtilis 1719 conserva la vitalità e l'attività antagonista allo stato liofilizzato con uno stabilizzatore di saccarosio-gelatina per almeno 4 anni (periodo di osservazione), in forma liquida stabilizzata con una soluzione di NaCl al 7% - 2 anni e 1 anno in presenza di acqua distillata o soluzione di glicerina al 10%.

5. Antagonisticamente attivo, poco adesivo, un ceppo non tossico e privo di plasmidi di B. subtilis 1719, che possiede attività probiotica e immunomodulante, è depositato nella Collezione statale di colture GISC da cui prende il nome. J1.A. Tarasevich.

6. Il ceppo B.subtilis 1719 (277), sulla base delle sue proprietà biologiche e delle caratteristiche tecnologiche di base, è promettente per l'uso nello sviluppo di nuovi preparati probiotici.

CONCLUSIONE

Le scoperte e le conquiste della moderna scienza biologica e medica hanno permesso di sviluppare e mettere in pratica nuovi prodotti biologici: i probiotici. Questi medicinali sono basati su colture microbiche vive. Al centro effetto terapeutico Questi farmaci hanno un pronunciato antagonismo microbico nei confronti dei ceppi patogeni e condizionatamente patogeni - agenti patogeni. Nel processo terapeutico, non meno importante è l’attività immunomodulante dei probiotici. I vantaggi innegabili dei farmaci ottenuti da batteri viventi rispetto ai farmaci sintetizzati chimicamente sono la loro innocuità, le loro proprietà fisiologiche per il corpo umano e l'assenza di reazioni allergiche. Già ora i probiotici hanno assunto una posizione di leadership nella correzione della microflora del tratto gastrointestinale, nei disturbi metabolici, nel trattamento delle conseguenze di farmaci antibatterici, chemioterapici, ormonali e radioterapia. Uno studio sul fenomeno della traslocazione batterica ha dimostrato che i probiotici possono sostituire con successo gli antibiotici e gli enzimi proteolitici nella prevenzione e nel trattamento di varie infezioni chirurgiche.

Nell'ultimo decennio, i prodotti biologici basati su colture microbiche viventi sono stati ampiamente utilizzati per la prevenzione e il trattamento delle malattie del tratto gastrointestinale. sporigeno batteri

La diversità dei processi metabolici, la variabilità genetica e biochimica, la resistenza agli enzimi litici e digestivi, sono serviti come base logica per l'uso dei bacilli in vari campi della medicina. Questi microrganismi sono facili da produrre, stabili durante lo stoccaggio e, soprattutto, rispettosi dell'ambiente.

L'elevata attività dei ceppi contro una serie di colture di prova non garantisce la sua attività contro le altre. A questo proposito, l’uso dei probiotici con spore è limitato a scopi terapeutici specifici. La variabilità delle forme nosologiche delle malattie settiche purulente e la diversità dei microrganismi eziologicamente significativi per lo sviluppo di disturbi disbiotici determinano i requisiti per il prodotto biologico utilizzato. Ciò incoraggia i ricercatori a selezionare continuamente i ceppi antagonisti con le proprietà desiderate.

I ceppi da noi studiati avevano proprietà morfologiche e fisiologico-biochimiche tipiche dei rappresentanti di B. subtilis, ed erano caratterizzati da un insieme di enzimi che scompongono vari substrati.

Secondo la letteratura, B.subtilis ha proprietà antagoniste pronunciate contro una vasta gamma di microrganismi patogeni e un'elevata attività enzimatica, grazie alla quale normalizzano i processi digestivi e forniscono anche un effetto antitossico e antiallergico.

I ceppi di B.subtilis studiati avevano vasta gamma attività antagonista, livello di adesione basso (B. subtilis n. 1719) o medio (B. subtilis n. 1594, B. subtilis n. 1318).

Pertanto, i ceppi da noi studiati erano caratterizzati da un’elevata attività probiotica. Tuttavia, lo studio delle proprietà biochimiche ha mostrato che il ceppo B.subtilis 1719 aveva un'attività enzimatica più elevata (proteasi, amilasi, lipasi), che era espressa nella più grande zona di idrolisi dei substrati studiati. Inoltre, il basso livello di attività adesiva del ceppo B. subtilis 1719 e, apparentemente, la sua naturale resistenza agli antibiotici, controllato dal cromosoma, ci ha permesso di concludere che ulteriori studi su questa cultura sono promettenti.

A nostro avviso, le prospettive per espandere la produzione industriale di farmaci basati sul genere Bacillus sono molto grandi.

I bacilli sono in grado di secernere molti enzimi nel fluido di coltura. Fungono da un importante sito industriale per la produzione di enzimi proteolitici e amilolitici utilizzati nella produzione di prodotti alimentari, detergenti e sostanze biomediche. Nell'ultimo decennio, con la loro partecipazione, sono stati ottenuti numerosi nuovi antibiotici, insetticidi batterici e altre sostanze biologicamente attive.

Nonostante B. subtilis abbia lo status di GRAS, in letteratura sono presenti segnalazioni isolate sulla presenza di fattori di patogenicità in alcuni ceppi di B. subtilis. Si precisa che questo non è un segno permanente, poiché scompare durante la risemina. È stato suggerito che le proprietà patogene dei batteri siano legate alla presenza di plasmidi. Ad esempio, Le N. e Anagnostopoulos S. hanno isolato plasmidi da 8 ceppi di B. subtilis da 83 soggetti esaminati. Il DNA plasmidico è stato determinato solo nelle cellule di ceppi tossigeni di B. subtilis e non è stato trovato nelle cellule di altri ceppi della stessa specie che non sono tossigeni. L'eliminazione dei plasmidi dai ceppi tossigeni sotto l'influenza di agenti eliminanti ha portato all'eliminazione delle proprietà tossigeniche dei filtrati di coltura. Tuttavia, il ruolo genetico dei plasmidi non è stato sufficientemente studiato.

Nei nostri studi, non sono stati trovati plasmidi nelle preparazioni di DNA isolato dei tre ceppi di B. subtilis studiati.

Gli autori che hanno studiato l'effetto dei bacilli sul corpo degli animali a sangue caldo sono giunti alla conclusione che i ceppi di B. subtilis sono completamente innocui per l'uomo e gli animali. La prova dell'innocuità per il macroorganismo è fornita dai dati sperimentali secondo cui entro pochi giorni dalla somministrazione parenterale B.subtilis viene eliminato dall'organismo. I meccanismi dell'effetto terapeutico di queste colture sono stati studiati negli animali. Attualmente, si ritiene che l'effetto terapeutico dei probiotici di spore sia determinato da un complesso di fattori, tra cui: la produzione di batteriocine da parte di colture di B. subtilis, che sopprimono la crescita di microrganismi patogeni e condizionatamente patogeni; sintesi di enzimi altamente attivi: proteasi, ribonucleasi, transaminasi, ecc.; produzione di sostanze che neutralizzano le tossine batteriche.

Uno studio sulle proprietà del ceppo selezionato nei topi ha dimostrato che è avirulento e non presenta tossicità o tossigenicità.

I fattori dell'effetto positivo dei probiotici sul macroorganismo sono vari prodotti della sintesi microbica: aminoacidi, antibiotici polipeptidici, enzimi idrolitici e una serie di altre sostanze biologicamente attive di minore importanza. Pertanto, lo studio e l'isolamento delle sostanze protettive prodotte dai microrganismi del genere Bacillus e la creazione di medicinali a base di esse farmaci biologiciè una necessità urgente.

Nel tratto gastrointestinale si manifesta un effetto antagonista diretto dei bacilli, che è prevalentemente selettivo rispetto ai microrganismi patogeni e condizionatamente patogeni. Allo stesso tempo, sono caratterizzati dall'assenza di antagonismo nei confronti dei rappresentanti della normale microflora.

Nei nostri studi, durante la correzione della disbiosi sperimentale indotta dalla somministrazione dell'antibiotico doxiciclina, la coltura di B. subtilis 1719 ha contribuito alla normalizzazione della composizione e del numero della microflora intestinale, nonché all'eliminazione di microrganismi condizionatamente patogeni nell'intestino. microflora parietale e luminale.

Dai dati della letteratura risulta che i ceppi industriali del genere Bacillus hanno indice basso attività adesiva agli eritrociti e adesività debole o moderata alle cellule epiteliali intestinali. I ceppi di B. subtilis 534 e ZN hanno più adesioni ai recettori degli enterociti, i ceppi di B. licheniformis - ai colonciti, cioè Diversi ceppi sembrano avere adesioni ai recettori su diverse cellule intestinali.

La loro attività si verifica nel lume intestinale ed è diretta contro i microrganismi patogeni, senza esercitare un effetto antagonista sui rappresentanti della normale microflora. Quando si assumono probiotici con spore, si realizza la possibilità di ripristinare l'autoflora in vari loci intestinali e dopo 3-5 giorni il numero di lattobacilli, bifidobatteri, E. coli, ecc. aumenta, per poi essere riportato a livelli normali.

I risultati dei nostri studi sull'adesione dei microrganismi agli enterociti rendono più probabile affermare che la capacità adesiva delle cellule intestinali dipende dalla composizione quantitativa e qualitativa della normale microflora. In condizioni disbiotiche, i recettori vengono aperti sulla superficie degli enterociti, ai quali si attaccano microrganismi condizionatamente patogeni e patogeni, e quando la disbiosi viene corretta, l'intestino viene colonizzato dalla normale microflora e dal numero di recettori enterocitari in grado di aderire alla sua superficie di non- i microrganismi indigeni diminuiscono.

È noto che la normale microflora svolge un importante ruolo scatenante nel meccanismo di formazione dell'immunità e nelle reazioni protettive specifiche nello sviluppo postnatale del macroorganismo.

Il ruolo della microflora nello sviluppo della risposta immunitaria è dovuto alle sue proprietà immunomodulatorie universali, che includono l'immunostimolazione e l'immunosoppressione. È stato stabilito che i lipopolisaccaridi batterici (LPS) hanno un effetto immunoregolatore sulla risposta immunitaria Ig A e svolgono il ruolo di adiuvanti. La microflora garantisce lo sviluppo di un complesso di reazioni immunologiche non specifiche e specifiche, formando meccanismi di adattamento e protezione.

Non importa quanto sia elevata l'attività antimicrobica di un farmaco, esso svolge un ruolo decisivo nell'eliminazione dello stato patologico infettivo. La creazione di farmaci efficaci in termini di proprietà antimicrobiche e stimolanti le risposte immunitarie sembra essere un compito importante. Ecco perché un gran numero di La ricerca è finalizzata a studiare l'effetto dei farmaci probiotici su diverse parti del sistema immunitario dell'uomo e degli animali.

La somministrazione di colture vive di bacilli aerobici stimola notevolmente la produzione in vivo di interferone sierico e di interferone indotto in vitro dal virus della malattia di Newcastle.

Numerosi studi indicano che i farmaci probiotici hanno un effetto immunomodulatore, ripristinando lo stato immunitario compromesso dalla patologia, aumentando la produzione di interferone endogeno, migliorando l'attività funzionale delle cellule macrofagiche, aumentando l'attività fagocitaria dei leucociti del sangue - monociti e neutrofili.

I nostri studi hanno dimostrato che la coltura di B. subtilis 1719 ha modificato significativamente l'attività metabolica dei neutrofili durante la correzione della disbiosi e non ha causato cambiamenti nell'attività funzionale dei neutrofili nello stato normale della microflora indigena. Inoltre, si è scoperto che la disbiosi era accompagnata da un aumento del livello di TNF-a, che indicava una pronunciata attività fagocitica, citotossica, adesiva dei macrofagi, dei linfociti e delle cellule endoteliali ed epiteliali dell'intestino tenue.

Aumento della secrezione citochine proinfiammatorie nei topi affetti da disbiosi, riflette probabilmente l'attivazione delle cellule immunocompetenti (linfociti T, monociti/macrofagi). Sotto l'influenza della coltura B.subtilis 1719* è stata osservata una diminuzione della produzione di TNF-a. L'introduzione della coltura negli animali intatti non ha causato cambiamenti nel livello di produzione del TNF-a.

Considerando che il TNF-a è un marcatore di reazioni infiammatorie, si è concluso che il probiotico svolge un ruolo importante nell'aumentare l'attività antinfiammatoria delle cellule immunocompetenti negli animali.

Studi condotti per studiare la dinamica della produzione di citochine sotto l'influenza del ceppo B. subtilis 1719 hanno dimostrato che la coltura non ha avuto alcun effetto sulla produzione di citochine nelle prime ore dopo la somministrazione, ad eccezione di IL-lp, la cui quantità si è accumulata gradualmente . Il livello di altre citochine studiate (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IFN-y) è aumentato significativamente nell'intervallo da 12 a 24 ore.

Pertanto, la modulazione delle cellule del sistema immunitario e i cambiamenti nel potenziale delle citochine potrebbero essere uno dei meccanismi attraverso i quali la coltura di B. subtilis 1719 contribuisce alla correzione della disbiosi.

L'analisi dei risultati della ricerca scientifica condotta nel nostro Paese e all'estero indica l'entità dell'utilizzo dei batteri del genere Bacillus per ottenere prodotti dalla biomassa batterica o dai loro metaboliti. Metodi conosciuti coltivazione i batteri del genere Bacillus costituiscono la base della tecnologia per la produzione di numerosi preparati batterici ed enzimatici. .

Studiando le proprietà di crescita della coltura di B. subtilis 1719 su vari terreni nutritivi liquidi, si è scoperto che per il massimo accumulo di biomassa, il substrato più adeguato per la coltivazione del ceppo può essere considerato il terreno BK-2 con l'aggiunta di glucosio o saccarosio

Attualmente, quando si selezionano e caratterizzano le colture di produzione di microrganismi, vengono presi in considerazione principalmente i seguenti indicatori: caratteristiche biologiche: spettro e livello di attività antagonista, producibilità, ovvero capacità di accumulare rapidamente biomassa*, resistenza alla liofilizzazione, vitalità durante lo stoccaggio. Particolare attenzione è posta ai criteri relativi al grado di sicurezza dei microrganismi utilizzati per la salute umana.

Negli studi condotti per valutare la vitalità delle cellule microbiche di B.subtilis 1719 conservate in presenza di stabilizzanti liquidi, è stato rivelato che lo stabilizzatore ottimale era una soluzione di NaCl al 7%, che consentiva di mantenere la vitalità e le proprietà antagoniste del ceppo per 2 anni. Per preservare le proprietà della coltura per 1,5 anni, è possibile utilizzare una soluzione di glicerolo al 10%, acqua distillata per 1 anno, e si è riscontrato che questi riempitivi non hanno avuto un effetto statisticamente significativo sulle proprietà antagoniste del B. ceppo subtilis 1719. Da sottolineare che un dato importante è la capacità del ceppo B.subtilis 1719 di mantenere l'attività antagonista nei confronti di S.sonnei e S.aureus negli stabilizzanti liquidi per un lungo periodo di 36 mesi. (periodo di osservazione).

La liofilizzazione con uno stabilizzatore di saccarosio-gelatina ha preservato la vitalità e l'attività antagonista del ceppo B. subtilis 1719 per 4 anni (periodo di osservazione).

Attualmente, i noti farmaci probiotici sono ampiamente utilizzati nell'assistenza sanitaria pratica: bactisubtil, sporobacterin, biosporin, bactisporin, subalin, cereobiogen, enterogermin e altri

Studio comparativo di B. subtilis ceppo 1719 per l'attività antagonista e adesiva con colture commerciali dei seguenti preparati probiotici: Sporobacterin, Russia (B. subtilis 534), Cereobiogen, Cina (B. cereus DM423), Subtil, Vietnam (B. cereus var .vietnami), Baktisubtil, Francia (B.cereus IP5832), Nutrolin, India (B.coagulans), hanno dimostrato che il ceppo isolato è originale e può essere raccomandato come ceppo di produzione quando si ottiene un nuovo farmaco probiotico.

Pertanto, il ceppo B. subtilis 1719 presenta caratteristiche individuali chiaramente distinguibili in termini di proprietà fisiologiche e biochimiche, che vengono incluse nel passaporto culturale quando depositato nella collezione culturale del GISC omonimo. J.I.A. Tarasevich. Inoltre, la posizione dominante del ceppo isolato di B. subtilis 1719 in termini di attività antagonista indica la prospettiva di utilizzare questa coltura per lo sviluppo di un preparato probiotico basato su di essa.

Elenco dei riferimenti per la ricerca della tesi Candidato di Scienze Biologiche Gataullin, Airat Gafuanovich, 2005

1. Ashmarin I.P., Vorobyov A.A. Metodi statistici nella ricerca microbiologica. Medizd, 1962, 180 pag.

2. Baibakov V.I., Karikh T.L., Borukaeva L.A. e altri Normalizzazione della microflora intestinale e condizioni generali dei topi JCR sotto l'influenza del concentrato di bifidobatteri.//Antibiotici e chemioterapia. 1997. - T. 42, n. 3. - Pag. 20-24.

3. Baida G.E., Budarina Zh.I. Struttura primaria e analisi del gene dell'emolisina II del Bacillus cereus // 2 Rev. montagne scientifico conf. dicono Scienziati a Pushchino, 23-25 ​​aprile. 1997: astratto. rapporto Pushchino. - 1997 - pp. 45-46.

4. Baida G.E., Kuzmin N.P. Il gene HLY-III del Bacillus cereus, clonato in Escherichia coli, codifica per una nuova emolisina che forma pori. conf. dedicato in memoria dell'accademico A.A. Baeva: Abstracts of report, Mosca, 20-22 maggio 1996. M. - 1996. - P. 108, 291.

5. Baranovsky A.Yu., Kondrashina E.A. Disbatteriosi e disbiosi intestinale // San Pietroburgo. "Peter". -2000. -209 pag.

6. Bakhanova E.M., Nikolaev S.M., Nikolaeva I.G., e altri Rast. risorse. 2001. T.37, n. 1. pp. 70-76. Effetto di un estratto di germogli di Pentaphylloides fruticosa sul decorso della disbiosi intestinale sperimentale causata da sulfadimetossina e isoniazide

7. Belyavskaya V.A., Sorokulova I.B., Ilyichev A.A. Prospettive per la progettazione di immunopreparazioni basate su bacilli ricombinanti // Nuove direzioni della biotecnologia: Proc. doc. YI Conf. RF, 24-26 maggio 1994. Pushchino. -1994.-S. 68.

8. Belyavskaya V.A., Sorokulova I.B., Masycheva V.A. Probiotici ricombinanti: problemi e prospettive di utilizzo in medicina e medicina veterinaria // Disbatteriosi ed eubiotici: abstract della conferenza scientifica e pratica tutta russa. M. - 1996. - P. 7.

9. Belyavskaya V.A., Cherdyntseva N.V., Bondarenko V.M., et al. Effetti biologici interferone prodotto ricombinante batteri del farmaco probiotico Subalin. rivista microbiol., 2003, n. 2, pag. 102-109.

10. Belyaev E.I. Modi per migliorare i farmaci che normalizzano la microflora intestinale / Rep. raccolta di articoli scientifici: “L'autoflora umana in condizioni normali e patologiche. Amaro. - 1988. - P. 74-78.

11. Bilibin A.F. // Ter. arco. -1967. N. 11. - pp. 21-28.

12. Bilibin A.F. // Klin. Medicinale. 1970. - N. 2. - P. 7-12.

13. Birger M.O. Manuale dei metodi di esame microbiologico e virologico. Determinazione della sensibilità dei microrganismi agli antibiotici. M.: Medicina, 1982. - P. 180.

14. Blinkova L.P., Semenov S.A., Butova L.G. ecc. Attività antagonista appena isolato ceppi di batteri del genere Bacillus // ZhMEI. 1994. -N5.-S. 71-72.

15. Boyko N.V., Turyanitsa A.I., Popovich E.P., Vyunitskaya V.A. Effetto antagonista delle colture di Bacillus subtilis sui batteri del genere Klebsiella/Microbiol. E. 1989. - T. 51, N 1. - P. 87-91.

16. Boyko N.V., Lisetska M.V. Rozrobka probutiyuv vib1rkovostn: Protiskle-romna efektivshst dyakikh ceppi V. subtilis // Nauk. Vyun. Uzhgor. un-tu. Ser. Toro. 1997. - N 4. - P. 194-198.

17. Bondarenko V.M., Petrovskaya V.G. Prime fasi di sviluppo del processo infettivo e duplice ruolo della normale microflora // Bollettino dell'Accademia russa delle scienze mediche. -M.- 1997.-N3.-C. 7-10.

18. Bondarenko V.M., Chuprinina R.P., Aladysheva Zh.I., Matsulevich T.V. Probiotici e meccanismi della loro azione terapeutica // Esperimento. e cuneo, gastroenterolo. 2004. N. 3. P. 83-87.

19. Bochkareva N.G., Belogortsev Yu.A., Udalova E.V. ed altri.Il ceppo batterico Bacillus subtilis è produttore di un complesso di enzimi idrolitici arricchiti con b-glucanasi // Pat. N 2046141 Russia, C12 N 9/42, Publ. 20.10.95. - Toro. N29.

20. Brilis V.I. Proprietà adesive dei lattobacilli // Abstract. dis. Dottorato di ricerca Miele. Sci. Tartu. -1990. - 25 secondi.

21. Brilis V.I., Briline T.A., Lenzner H.P., Lenzner A.A. Proprietà adesive ed emoagglutinanti dei lattobacilli. rivista Microbiol., 1982, 9: 7578.

22. Vasilyeva V.L., Tatskaya V.N., Reznik S.R. Esperienza nell'uso di adiuvanti vegetali e microbici nell'ottenimento di fluidi di ascite immunitaria in animali da laboratorio // Mzhrobyul. rivista 1974. T. 36, N 3. - P. 358-360.

23. Vershigora A.E. Fondamenti di immunologia // Kiev: Vishcha School. 1975. - 319 pag.

24. Vinnik Yu.S., Peryanova O.P., Yakimov S.V. et al., Metodo di trattamento delle ferite purulente utilizzando antagonisti / Rivista internazionale di immunoriabilitazione. 1998. - N 4., pagina 143.

25. Vinogradov E.Ya., Shichkina V.P. Il ceppo batterico B. mucilaginosus come produttore di biostimolatore dell'immunità aspecifica nei vitelli // A.S. 1210452, URSS -1/00. Publ. 27/04/96. - Toro. N12.

26. Vladimirov Yu.A., Sherstnev M.P. Risultati della scienza e della tecnologia: Biofisica 1989; 24:172.

27. Vorobyov A.A., Abramov N.A., Bondarenko V.M., Shenderov B.A. La disbatteriosi è un problema urgente in medicina // Bollettino dell'Accademia delle scienze mediche. -1997. - N. 3. -P.3-9.

28. Vorobyov A.A., Nesvizhsky Yu.V., Zudenkova A.E., Budanova E.V. Studio comparativo della microflora parietale e luminale del colon in esperimenti su topi. rivista microbiol., 2001, 1: 62-67.

29. Vorobyov A.A., Nesvizhsky Yu.V., Lipnitsky E.M. e altri Studio della microflora parietale dell'intestino umano. rivista microbiol., 2003, 1: 6063.

30. Vyunitskaya V.A., Boyko N.V., Spivak N.Ya., Ganova L.A./ Alcuni meccanismi d'azione di nuovi microbiotici // Fondamenti microbiologici e biotecnologici dell'intensificazione della produzione agricola e della produzione di mangimi: raccolta di abstract Alma-Ata, 1990. - P 17.

31. Galaev Yu.V. Enzimi patogeni di batteri // M.: Medicina. 1968. - 115 pag.

32. Goncharova G.I., Semenova A.P., Lyannaya A.M., et al. Livello quantitativo della flora bifida nell'intestino e sua relazione correlativa con la salute umana. // Antibiotici e microecologia dell'uomo e degli animali. -1988.-P.118—123

33. Gorskaya E.M. Meccanismi di sviluppo di disturbi microecologici nell'intestino e nuovi approcci alla loro correzione.//Dissertazione sotto forma di scienza

34. Gracheva N.M., Goncharova G.I. e altri.L'uso di preparati biologici batterici nella pratica del trattamento di pazienti con infezioni intestinali. Diagnosi e trattamento della disbiosi intestinale. Linee guida. 1986, pagina 23

35. Gracheva N.M., Gavrilov A.F., Avakov A.A. ecc. - Nuovi farmaci. 1994, n. 1, pp. 3-12

36. Gracheva N.M., Gavrilov A.F., Solovyova A.I. e altri L'efficacia del nuovo farmaco batterico biosporina nel trattamento delle infezioni intestinali acute // Journal. microbiolo. 1996. - N 1. - P. 75-77.

37. Grebneva A.J1., Myagkova L.P. Disbatteriosi intestinale // Guida alla gastroenterologia in 3 volumi M., 1996. -T.Z. -P.324-334

38. Grigorieva T.M., Kuznetsova N.I., Shagov E.M. Ceppo di Bacillus thuringiensis 4KN, che sintetizza un'esotossina con attività specifica contro la dorifora della patata // Biotecnologia. 1994. - N 9-10. - P.7-10.

39. Gulko M.A., Kazarinova JI.A., Pozdnyakova T.M. Metodo per produrre inosina // Pat. N 175583, C12P 19/32. Publ. 30/08/94. - Toro. N16.

40. Demyanov A.V., Kotov A.Yu., Simbirtsev A.S., Valore diagnostico dello studio dei livelli di citochine in pratica clinica. Journal of Cytokines and Inflammation, 2003, Vol. 2, N. 3, pag. 20-35

41. Egorov N.S., Zarubina A.P., Vybornykh S.N., Landau N.S. Terreno sintetico * per la coltivazione di batteri del genere Bacillus // Bollettino dell'Università statale di Mosca. 1989. N 4.1. Pag. 52.

42. Ermakova L.M., Smirnova T.A., Alikhanyan S.I. et al., Inclusioni di cristalli in un mutante di Bacillus subtilis con uno spettro alterato di proteinasi // Dokl. Accademia delle Scienze dell'URSS. 1977. - T. 236, N 4. - P. 1001-1003.

43. Zhirkov I.N., Bratukhin I.I. L'uso del probiotico RAS per la correzione della disbatteriosi nei vitelli // Medicina veterinaria. 1999. N 4. - pp. 40-42.

44. Zgonnik V.V., Furtat I.M., Vasilevskaya I.A. ecc. Proprietà antagoniste sporigeno batteri che contaminano il processo di produzione della lisina // Microbiol. E. 1993. -T.55, N4. - pp. 53-58.

45. Zinkin V.Yu. Test NBT fotometrico con neutrofili del sangue umano e suo significato clinico e immunologico in pazienti con trauma muscoloscheletrico. Abstract dell'autore. dis. Dottorato di ricerca Miele. Scienze - Mosca, 2004.

46. ​​Zudenkov A.E. La microflora e la composizione delle cellule immunocompetenti della mucina parietale del colon sono normali e in alcuni casi condizioni patologiche. Abstract dell'autore. dis. Dottorato di ricerca Miele. Scienze, Mosca, 2001.

47. Ivanovsky A.A., Nuova bactocellolattina probiotica per varie patologie negli animali // Medicina veterinaria. 1996 - N11. - pp. 34-35.

48. Ivanovsky A.A., Vepreva N.S., Zimireva V.V., Lagunova O.P. Metodo per la produzione di probiotici per la medicina veterinaria / Brevetto RU N 2084233, publ. 07.20.97. Toro. N20.

49. Kandybin N.V., Ermolova V.P., Smirnov O.V. Risultati e prospettive per l'uso del batterioculicida // Sovrem. risultato biotecnolog.: Mater. 1 Conf. Caucaso settentrionale regione, Stavropol, settembre. 1995. Stavropol. - 1995. - pp. 14-15.

50. Kashirskaya N.Yu. L'importanza dei probiotici e dei prebiotici nella regolazione della microflora intestinale.//Russian Medical Journal. 2000. - T. 8, n. 13-14. - pp. 572-575.

51. Kovalchuk L.V., Gankovskaya L.V., Rubakova E.I. Sistema di citochine. M., 2000.

52. Kozachko I.A., Vyunitskaya V.A., Berezhnizkaya T.G. ecc. I batteri del genere 4 Bacillus sono colture promettenti per la creazione agenti biologici protezione delle piante dalle malattie.// Mshrobul. E. - 1995.- T.57, N 5. - P. 69-78.

53. Krasnogolovets V.N. Disbiosi intestinale. M., 1979. -198 pag.

54. Kudryavtsev V.A., Safronova J.I.A., Osadchaya A.I. e altri L'influenza delle colture vive di Bacillus subtilis sulla resistenza non specifica dell'organismo // Microbiol. E. 1996 - T.58, N 2. - P. 46-53.

55. Kuznetsova N.I., Smirnova T.A., Shamshina T.N. e altri Ceppo di Bacillus thuringiensis, tossico per le mosche domestiche // Biotecnologia. 1995. -N3-4.-S. 11-14.

56. Lapchinskaya A.V., Shenderov B.A. Correzione della disbatteriosi causata da cefalexina e alcuni immunomodulatori.//Aspetti medici dell'ecologia microbica. M., 1991. -P.70—79

57. Lenzner A.A., Lenzner H.T., Michelsaar M.E. et al. Lattoflora e resistenza alla colonizzazione.//Antibiotici e miele. biotecnologia. -1987. -32. -Numero 3. -CON. 173-180.

58. Leshchenko V.M. Clinica, diagnosi e trattamento della candidosi viscerale. Linee guida. M., 19871.

59. Lisetska M.V. Studio sperimentale sull'attività antagonista del ceppo Bacillus subtilis1b e Klebsiella rhinoscleromatis // Nauk. Vyun. Uzhgor. un-tu. Ser. Toro. 1997. - N 4. - P. 207-212

60. Lopatina T.K. et al. Effetto immunomodulatore dei farmaci eubiotici* // Bollettino dell'Accademia russa delle scienze mediche. M., “Medicina”. -1997. Numero 3. -P.30-34

61. Lukin A.A. Formazione di antibiotici e sporulazione in microrganismi plasmidi e privi di plasmidi // Pushchino. 1978. - pp. 25-28.

62. Mazankova JI.H., Mikhailova N.A., Kurokhtina I.S. e altri.La bactisporina è un nuovo probiotico per il trattamento delle infezioni intestinali acute nei bambini // L'uomo e la medicina: Proc. rapporto V Congresso Nazionale Russo, Mosca, 8-12 aprile 1997. - M. - P. 199.

63. Mazankova L.N., Vaulina O.V. Nuovi farmaci per la correzione dei disturbi disbiotici.//Medico pediatrico. 2000. N. 3. - P.51-53.

64. Maniatis T., French E., Sambrook J. Metodi di ingegneria genetica. Clonazione molecolare, 1984.

65. Markov I.I., Zhdanov I.P., Markov A.I. Ceppo Bacillus subtilis MZh-6 antagonista del Mycobacterium tuberculosis // Pat. N2120992, C12N1/20. - Publ. 27.10.98.-Bul.N30.

68. Mikshis N.I., Shevchenko O.V., Eremin S.A. et al., Eterogeneità della popolazione dei ceppi di Bacillus anthracis II Dip. al VINITI del 04/06/98. Saratov. -1998.-7 p.

69. Mitrokhin S.D. // Antibiotici e chemioterapia. 1991. - N. 8. - P.46 - 50.

70. Mitrokhin S.D. Metaboliti della microflora umana normale nella diagnostica espressa e nel monitoraggio del trattamento della disbiosi del colon: Abstract della tesi. Dott. med. Scienze, M., 1998. 37 p.

71. Mitrokhin S.D., Ardatskaya M.D., Nikushkin E.V., Ivanikov I.O. e altri - M., 1997. 45 p. Diagnosi completa, trattamento e prevenzione della disbatteriosi intestinale (disbiosi) nella clinica delle malattie interne (linee guida).

72. Mitrokhin S.D., Shenderov B.A. Microbiologico e parametri biochimici cambiamenti nell'ecologia microbica del colon di ratto sotto l'influenza della rifampicina. Antibiotici e chemioterapia - 1999, T. 34 No. 6 (482-4).

73. Molchanov O.JL, Poznyak A.JI. L'uso della biosporina in terapia complessa vaginosi batterica // Proc. Dokl: Tecnologie moderne per la diagnosi e la terapia delle malattie infettive. San P. - 1999, pagina 187.

74. Muzychenko JI.A., Senatorova V.N., Alkhovskaya JI.JI. ed altri Analisi morfometrica dello sviluppo di microrganismi / Biotecnologie. 1990. - N 3. - P. 3-6.

75. Müller G., Litz P., Munch G. Microbiologia dei prodotti alimentari origine vegetale// M.:B.I..- 1977.- P.343 347

76. Nikitenko V.I. Farmaco batterico per la prevenzione e il trattamento dell'infiammazione. processi di combustione e malattie allergiche // Applicazione internazionale. N 89/09607, WO, pubbl. 19/10/1989.

77. Nikitenko V.I. Invece di farmaci, batteri // Scienza in URSS. - 1991. - N 4. -S. 116-121.

78. Nikitenko V.I. Ceppo di batteri Bacillus subtilis utilizzato per ottenere un latticino destinato al trattamento di diatesi, disbatteriosi e infezioni batteriche // A.S. N 1648975, S.U. pubblicato il 15.05. 91.

79. Nikitenko V.I., Nikitenko I.K. Un ceppo di batteri Bacillus pulvifaciens utilizzato per la produzione di un farmaco terapeutico e profilattico contro le infezioni batteriche negli animali // A.S. N 1723117, S.U. pubbl. 12.1992.

80. Nikitenko V.I., Nikitenko I.K. Un ceppo di batteri Bacillus subtilis utilizzato per ottenere un farmaco per la prevenzione e il trattamento dei processi antinfiammatori e delle malattie allergiche // A.S. N 1723116, S.U. pubbl. 12.1992.

81. Nikitenko L.I., Nikitenko V.I. Ceppo batterico Bacillus sp. componente di un farmaco terapeutico e profilattico contro la disbatteriosi e le allergie // A.S. N 1710575, S.U. - pubbl. 5.1992.

82. Nikitenko V.I., Gorbunova N.N., Zhigailov A.V. Sporobatterina nuovo farmaco per il trattamento della disbatteriosi e dei processi infiammatori purulenti // Disbatteriosi ed eubiotici: estratti dei rapporti All-Russian. scientifico-pratico conf. -M.- 1996.-S. 26.

83. Nikolicheva T.A., Tarakanov B.V., Golinkevich E.K., Komkova E.E. Cambiamenti nella biocenosi del tratto digestivo dei suinetti quando il Bacillus micilaginosis è incluso nella dieta // Bollettino. Istituto di ricerca tutto russo di fisiologia, biochimica e nutrizione degli animali da fattoria. 1989.-N 2. - P. 31-35.

84. Obukhova O.V., Soboleva N.N. Sulla presenza di un fattore di distribuzione nelle colture di batteri sporali saprofiti // Journal. microbiolo. 1950. - N 12. P. 482-485.

85. Determinazione della sensibilità dei microrganismi ai farmaci antibatterici. Raccomandazioni metodologiche MUK 4.2.1980-04, 2004.

86. Osadchaya A.I., Kudryavtsev V.A., Safronova JI.A. L'influenza dell'acidità media e della temperatura sulla crescita e sull'escrezione dei polisaccaridi di Bacillus subtilis in profondità coltivazione// Misrobyul. rivista 1998. - T. 60., N 4. - P. 25-32.

87. Osipova I.G. Alcuni aspetti del meccanismo dell'azione protettiva dei colibatteri e degli eubiotici a spore e nuovi metodi per il loro controllo. // Abstract dell'autore. Tesi di dottorato in biologia - M., 1997. - 25 p.

88. Osipova I.G., Sorokulova I.B., Tereshkina N.V., Grigorieva JI.B. Studio sulla sicurezza dei batteri del genere Bacillus, che costituiscono la base di alcuni probiotici // Journal. microbiolo. 1998. - N 6. - P. 68-70.

89. Osipova I.G., Mikhailova N.A., Sorokulova I.G., Vasilyeva E.A., Gaiderov A.A. Probiotici di spore. rivista microbiolo. - 2003. N. 3. Con. 113-119.

90. Osterman L.D. Metodi per lo studio delle proteine ​​e degli acidi nucleici. 1981.

91. Panin A.N., Serykh N.I., Malik E.V. e altri.Aumentare l'efficacia della terapia probiotica nei suinetti / Medicina Veterinaria, 1996. - N 3. - P. 17.

92. Panchishina M.V., Oleinik S.F. Disbiosi intestinale. Kiev, 1983

93. Parshina S.N., Imshenetsky A.A., Nesterova N.G. e altri. Il ceppo batterico Bacillus segesh è produttore di enzimi proteolitici con effetti trombolitici // A. C. N 1615177, C 12N 1/20. Pubblicato il 23/12/90. - Bollettino N 4. 1988.

94. Nozioni di base sull'SD di Perth coltivazione microrganismi e cellule. M. Mir, 1978, 332 pp.

95. Petrov L.N., Verbitskaya N.B., Vakhitov T.Ya. Progettazione di farmaci per il trattamento e la prevenzione della disbiosi basati su idee sull'endoecologia umana // Rus. E. HIV/AIDS e affini problema 1997.- T. 1, N 1. P. 161-162.

96. Petrovskaya V.G., Marko O.P. Microflora umana in condizioni normali e patologiche. M.: Medicina. -1976. -217 C.

97. Poberiy I.A., Kharechko A.T., Sadovoy N.V., Litusov N.V. Nuovo complesso eubiotico “biosporina” per bambini e adulti / Sanità del Bashkortostan. 1998. -N 1. - P. 97-99.

98. Pogosyan G.P., Nadirova A.B., Kaliev A.B., Karabaev M.K. Plasmide pCLl e attività antimicrobica di Bacillus sp. 62 II Genetica molecolare, microbiolo. e virologia. 1999. - N 1. - P. 37-38.

99. Podberezny V.V., Parikov V.A. Terreno per la coltivazione dei batteri simbionti Bacillus pulvifaciens o Bacillus subtilis - produttore di probiotici // Brevetto RU n. 2100029, publ. 27/12/97. Bollettino n. 36.

100. Podberezny V.V., Polyantsev N.I., Ropaeva L.V. Coltivazione ceppi di produzione di Bacillus subtilis nel siero di latte // Scienze veterinarie - 1996.-N 1.-S. 21-29.

101. Podoprigora G.I. Meccanismi immunitari e non specifici di resistenza alla colonizzazione.//Antibiotici e resistenza alla colonizzazione/Cumuli dell'Istituto di ricerca panrusso sugli antibiotici - M. -1990. - emettere X1X. -CON. 15-25.

102. Polkhovsky V.A., Bulanov P.A. DI decarbossilasi aminoacidi nel Bacillus cereus //Microbiologia. 1968. - T. 37, N 4. - P. 600-604.

103. Pospelova V.V., Gracheva N.M., Antonova L.V. et al. Preparati microbici biologici, loro forme di dosaggio e aree di applicazione // Nuovi farmaci: informazioni espresse. -1990. -Vol. 5. - pp. 1-8.

104. Pospelova V.V., Rakhimova N.G., Khaleneva M.P. e altri.Nuove aree di applicazione dei prodotti biologici microbici per la correzione della batteriocenosi del corpo umano.//Immunobiol. droghe. M. -1989. -CON. 142-152.

105. Reznik S.R. Un metodo per il trattamento e la prevenzione delle malattie virali e batteriche degli animali // SU, A.s. N 1311243, ed. 1982.

106. Reznik S.R., Sorokulova I.B., Vyunitskaya V.A. e altri Prodotto biologico preventivo sporolact // Brevetto N 2035186. RU. - A 61 K 35/66, ed. 20/05/95, bollettino. N14.

107. Reznik S.R., Shust I.I. Parametri ematologici e citochimici dei vitelli trattati con il farmaco Bacteria-SL // Biochimica degli animali da allevamento e programma alimentare: Proc. rapporto Tutta l'Unione simposio -Kiev, 1989. P. 25.

108. Reshedko G.K., Stetsyuk O.U. Caratteristiche di determinare la sensibilità dei microrganismi utilizzando il metodo di diffusione su disco. Metodi moderni di microbiologia clinica, numero 1. Smolensk, 2003.

109. Ryapis JI.A., Lipnitsky A.V. Aspetti microbiologici e genetici di popolazione della patogenicità batterica // Journal. microbiolo. 1998. - N 6. P. 109-112.

110. Savitskaya K.I. Disturbi della microecologia del tratto gastrointestinale e malattie croniche intestini // Terra medica. - 1998. N 2. - pp. 13-15.

111. Svechnikova E.B., Maksyutova L.F., Khunafin S.N. et al., Esperienza nell'uso della bactisporina nel trattamento complesso dei bambini con lesioni termiche // Proc. Dokl: Tecnologie moderne per la diagnosi e la terapia delle malattie infettive. San P. - 1999 - Pag. 268.

112. Sinev M.A., Budarina Zh.I., Gavrilenko I.V. et al., Prova dell'esistenza del Bacillus cereus emolisina II: clonazione del determinante genetico dell'emolisina II // Molek. biol. 1993. - T. 27, N 6. - P. 1218-1229.

113. Slabospitskaya A.T., Krymovskaya S.S., Reznik S.R. Attività enzimatica dei bacilli promettenti per l'inclusione nei prodotti biologici // Microbiol. E. 1990. -N2. - P.9-14.

114. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vasilevskaya I.A. Sporigeno batteri aerobici produttori di sostanze biologicamente attive. - Kiev, 1982 - 280 pag.

115. Smirnov V.V. Raccomandazioni metodologiche per l'isolamento e l'identificazione dei batteri del genere Bacillus dal corpo umano e dagli animali // Kiev, 1983. -49 p.

116. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vasilevskaya I.A. Batteri aerobici sporigeni - produttori di sostanze biologicamente attive // ​​Kiev. Naukova Duma.- 1983.- 278 p.

117. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B. e altri Su alcuni meccanismi di comparsa della batteriemia asintomatica // Microbiol. rivista 1988-T. 50, N6.-S. 56-59.

118. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B. ecc. Metodo di trattamento del purulento-settico malattie post parto sospensione delle culture viventi // A. s. N 1398868 S.U. - A61 K 35/74. - pubbl. 30/05/88, bollettino. N20.

119. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B. e altri Il farmaco biosporina per la prevenzione e il trattamento delle malattie gastrointestinali umane // A. p. N 1722502. S.U. - A 61 K. 39/02, pubbl. 30/03/92.

120. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B., Vyunitskaya V.A. Questioni controverse sulla creazione e l'uso di preparati batterici per la correzione della microflora degli animali a sangue caldo // Microbiol. rivista 1992. - T.54, N 6.- P. 82-92.

121. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vyunitskaya V.A., et al. Idee moderne sui meccanismi dell'azione terapeutica e profilattica dei probiotici da batteri del genere Bacillus II Microbiol. diario - 1993. - 55, - N. 4. P. 92—112

122. Smirnov V.V., Osadchaya A.I., Kudryavtsev V.A., Safronova JI.A. Crescita e sporulazione Bacillus subtilis condizioni diverse aerazione // Microbiol. rivista 1993. - T. 55, N 3. - P. 38-44.

123. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B. e altri Prodotto biologico preventivo subalin // Brevetto N 2035185, RU. A 61 K 35/66, ed. 20/05/95, bollettino. N14.

124. Smirnov V.V., Sorokulova I.B., Osipova I.G. Sottotitolo prodotto biologico per la prevenzione e il trattamento delle malattie infettive // ​​Brevetto N 2129432. -A. 61 K 35/74. - Toro. N 12, ed. 27/04/99.

125. Smirnov V.V., Reva O.N., Vyunitskaya V.A. Creazione e applicazione pratica di un modello matematico dell'azione antagonista dei bacilli nella progettazione dei probiotici // Mshrobyulopchnyi zhurn. 1995. -T. 64, N 5. -S. 661-667.

126. Smirnov V.V., Kosyuk I.V. Proprietà adesive dei batteri del genere Bacillus - componenti del drobiotico // Mshrobyulopchnyi zhurnal. 1997. - T. 69, N 6. - P. 36-43.

127. Sorokulova I.B. Prospettive per l'uso di batteri del genere Bacillus per la progettazione di nuovi prodotti biologici // Antibiotici e chemioterapia. -1996. T.41, N 10. - pp. 13-15.

128. Sorokulova I.B. Studio comparativo delle proprietà biologiche della biosporina e di altri preparati commerciali a base di bacilli // Rivista Mshrobyu-lopchny. 1997. - T. 69, N 6. - P. 43-49.

129. Sorokulova I.B. L'influenza dei probiotici derivanti dai bacilli sull'attività funzionale dei macrofagi / Antibiotici e chemioterapia. 1998. - T. 43, N 2. - P. 20-23.

130. Storozhuk P.G., Bykov I.M., Storozhuk A.P. Orientamento patogenetico della nutrizione proteica e della terapia sostitutiva enzimatica negli stati di immunodeficienza del corpo // Rivista internazionale di immunoriabilitazione. 1998. - N 10., pp. 110-115.

131. Tabolin V.A., Belmer S.V., Gasilina T.V. e altri Terapia razionale della disbiosi intestinale nei bambini. Linee guida. M., 1998. -11 pag.

132. Topchy M.P. L'uso di farmaci provenienti da colture vive di Bacillus subtilis per la disbatteriosi dei vitelli: Abstract della tesi. dis. Dottorato di ricerca biol. Sci. Minsk, 1997. -21 p.

133. Trishina N.V. La relazione tra lo sviluppo della disbiosi intestinale e lo stato di immunità antiendotossina. Abstract dell'autore. dis. Dottorato di ricerca Miele. Sci. -Mosca, 2003., 24 p.

134. Insegnante I.Ya. I macrofagi nel sistema immunitario. M1978; 175.).

135. Fazylova A.A. Razionale clinico e immunologico per l'uso di sporobatteri e bactisporina per la disbiosi intestinale nei bambini gioventù//Aut. Potere. dis. Ufa. - 1998. - 24 p.

136. Harwood K. Bacillus. Genetica e biotecnologie. M., 1992. - P. 52.

137. Kharchenko S.N., Reznik S.R., Litvin V.P. Metodo per combattere la muffa dei mangimi // A.S. N 751382, URSS, ed. in B.I., 1980, n. 28.

138. Khmel I.A., Chernin L.S., Levanova N.B. e altri Ceppo di batteri Bacillus pumilus per ottenere un farmaco contro microrganismi fitopatogeni // Brevetti 1817875 Russia F01N 63/00, C12N 1/20. pubbl. 05.20.95. - Toro. N14.

139. Chernyakova V.I., Bereza N.M., Selezneva S.I. Efficacia batteriologica e immunologica del farmaco biosporina nella colite ulcerosa non specifica // Mikrobiol.zh. 1993. - T. 55, N 3. - P. 63-67.

140. Chkhaidze I.G., V.G. Likhoded et al. Effetto correttivo degli anticorpi nella disbatteriosi sperimentale // Journal. Microbiolo. 1998, n° 4: 12-14.

141. Sharp R., Skaven M., Atkinson T. Bacillus: Genetica e biotecnologia. -M. 1992. - 398 pag.

142. Sheveleva S.A. Probiotici, prebiotici e prodotti probiotici. Stato attuale della questione // Problemi di nutrizione. -1999. -T.68. -No 2. -P.32

143. Shenderov B. A. Ecologia microbica medica e nutrizione funzionale - M., 1998, T. I, P. 287.

144. Shenderov B.A. Resistenza alla colonizzazione e chemioterapici e farmaci antibatterici.// Antibiotici e resistenza alla colonizzazione: Atti dell'Istituto panrusso di ricerca sugli antibiotici. M.-1990. - emettere X1X. -P.5-16.

145. Shenderov B.A., Manvelova M.A., Stepanchuk Yu.B., Skiba N.E. Probiotici e nutrizione funzionale // Antibiotici e chemioterapia. 1997. - T. 42, N 7. - P. 30-34.

146. Shenderov B.A. Ecologia microbica medica e nutrizione funzionale.-M., 1998, T. II, P. 413

147. Yampolskaya T.A., Velikzhanina G.A., Zhdanova N.I. ecc. Ceppo batterico Bacillus subtilis produttore di L-fenilalanina: A.s. N 1693056, C 12 R 13/22, pubbl. 23.11.91. Toro. N43.

148. Adami A., Sandrucci A., Cavazzoni V. Suinetti alimentati fin dalla nascita con il probiotico Bacillus coagulans come additivo: Aspetti zootecnici e microbiologici // Ann. microbiolo. ed enzimatico. 1997. - V. 47, N 1. - P. 139-149.

149. Azuma I., Sugimura C., Iton S. Attività additiva dei glicolipidi batterici // Jap. J. Microbiol. 1977. - V. 20, N 5. - P. 465-468.

150. Benedettini J. et al. Immunomodulazione mediante spore di Bacillus subtilis // Boll. 1°, Sierote Milano. 1983.-V. 62.,N6.-P. 509-516.

151. Berkel H., Hadlok R. Lecithinase-und Toxinbildung durch Stamme der Gat-tung Bacillus // Lebensmittelhygiene. 1976. - V. 27, N 2. - p. 63-65.

152. Bernheimer A., ​​​​Avigad L. Natura e proprietà dell'agente citolitico prodotto da Bacillus subtilis // J. Gen. Microb. - 1970. V. 61, N 2. - P. 361-369.

153. Blaznic J, Kumel I.M., Salamum B. et al. Sdravljenje kronicne granulomotozne bolezni z acidofilnem mlecom // Zdrav.Vesth. 1976. N 45. - P. 77-79.

154. Boer A.S., Priest F., Diderichsen B. On the industrial use of Bacillus licheniformis: A review // Appl. Microbiolo e biotecnologia. 1994. - V. 40, N 5. - P. 595-598.

155. Buchell M.E., Smith J., Lynch H.C. Un modello fisiologico per il controllo della produzione di eritromicina in colture batch e ad alimentazione ciclica // Microbiologia. -1997. V. 143, N 2. - P. 475-480.

156. Cipradi G. et al. Effetti di un trattamento adiuvante con Bacillus subtilis per l'allergia alimentare // Chemioterapia. -1986. 5, N6. -P.408-410

157. Cromwick A.M., Birrer G.A., Gross R.A. Effetti del pH e dell'aerazione sulla formazione di y-poli (acido glutammico) da parte di bacillo licheniformis in colture fermentate batch controllate // Biotechnol. e Bioeng. 1996. - V. 50, N 2. - P. 222-227.

158. Danchin A., Glasser P., Kunst F. et al. Bacillus subtilis devoile ses genes // Biofutur. 1998. - N 174. - P. 14-17.

159. Devin K.M. Il progetto genoma del Bacillus subtilis: obiettivi e progressi // Trends Biotechnol. 1995. - V. 13, N 6. - P. 210-216.

160. Donovan W.P., Rupar M.J., Slanei A.C. Bacillus thuringiensis crytic, proteina tossica per i coleotteri // Brevetto N 5378625 USA A61K 31/00. Publ. 01/03/95.

161. Dubos R. Fattori tossici negli enzimi utilizzati nei prodotti per il bucato // Scienza. 1971. - N 3993. - P. 259-260.

162. Edlund C., Nord C.E. Effetto dei chinoloni sull'ecologia intestinale. Farmaci, 1998, 58(2): 65-70.

163. Flindt M. Malattia polmonare dovuta all'inalazione di derivati ​​di Bacillus subtilis contenenti l'enzima proteolitico // Lancet. - 1969. V. 1, N 7607. - P. 1177-1181.

164. Fox M. La filogenesi dei procarioti // Scienza. -1980. V. 209, N 4455. P. 457-463.

165. Fuller R. J Appl Bacteriol 1989; 66:5:365-378.

166. Gastro G.R., Ferrero M.A., Abate C.M. et al. Produzione simultanea di alfa e beta amilasi da parte di Bacillus subtilis Mir-5 in coltura batch e continua // Biotechnol. Lett. 1992. - V. 14, N 1. - P. 49-54.

167. Glatz B.A., Spira W.M., Goepfert J.M. Alterazione della permeabilità vascolare nei conigli mediante filtrati di coltura di Bacillus cereus e specie affini // Infect e Immunol. 1974. V. 10, N 2. - P. 299-303.

168. Guida V., Guida R. Importansia dos Bacillos esporulados aerobios em gastroenterologia e nutricao // Rev. Brasile. med. 1978. - V. 35, N 12. - P. 702707.

169. Haenel H., Bending J. Flora intestinale in salute e malattia // Progr. Cibo e nutrizione sci.- 1975.-V. 21, N l.-P. 64.

170. Himanen J.-P., Pyhala L., Olander R.-M. et al. Attività biologiche dell'acido lipoteicoico e dell'acido peptidoglicano teicoico di Bacillus subtilis 168 // J. Gen. Microbiolo. - 1993.-V. 139,N 11.-P. 2659-2665.

171. Hirano Y., Matsudo M., Kameyama T. Elettroforesi su gel di poliacrilammide bidimensionale di proteine ​​sintetizzate durante la germinazione precoce di Bacillus subtilis 168 in presenza di actinomicina D // J. Basic Microbiol. 1991. - V. 31, N 6. - P. 429-436.

172. Humbert Florence Les probiotigues: un sujet d" attualite // Bull. inf. Stat. exp. auicult. Ploufragan. 1988. - V. 28, N 3. - P. 128-130.

173. Inouye S., Kondo S. Amicoumacin e SF-2370, agenti farmacologicamente attivi di origine microbica // Novel Microbial Prod. Med. e Agr. Amsterdam. -1989.-P. 179-193.

174. Johnson S. E. Tossina letale del Bacillus cereus 1. Relazioni e natura della tossina, dell'emolisina e della fosfolipasi // J. Bacterid. 1967. V. 94, N 2. - P. 306316.

175. Kakinuma A., Hori M., Isono M. Determinazione dell'acido grasso nella surfattina e delucidazione della struttura totale della surfattina // Agric. e Biol. Chimica. 1969. - V. 33. - P. 973-976.

176. Kaneko J., Matsushima H. ​​Struttura simile al cristallo nelle cellule di sporulazione di Bacillus subtilis 168 // J. Electron. Microscopia - 1973. V. 22, N 2. - P. 217-219.

177. Kaneko J., Matsushima H. ​​​​Inclusioni cristalline nelle cellule sporulanti di Bacillus subtilis // In: Spores YI. Selezionare. Papà. 6° Int. Conf. Spore Washington. - 1975. -P. 580-585.

178. Kitazawa H, Nomura M, Itoh T. J Dairy Sci 1991; 74:7:2082 2088.

179. Kubo Kazuhiro. Coltura pura di Bacillus subtilis FERM BP-3418 // Pat. N 5364738. Stati Uniti. MKI A01N 25//00. - pubbl. 15/11/94.

180. Kudrya V.A., Simonenko L.A. Isolamento della serina-proteinasi alcalina e della lectina dal fluido di coltura di Bacillus subtilis // Appl. Microbiolo e biotecnologia. -1994.-V. 41,N5.-P. 505-509.

181. Le H., Anagnostopoulos C. Rilevazione e caratterizzazione di plasmidi presenti in natura // Molec. gen. Genetta. 1977. - V. 157. - P. 167-174.

182. Legakis N.J., Papavassilion J. Tecnica cromatografica su strato sottile per il rilevamento rapido delle fosfolipasi batteriche // J. Clin. Microbiol - 1975. V.2, N 5. - P. 373-376.

183. Leviveld H.L.M., Bachmayer H., Boon B. et al. Biotecnologie sicure. Parte 6. Valutazione della sicurezza dei microrganismi utilizzati nella biotecnologia nel rispetto della salute umana // Appl. Microbiolo e biotecnologia. 1995. V. 43, N 3. - P. 389-393.

184. Lin S.-C., Carswell K.S., Sharma M.M., Georgiou G. Produzione continua del biotensioattivo lipopeptidico di Bacillus licheniformis JF-2 // Appl. Microbiolo e biotecnologia. 1994. - V. 41, N 3. - P. 281-285.

185. Lovett P., Bramucci M. DNA plasmidico nei bacilli // In: Microbiology-Washington. 1976. - P. 388-393.

186. Markham R., Wilkie B. Influenza del detergente sulla sensibilizzazione allergica all'aerosol con enzimi. subtilis // Int. Arco. Allergia e Appl. Immunolo. 1976.-V. 51, N 5. - P. 529-543.

187. Maruta Kiyoshi Esclusione di patogeni intestinali mediante alimentazione continua con Bacillus subtilis C-3102 e sua influenza sulla microflora intestinale nei polli da carne // Anim. Sci. e Tecnol. 1996. - V. 67, N 3. - P. 273-280.

188. Moszer I., Glaser P., Danchin A. SubtiList: A relazional database for the Bacillus subtilis genome // Microbiology. 1995. - V. 141, N 2. - P. 261-268.

189. Murray P.R., Baron E.J., Pfaller M.A., Tenover F.C., Jolken R.H., Manual of Clinical Microbiology, 7a edizione, Washington D.C., ASM Press, 1999

190. Nozari-Renard J. Induction d 5, OInterferon par Bacillus subtilis // Ann. Microbiolo. 1978. - V.129a. - N 4. - P. 525-542.

191. Oh M.K., Kim BG, Park S.H. Importanza dei mutanti di spore per la fermentazione fed-batch e continua di Bacillus subtilis // Biotechnol. e Bioeng. 1995.-V. 47, N 6. - P. 696-702.

192. Payne Jewel M. Gli isolati di Bacillus thuringiensis Hist sono nematodi ayanisti attivi / Brevetto N 5151363, C12 N 1/20, A 01 N 63/00, appl. 27/07/90, pubbl. 29.09.92.

193. Pepys J., Hargreave F., Longbotton Y. Reazioni allergiche dei polmoni agli enzimi di Bacillus subtilis // Lancet. 1969. - V. 1, N 44 - 7607. - P. 1181-1184.

194. Peterson W.L., Mackrowiak Ph.A., Barnett C.C. et al. La barriera battericida gastrica umana: Meccanismi di azione, attività antibatterica relativa e influenze dietetiche.//J. infezione Malattie. -1989. -159 n. 5. -p.978-985.

195. Prasad S.S.V., Shethna G.J. Attività biochimiche biologiche del cristallo proteico di Bacillus thuringiensis // J. Sci. e Ind. Ris. 1976. - V. 35, N 10. - P. 626-632.

196. Rocchietta I. L'uso del Bacillus subtilis nella cura delle malattie/Minerva Med. -1969. -60. N3/4. -P. 117-123.

197. Rosenthal G.J., Corsini E. // Metodi Immunotossicolo. 1995.V1, P 327-343

198. Rychen G., Simoes Nunes C. Effets des flores lactigues des produits laitiers fermentes: Une base scientifigue pour l "etude des probiotiques microbiens dans l"espece porcine // Prod. anim. 1995. - V. 8, N 2. - P. 97-104.

199. Salminen Seppo Aspetti clinici dei probiotici //Ecol. salute e malattia.-1999.- 11.-N4.-P. 251-252

200. Shore N., Greene R., Kezeni H. Lung disfuction in worcers esposti a Bacillus subtilis // Environm. Ris. 1971. - V. 4, N 6. - P. 512-519.

201. Slein M., Logan G., Caratterizzazione delle fosfolipasi di te. cereus e i loro effetti sugli eritrociti, sulle cellule ossee e renali // J. Bacteriol. 1965. - V. 90, Nl.-P. 69-81.

202. Somerville H.J. L'endotossina insetticida del Bacillus thuringiensis // In: Sem. studio tema Prod, natur. e prot. pianta. 1977. - P. 253-268.

203. Spira W., Goepfert J. Caratteristiche biologiche di un'enterotossina prodotta da Bacillus cereus // Can. J. Microbiol. 1975. - V. 21, N 8. - P. 1236-1246.

204. Stgard Henri Microbielle contro kstfremmer til svin. Teori og prasksis/ Dan veterinariaertidsskr. 1989. - V. 72, N 15. - P. 855-864.

205. Su Li, Zhang Zhihong, Xiao Xianzhi, Wang Xiaomin Wuhan daxue xuebao. Divieto di Ziran kexue // J. Wuhan Univ. Natura. Sci. Ed. 1996. - V. 42, N 4. - C. 516518.

206. Sumi H. Funzione fisiologica del natto // J. Brew. Soc. giapponese. 1990. - V. 85, N 8.-P. 518-524.

207. Tihole F. Fizioloski pomer backteriemije z geiunalo microflora // Zdravstv vestn 1982. - V. 51, N 1. P. 3-5.

208. Towalski Z., Rothman H. Tecnologia enzimatica //in: The Biotechnological Challenge. Stampa dell'Università di Cambridge. Cambridge, 1986 - P. 37 -76.

209. Tsuge Kenji, Ano Takashi, Shoda Makoto. Caratterizzazione del Bacillus subtilis YB8, coproduttore dei lipopeptidi surfattina e plipastatina B1 //J. gen. e Appl. Microbiolo. 1995.- 41, N 6. P. 541-545.

210. Van der Waaij D. Resistenza alla colonizzazione della distesa digestiva: meccanismo e conseguenze cliniche.//Nahrung. -1987. -31 n. 5. -p.507-524.

211. Vollaard E.J., Clasener H.A.L., Janssen J.H.M. Il contributo di Escherichia coli alla resistenza alla colonizzazione microbica.//.!, della chemioterapia antimicrobica. -1990.- 26. -p.411-418

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Questo batterio è uno dei microbi molto diffusi in natura. Il Bacillus subtilis fu descritto nel 1835. Il microrganismo ha ricevuto questo nome dal fatto che originariamente era isolato dal fieno marcio. In laboratorio il fieno veniva bollito liquido in un contenitore sigillato, poi lasciato in infusione per due o tre giorni. Successivamente si formò una colonia e iniziò così uno studio dettagliato di questo comune batterio.

Studiando

Nella scienza esiste un termine del genere: "organismo modello". Quando i rappresentanti della natura vengono selezionati per lo studio approfondito di processi, proprietà e per condurre esperimenti scientifici. Un esempio lampante è il ciliato della pantofola, che ci è ben noto dalle lezioni di biologia.

Anche Bacillus subtilis è un organismo modello. Grazie a lei, la formazione delle spore nei bacilli è stata studiata a fondo. È un modello per comprendere il meccanismo dei flagelli nei batteri e ha svolto un ruolo nella ricerca sulla genetica molecolare.

Gli scienziati hanno condotto esperimenti sulla coltivazione di Bacillus Subtilis in condizioni prossime all'assenza di gravità, studiando i cambiamenti nei genomi delle popolazioni. Questi microrganismi vengono utilizzati anche negli studi sull'influenza delle radiazioni ultraviolette provenienti dallo spazio e sulle capacità di adattamento degli organismi viventi ad esso. Usando l'esempio del Bacillus subtilis, stanno studiando la possibilità che i batteri vivano nelle condizioni di altri pianeti del sistema solare (oggi si presta sempre più attenzione a Marte).

Brevi caratteristiche

I Bacillus subtilis hanno forma diritta e allungata, estremità arrotondate smussate, generalmente incolori. Il diametro medio è di 0,6 micron e la lunghezza varia da 3 a 8 micron. Con questi parametri, il Bacillus subtilis può essere perfettamente esaminato al microscopio e persino fotografato utilizzando le moderne tecnologie. Il bacillo è mobile grazie ai suoi flagelli. Crescono lungo la superficie della cellula e questo può essere visto nelle fotografie.

Habitat

Il fieno di Bacillus viene tradizionalmente indicato come Poi finisce sulle foglie delle piante, sulla frutta e sulla verdura. Inoltre, si trova nella polvere nell'aria e nell'ambiente acquatico. Ed è anche un segmento della microflora intestinale sia negli animali che nell'uomo. Si sviluppa a temperature comprese tra +5 e +45 gradi Celsius (in modo ottimale intorno a 30).

Bastone di fieno. Riproduzione

Come altri batteri, si riproduce mediante semplice divisione cellulare (longitudinale). I nuovi organismi formatisi a seguito di tale dimezzamento rimangono spesso collegati tra loro da un filo. Tali connessioni sono facilmente distinguibili nelle fotografie.

Bacillus subtilis è classificato come microrganismo sporigeno. Ciò ti consente di sopravvivere in caso di condizioni di vita sfavorevoli. La sporulazione dei bacilli inizia così: il contenuto della cellula acquisisce una struttura granulare. Alcuni chicchi, solitamente nella parte centrale, iniziano a crescere e si ricoprono di un guscio duro. Allo stesso tempo, la membrana della cellula originaria viene distrutta. Il processo finale si conclude con l'estrazione di una controversia caratteristica nell'ambiente esterno. Qualsiasi cellula dopo la divisione conserva la capacità di formare spore, la maggior parte delle quali hanno forma rotonda o ovale. Sono abbastanza resistenti ai fattori esterni e agli aumenti di temperatura, ad esempio possono sopportare un riscaldamento superiore a 100 gradi Celsius. È caratteristico che un batterio che si è sviluppato da una spora sia immobile e la capacità di muoversi si manifesti solo nelle generazioni successive del microrganismo.

Come si nutre il Bacillus subtilis?

Questo batterio è classificato come saprofita; si nutre di materia organica morta. Essendo eterotrofo, il Bacillus subtilis non è in grado di sintetizzare dagli inorganici le sostanze necessarie alla sua nutrizione. Pertanto, utilizza la materia organica prodotta da altri organismi. Da esso si estrae il carbonio necessario allo scambio energetico.

Nella nutrizione, la fonte principale sono i polisaccaridi di origine vegetale (amido) e animale (glicogeno). Il processo produce amminoacidi, vitamine, vari enzimi e antibiotici attraverso la sintesi.

Interazione con altri microrganismi

Questo bacillo è in grado di sopprimere lo sviluppo di microbi opportunistici e patogeni: salmonella e streptococco, stafilococco e altri "parassiti". Ad esempio, molte generazioni di predatori hanno sviluppato un riflesso per consumare determinati tipi di piante. E questo metodo non solo fornisce vitamine al corpo, ma aiuta ad arrivare alle spore di Bacillus Subtilis, che possono distruggere le varietà patogene della microflora, aumentando allo stesso tempo l'immunità.

Questo bacillo può anche servire da cibo per i protozoi. Ad esempio, l'inizio della catena alimentare può assomigliare a questo: bacilli - scarpetta ciliata - un certo tipo di mollusco - pesce - uomo.

Patogenicità

Secondo varie classificazioni, questo bacillo non è patogeno né per l'uomo né per gli animali. È coinvolto nel processo di digestione del cibo, scompone proteine ​​e carboidrati e combatte i patogeni dell'intestino e della pelle dei mammiferi. I ricercatori hanno scoperto che tra i batteri che finiscono, ad esempio, nelle ferite umane, è sempre presente il Bacillus subtilis. Produce enzimi che distruggono i tessuti morti, nonché antibiotici che inibiscono la microflora patogena e hanno un lieve effetto come medicinale antiallergico. È stato dimostrato dalla scienza: questo batterio sopprime anche lo sviluppo di agenti infettivi durante gli interventi chirurgici.

Ma, tuttavia, si nota anche l'effetto negativo di questo bacillo: può causare allergie, espresse in un'eruzione cutanea sul corpo; a volte provoca intossicazioni alimentari dopo aver mangiato cibo rovinato dall'attività di questo microrganismo; può causare gravi infezioni agli occhi negli esseri umani.

Bacillus subtilis

Classificazione scientifica

Definizione: batteri.
Classe: bacilli.
Famiglia: Bacilia.
Genere: bacillo.
Specie: Bacillus subtilis, nome binomio tipo "bacillus subtilis" approvato da Ehrenberg nel 1835, confermato da Koch nel 1872.

Il Bacillus subtilis è un rappresentante dei bacilli gram-positivi e catalasi-positivi, solitamente presenti nel terreno. A differenza di molti altri specie conosciute, è stato storicamente classificato come aerobio obbligato, sebbene uno studio del 1998 abbia rilevato che ciò non era del tutto corretto.
Il nome stesso "bastoncino di fieno" deriva dal fatto che può essere rilevato facilmente e rapidamente dall'infuso di fieno inacidito.
Il batterio stesso appare come un bacillo trasparente e diritto, largo circa 0,7 micron e lungo 2-8 micron. Il batterio stesso è in grado di riprodursi mediante frammentazione e formazione di spore. Occasionalmente singoli batteri di questa specie rimangono uniti da fili sottili.

Questo batterio del fieno è popolare perché produce “composti antibiotici”. E noto anche per i polmoni secreti acidi organici. È considerato nemico dei microbi patogeni e opportunisti, come streptococchi, salmonella, proteo del suolo, stafilococco aureo e stafilococco comune e candida. Produce enzimi che rimuovono le pareti cellulari del micelio per distruggere il tessuto fungino; produce complessi vitaminici, aminoacidi vegetali, fattori attivi immunitari.

descrizione generale

Il Bacillus subtilis è uno dei procarioti più studiati dal punto di vista della biologia molecolare e della biologia cellulare. La sua trattabilità genetica superiore e i bacilli relativamente grandi hanno fornito i potenti strumenti necessari per indagare sul batterio in ogni modo possibile.
Bacillus subtilis è un aerobio obbligato (è necessario l'ossigeno). Ma recentemente si è scoperto che in presenza di nitrati o glucosio può essere sia aerobio che anaerobico, il che lo rende anaerobio facoltativo. Bacillus subtilis può formare endospore, che gli consentono di resistere temperature estreme, nonché ambienti asciutti. Ma non sono vere, bensì formazioni simili a dispute.

Il Bacillus subtilis non è considerato patogeno o tossico e non provoca malattie mortali. È presente ovunque: nell'aria, nel suolo, nelle piante e anche nella massa del compost. Il Bacillus fieno è uno dei principali microrganismi presenti negli strati superiori del terreno.
Tuttavia, ciò che è interessante è che questo è l'habitat principale dei batteri del fieno nello stomaco dei ruminanti e nei pesci intestino tenue persona. Uno studio del 2009 sulla densità delle spore trovate nel suolo (~106 spore per grammo) e quella trovata nelle feci umane (~104 spore) per grammo. E come puoi vedere, il terreno serve semplicemente come una sorta di serbatoio, e l'intestino e lo stomaco sono i luoghi in cui vive e si riproduce.

Bacillus subtilis come strumento agricolo e protettivo. Sopprime gli agenti patogeni nel suolo attraverso l'inibizione competitiva e la generazione di composti antibiotici naturali. Il batterio del fieno produce un'abbondanza di composti ed enzimi benefici, soprattutto produce un elemento tossico chiamato subtilisina da una classe di antibiotici lipopeptidici chiamati "iturine". "Iturins" ha una vera attività fungicida contro molti agenti patogeni, come oidio, marciume radicale, peronospora, fusarium, muffa nera, batteriosi vascolare, marciume delle mucose, muffa grigia, antracnosi, fuoco batterico, Pseudomonas aeruginosa, cancro batterico, nonché contro nematodi.

Bacillus subtilis

Un antibiotico isolato da questo batterio non ha concorrenza con altri microrganismi, poiché li uccide distruggendoli direttamente o riducendone il tasso di crescita. In questo modo il bacillo del fieno occupa spazio sulle radici delle piante, lasciandole meno area per l’occupazione da parte di agenti patogeni.
I bacilli del fieno consumano gli essudati dei simbionti, privando così gli agenti patogeni della principale fonte di nutrimento, sopprimendo così la loro capacità di sopravvivere e riprodursi. E questo ti permette di proteggere la pianta dai microrganismi patogeni.

Questo batterio produce anche un tensioattivo naturale che ha la capacità di biodegradare gli idrocarburi del petrolio.
Stimola anche l'espressione genetica naturale meccanismi di difesa nelle piante e negli animali.
E il ceppo QST 713 (venduto come QST 713 o Serenade) viene utilizzato come agente di controllo biologico, come un fungicida naturale. Sulla base di questo ceppo di questo batterio, vengono prodotti numerosi medicinali necessari per proteggere verdure, bacche, frutti e altre piante dalle malattie fungine. SU questo momento Uno dei biofungicidi più efficaci sono i preparati contenenti spore di questo bacillo.

I batteri diffusi in natura includono il Bacillus subtilis. Fu descritto per la prima volta nel 1835. Ciò è stato ottenuto grazie al fatto che la coltura era inizialmente isolata dal fieno marcio. In condizioni di laboratorio, il fieno veniva bollito in acqua in un recipiente chiuso e infuso per 2-3 giorni. Successivamente nel contenitore si forma una colonia dei batteri desiderati.

Studiando

Nella scienza esiste il concetto di “organismo modello”. Questi sono vari che vengono selezionati per lo studio intensivo di determinati processi o proprietà e per condurre esperimenti scientifici. Un noto organismo modello sono i ciliati, uno dei cui rappresentanti, il ciliato della pantofola (Paramecium caudatum), ci è ben noto dalle lezioni scolastiche.

Anche Bacillus subtilis appartiene agli organismi modello. Grazie a lei, la formazione delle spore nei batteri è stata studiata a fondo. È anche un modello per comprendere il meccanismo dei flagelli e per la ricerca nel campo della genetica molecolare.

È stato condotto un esperimento per coltivare Bacillus subtilis in condizioni prossime all'assenza di gravità per studiare i cambiamenti nel genoma della popolazione. Inoltre, questi batteri vengono utilizzati per studiare l'influenza della radiazione ultravioletta cosmica e la capacità degli organismi viventi di adattarsi ad essa. Prendendo come esempio i bacilli, si sta studiando la possibilità che i microrganismi sopravvivano nello spazio e le condizioni di altri pianeti, in particolare Marte.

una breve descrizione di

Come si vede chiaramente nella foto, il bastoncino di fieno ha una forma diritta, allungata con estremità smussate e arrotondate, ed è solitamente incolore. Il diametro del batterio è in media di 0,6 µm (0,0006 mm), la lunghezza varia da 3 a 8 µm (0,003-0,008 mm). Con tali dimensioni, puoi esaminarlo e scattare una foto utilizzando un moderno microscopio scolastico. I bacilli sono mobili grazie alla presenza di flagelli. Crescono su tutta la superficie della cellula, come puoi vedere nella foto.

Questi batteri, essendo prevalentemente aerobi, necessitano di ossigeno molecolare per funzionare. Sebbene alcuni ceppi siano in grado di passare alla respirazione priva di ossigeno (anaerobi facoltativi).

Il batterio appartiene tradizionalmente ai microrganismi del suolo. Dal terreno arriva alle foglie delle piante, alla frutta e alla verdura. Ma si trova anche nella polvere aerodispersa e nell'acqua. Fa parte della normale microflora intestinale degli animali e dell'uomo. Si sviluppa bene ad una temperatura di +5°...+45°C, l'intervallo ottimale è 25-30°C.

Dalle foto disponibili potete verificare che si presentano così:

• sulla superficie dei liquidi è presente una pellicola sottile con una tinta biancastra;
• su supporti densi – un rivestimento vellutato con rughe sottili e bordi ondulati; può essere incolore, grigiastro o rosa.

Riproduzione e sporulazione

Il Bacillus subtilis, come altri batteri, si riproduce mediante la semplice divisione longitudinale della cellula a metà. , formatisi dopo tale divisione, rimangono spesso collegati tra loro da un filo sottile. Tali fili sono facilmente distinguibili nella foto.

Le cellule che si sviluppano dalle spore e i loro primi discendenti sono immobili. La capacità di muoversi appare solo nelle generazioni successive.

Nutrizione

Alcuni microbi, ad esempio il batterio lattico plantarum (Lactobacillus plantarum), inibiscono lo sviluppo del Bacillus subtilis. Il bacillo del fieno serve da cibo per i protozoi. Quindi, l'inizio di una delle catene alimentari si presenta così: bacillo di fieno - pantofola ciliata - mollusco - pesce, ecc. fino alla persona.

I metodi di “caccia” tra i protozoi differiscono. Ad esempio, nell'ameba (Amoeba) le escrescenze si formano e scompaiono costantemente ambiente interno cellule (pseudoplodia o pseudoploidia). Con essi circonda la vittima e lo trascina all'interno della gabbia. E, ad esempio, il ciliato della pantofola ha una bocca cellulare (citostoma) per assorbire il cibo. Nella foto è visibile come una depressione sul corpo. Con l'aiuto delle ciglia che crescono accanto ad esse e si uniscono in strutture complesse, l'acqua viene spinta nella bocca insieme ai batteri in essa contenuti. I ciliati si trovano vicino sostanze chimiche che evidenziano.

Patogenicità

Secondo la maggior parte delle classificazioni, il Bacillus subtilis non è considerato patogeno per l'uomo e gli animali. Aiuta a digerire il cibo, scomponendo proteine ​​e carboidrati e combatte la microflora patogena dell'intestino e della pelle.

Gli scienziati hanno scoperto che tra i batteri presenti in una ferita umana sono sempre presenti i bacilli. Producono enzimi che distruggono i tessuti morti, antibiotici che inibiscono i microbi patogeni e hanno persino un lieve effetto antiallergico. È stato dimostrato che questo bacillo sopprime lo sviluppo dei principali agenti causali delle infezioni chirurgiche.

Tuttavia, ci sono anche effetti negativi di questo batterio:

• a volte provoca allergie, spesso espresse come eruzioni cutanee sul corpo umano;
• alcuni ceppi possono causare avvelenamento del cibo dopo aver mangiato cibo che è stato rovinato da loro;
• può causare gravi infezioni agli occhi persona.

Utilizzo

Bacillus subtilis è il principale ingrediente attivo di molti farmaci. Sono usati per le infezioni intestinali acute nei bambini, per la disbiosi intestinale, in periodo postoperatorio per la prevenzione della suppurazione, ecc.

Molto spesso, la base dei farmaci è il ceppo di Bacillus subtilis 534 (il farmaco Sporobacterin) o il ceppo di Bacillus subtilis 3H ottenuto selettivamente da esso (il farmaco Bactisporin). Il ceppo 31 viene utilizzato anche in farmacologia, ad esempio nella produzione del farmaco Biosporin. Tutti questi farmaci sono antimicrobici. Il loro valore è particolarmente grande nella lotta contro le infezioni batteriche, quando il paziente, per un motivo o per l'altro, non può assumere antibiotici.

Il fieno Bacillus è incluso anche in molti integratori alimentari. Ad esempio, Supradin Kinder gel, Vetom, Baktistatin e altri.

È la base di molte preparazioni animali. Questi sono Bakterin-SL, Endosporin, Proteksin, Enterobacterin e altri. Sono utilizzati con successo nel bestiame, nel pollame e nella piscicoltura per combattere batteri patogeni, tenie e per migliorare l'immunità.

Esiste un gruppo separato di farmaci a base di Bacillus subtilis per la produzione agricola: Alirin-B, Gamair, Fitosporin e altri. Il loro compito principale è proteggere le piante dalle malattie causate da batteri e funghi. Un indubbio vantaggio è la loro assoluta innocuità per l'uomo se ingeriti insieme alla frutta.

Il fieno Bacillus viene utilizzato anche per la fermentazione di avena e fagioli. In Giappone esiste un piatto tradizionale chiamato natto, a base di semi di soia fermentati. Per la loro fermentazione viene utilizzato un ceppo speciale di bastoncini: Bacillus natto. Il Natto viene prodotto anche dagli estratti supplementi nutrizionali e negli Stati Uniti è stato sviluppato il farmaco veterinario Glogen-8 a base di Bacillus natto.

Prodotto industrialmente bastone di fieno enzimi per la scomposizione delle proteine ​​(proteasi, amilasi). Pertanto, la proteasi è inclusa nei detersivi domestici, nonché nei prodotti per pulire le pelli dalle proteine ​​e dai grassi durante la vestizione.