Esame microscopico delle feci. Metodi qualitativi senza arricchimento. Studi elmintocoprologici qualitativi

Ershova I.B., Osychnyuk L.M., Mochalova A.A., Istituto statale "Stato di Lugansk Università di Medicina", Dipartimento di Pediatria con Infezioni Infantili.
L'articolo è stato pubblicato sulla rivista “Actual Infectology”, n. 2 (3), 2014.
Risorsa informativa “Casa editrice Zaslavsky” www.mif-ua.com

L'articolo descrive i metodi per diagnosticare le infestazioni da elminti: test microscopico, immunoenzimatico, sierologico, reazione a catena della polimerasi, diagnostica della biorisonanza, emoscanning, nonché strumentale (esame a ultrasuoni e raggi X, tomografia computerizzata) e laboratorio, che hanno un significato indiretto ( analisi clinica sangue, analisi del sangue per test di funzionalità epatica, analisi delle feci per disbatteriosi). Vengono descritti i vantaggi dei metodi, i loro svantaggi e l'affidabilità dei dati ottenuti. Vengono proposti questionari per i pazienti per identificare il rischio di infezione da elminti. Vengono descritti i vantaggi dei metodi, i loro svantaggi e l'affidabilità dei dati ottenuti. Vengono proposti questionari per i pazienti per identificare il rischio di infezione da elminti.

Gli elminti hanno impatto negativo sul corpo umano. Portano ad allergia, sviluppo di poliipovitaminosi, macro e microelementosi, compromissione dell'ematopoiesi e permeabilità vascolare, squilibrio ormonale. Le infezioni da elminti contribuiscono alla formazione malattie croniche(colecistite, colelitiasi, pancreatite, colite, diabete, asma bronchiale, dermatite atopica), disturbi psico-emotivi (fatica cronica, irritabilità, ansia, iperattività nei bambini), anemia, ecc. Con un'infestazione prolungata da elminti si può sviluppare un'immunodeficienza secondaria.

L'attenzione dei medici riguardo alle infezioni da elminti tra la popolazione è attualmente insufficiente e la prevenzione si riduce al trattamento dei pazienti infestati identificati.

Diagnosi di elmintiasi si basa su dati clinici, epidemiologici e di laboratorio. Segni come sindrome astenica, orticaria ricorrente, alterata rigenerazione della pelle e delle mucose, dermatite atopica difficile da trattare e sindrome broncoostruttiva, polilinfoadenopatia ed epatosplenomegalia origine sconosciuta, vegetazioni adenoidi di II-III grado, lingua “geografica”, appetito ridotto o selettivo, sedia instabile, può indicare la presenza di elminti.

Durante uno studio sierologico, viene determinata la presenza di anticorpi contro gli elminti (l'affidabilità è di circa il 60%): se si sospetta echinococcosi, cisticercosi, trichinosi, toxocariasi, vengono ampiamente utilizzate reazioni di emoagglutinazione indiretta, agglutinazione al lattice, fissazione del complemento e immunofluorescenza.
Non in tutti i casi, metodi di determinazione anticorpi specifici avere sufficiente specificità e affidabilità. La composizione antigenica dell'elminto dipende non solo dalla specie, ma anche dallo stadio; attraversando un complesso ciclo di sviluppo dall'uovo al adulto, gli elminti cambiano la loro composizione antigenica. Inoltre, gli anticorpi somatici vengono utilizzati nelle reazioni immunodiagnostiche e nel corpo dell'ospite vengono prodotti anticorpi principalmente contro gli escrementi e le secrezioni dell'elminto. Sensibilizzazione non specifica organismo, la comunanza di alcuni antigeni dei trematodi, dei protozoi e degli esseri umani crea un'elevata percentuale di reazioni false positive con titoli inferiori a quelli diagnostici affidabili.

Metodo per determinare l'utilizzo degli elminti reazione a catena della polimerasi è altamente specifico e altamente sensibile, ma a causa del suo costo elevato e della sua complessità non può essere utilizzato per lo screening quando, ad esempio, è necessario esaminare un gruppo di bambini provenienti da struttura per l'infanzia.

Il sistema immunitario non sempre reagisce (riconosce e distrugge) alla presenza di elminti nel corpo. Questo perché alcuni elminti hanno una capsula durevole e chimicamente resistente o sono rivestiti con una sostanza non riconosciuta sistema immunitario; localizzato nei tessuti più protetti reazioni infiammatorie, ad esempio, a midollo spinale; ne esistono molti tipi tratto digerente secernono antienzimi, che li salvano dalla morte; avere una lunga aspettativa di vita (anni, e talvolta fino alla morte della persona); si nutrono della glicolisi dei carboidrati netti; disporre di dispositivi quali ventose, ganci, ecc., che facilitano il fissaggio all'interno del corpo; molte specie lo hanno riproduzione sessuale, in cui avviene lo scambio informazioni genetiche, che porta ad un aumento della popolazione eterogenea, una diminuzione della vulnerabilità; Avere alto livello fertilità.

A ultrasonico , esame radiografico organi cavità addominale , tomografia computerizzata può essere identificato segni indiretti elmintiasi: epatosplenomegalia, irregolarità del parenchima del fegato e della milza dovute a piccoli segnali iperecogeni, aumento I linfonodi all'ilo della milza e agli stessi elminti (echinococchi, grovigli elminti intestinali eccetera.).

Emoscanning - ricerca qualitativa sangue utilizzando un potente microscopio a campo oscuro, puoi vedere lo stato delle cellule del sangue (forma, dimensione, attività, colore, ecc.), la presenza di elementi e sostanze non specifici - tutto ciò indica direttamente o indirettamente la presenza di elminti nel sangue corpo. L'immagine viene visualizzata sullo schermo del monitor utilizzando la videocamera incorporata nel microscopio. Questo metodo diagnostico è altamente affidabile.

Laboratorio indiretto segni elmintiasi possono verificarsi anemia, basofilia, eosinofilia, aumento dei livelli di aspartato aminotransferasi. Pertanto, con la toxocariasi, viene rilevata una reazione leucemoide degli eosinofili (oltre il 20%) sullo sfondo di una sindrome allergica persistente (dermatite atopica con forte prurito e resistenza a terapia tradizionale, asma bronchiale grave). Oppressione della normalità coli un test delle feci per la disbatteriosi può anche indicare una possibile elmintiasi.

Tenendo conto della prevalenza delle elmintiasi, offriamo questionario per determinare il rischio di infezione da elminti.

• Nuotare in corpi d'acqua d'acqua dolce.
• Non lavarsi le mani prima di mangiare con acqua calda e sapone.
• Bevi acqua da fonti non verificate.
• Mangiare lardo fatto in casa con strisce di carne.
• Mangi pesce leggermente salato?
• Mangi carne mediamente cotta (con sangue).
• Mangi caviale leggermente salato e non preparato in fabbrica?
• Non lavare uova di gallina con sapone.
• Non lavare banane, arance, mandarini prima di mangiarli.
• Concima il tuo giardino con letame.
• Mangia le verdure direttamente dal giardino.
• Mangi frutta e bacche direttamente dal giardino.
• Mangia i frutti caduti.
• Non versare acqua bollente su tutte le verdure per preparare le insalate.
• Conserva le carote nella sabbia presa dal cortile.
• Camminare a piedi nudi sull'erba.
• I membri della famiglia avevano infestazioni da elminti.
• La famiglia ha un cane o un gatto.

Per ogni risposta" SÌ" - 2 punti, " A volte" - 1, " NO" - 0. Con un punteggio di 0–5, la probabilità di infezione è trascurabile, 6–12 - l'infezione è possibile, 13–25 - alta probabilità, più di 25 punti - molto alta. Per gli ultimi due risultati, è necessario esame regolare ed eventualmente un trattamento preventivo.

Perché il manifestazioni cliniche le infezioni da elminti non sono sempre specifiche e nelle fasi iniziali - non specifiche, offriamo ai pazienti un questionario auto diagnosi elmintiasi.

• Al mattino c'è prurito nell'ano.
• Nausea al mattino quando si lavano i denti.
• Peeling delle dita delle mani o dei piedi con desquamazione di strati di pelle.
• Eruzione cutanea allergica, prurito cutaneo.
• Desquamazione e gonfiore nella zona delle palpebre.
• Aumento della fatica, letargia, sonnolenza.
• Aumento della sensazione di fame.
• Sensazione di disagio allo stomaco.
• Perdita di peso corporeo.
• Presenza di numerose malattie croniche d'organo tratto gastrointestinale, articolazioni, sistema broncopolmonare.
• Cattiva salute, mancanza di diagnosi ufficiale, cure inefficaci a lungo termine.
• Aumento periodico della temperatura, accompagnato da dolori muscolari e articolari.

Risposta " SÌ" Di almeno 2-3 domande indicano un'alta probabilità di infezione da elminti.

CONCLUSIONI

1. Acceso palcoscenico moderno NO metodi di laboratorio test per le elmintiasi, affidabili al 100%.

2. Il test della polimerasi ha la massima affidabilità nella diagnosi dell'elmintiasi reazione a catena e diagnostica della biorisonanza.

BIBLIOGRAFIA

Esame delle feci

La microscopia viene inizialmente eseguita a basso ingrandimento (X80). I protozoi possono essere sostituiti dalla loro più forte rifrazione della luce e alcune specie possono essere sostituite dal loro movimento o dal cambiamento di forma. Un oggetto notato a basso ingrandimento viene esaminato con un ingrandimento di 400 o 600. In assenza di esperienza, la visualizzazione degli strisci dovrebbe essere eseguita immediatamente ad alto ingrandimento, il che, tuttavia, aumenta significativamente il tempo di studio del farmaco. La visualizzazione delle pennellate ad alto ingrandimento dovrebbe essere eseguita con un'illuminazione più forte, regolandola utilizzando un condensatore.

Caratteristiche differenziali singole specie le amebe in uno striscio nativo sono la forma e le dimensioni del corpo, la visibilità del nucleo, la natura della formazione degli pseudopodi, il movimento, la divisione del citoplasma in ecto- ed endoplasma, la natura delle inclusioni (eritrociti fagocitati, eccetera.). Quando si differenziano le specie flagellate: la dimensione e la forma del corpo, il numero di flagelli, la natura del movimento, la presenza o l'assenza di una membrana ondulata. Segni specifici balantidia sono dimensioni, forma del corpo, movimento, ciglia, citostoma, ecc.

Principale segno distintivo le forme vegetative dei protozoi allo stato vivente servono da movimento. Trovato in strisci vari tipi formazioni immobili - fibra vegetale, fibre muscolari, spore, funghi, ecc. Non dovrebbero essere presi in considerazione nella diagnosi protozoologica.

Il metodo dello striscio nativo è semplice e accessibile a qualsiasi laboratorio. Permette, in presenza di forme tissutali di amebe dissenteriche con eritrociti fagocitati, di mettere completamente diagnosi accurata dissenteria amebica e se vengono rilevati balantidia e lamblia - una diagnosi di balantidiasi e giardiasi.

Colorazione degli strisci con la soluzione di Lugol . Questa colorazione viene utilizzata per diagnosticare i protozoi tramite cisti. Viene utilizzato nello studio delle feci formate, semiformate e mollicce.

Per preparare uno striscio, l'estremità di un bastoncino di legno viene macchiata con le feci e lavata in una goccia di soluzione di iodio (J - 1,0 g, KJ - 2 g, acqua distillata - 100 ml) applicata su un vetrino fino a ottenere un'emulsione uniforme. ottenuto. La preparazione viene coperta con un vetrino coprioggetto e dopo 3 – 5 minuti. microscopio. Lo striscio deve essere sufficientemente trasparente da poter essere esaminato alla luce trasmessa.

Tra i resti cibo indigesto, spore, funghi, batteri iodofili, cisti protozoarie, di colore marrone o giallo-verdastro, si distinguono per forma, dimensione, caratteristica di ciascuna specie rigorosamente definita, contorni distinti dei bordi, presenza di un liscio, trasparente, a doppio circuito guscio, il contenuto del citoplasma, nonché la presenza di nuclei con una struttura vagamente definita. Nelle cisti dell'ameba sono visibili vacuoli di glicogeno di colore marrone (marrone scuro). Il grado di colorazione di questi vacuoli e il contorno dei loro confini variano nelle cisti protozoarie della stessa specie, a seconda della loro maturità.

I metodi di ricerca elmintologica sono divisi in diretti e indiretti. Metodi diretti: rilevamento degli elminti stessi, dei loro frammenti, uova, larve nelle feci, urina, secrezioni duodenali, espettorato, muco nasale e vaginale, contenuto di spazi subungueali, pezzi di tessuto sottoposti a biopsia. Metodi indiretti: identificazione dei cambiamenti secondari che si verificano nel corpo umano a seguito dell'attività vitale del parassita, reazioni sierologiche, ricerca generale sangue, urina. I metodi più comuni per l'esame delle feci sono elminto-ovoscopico e protozooscopico. Durante la diagnosi, è impossibile identificare uova o larve di tutti i tipi di elminti che vivono apparato digerente persona. Pertanto, quando si utilizza il metodo di flottazione, le uova di trematodi e, in alcuni casi, le uova di nematodi non fecondate non galleggiano nella pellicola superficiale (a causa del loro elevato peso specifico). È molto raro trovare uova di ossiuri e oncosfere di taeniidi nelle feci, che vengono rilevate utilizzando metodi di ricerca speciali: raschiamento dalle pieghe perianali per ossiuri e taeniidi, metodi di sedimentazione per trematodi (uova di opistorchidi, ecc.). Pertanto, per un esame mirato di un paziente per infezioni da elminti, il medico di riferimento deve indicare su quali elminti concentrarsi (diagnosi), che consentirà all'assistente di laboratorio di scegliere la tecnica adeguata per identificare questo tipo di elminti. Feci prelevate da luoghi differenti le feci in una quantità di almeno 50 grammi (cucchiaino) in un contenitore di vetro pulito devono essere inviate al laboratorio entro e non oltre 24 ore dalla defecazione ed esaminate il giorno del ricevimento. Se è necessario conservare le feci fino al Il giorno dopo viene riposto in un luogo freddo (0-4°C) oppure riempito con uno dei conservanti. Prima dell'esame, le feci vengono mescolate con un bastoncino in modo che le uova di elminti siano distribuite uniformemente nella massa totale. Se nel preparato vengono trovate uova di elminti, la visione non viene interrotta, perché ci può essere una doppia o tripla invasione. Il monitoraggio dell'efficacia del trattamento delle infezioni da elminti viene effettuato esaminando le feci per le uova di elminti 2-3 settimane o 2-3 mesi dopo il trattamento, a seconda dell'elminto rilevato. I metodi macroscopici vengono utilizzati per rilevare interi elminti maturi o i loro frammenti nelle feci ad occhio nudo o utilizzando una lente d'ingrandimento manuale. Spesso si possono osservare ossiuri che strisciano attivamente sulla superficie delle feci dopo la defecazione; i nematodi vengono escreti nelle feci; A volte le persone stesse notano il passaggio degli elminti. Nei pazienti affetti da difillobotriasi possono essere rilasciati frammenti di strobili della tenia (sotto forma di "tagliatelle"), e in quelli infetti da taeniidi (tenia di maiale o bovina), spesso segmenti di elminti si staccano con le feci (sotto forma di "tenia bianca") ritagli") o strisciano fuori attivamente ano. Il metodo macroscopico è quello principale diagnosi differenziale taeniasi e taeniarincosi (in combinazione con un sondaggio). Tra i metodi macroscopici speciali, viene utilizzato il metodo del lavaggio sequenziale delle feci. Le feci vengono mescolate in acqua per ottenere una sospensione uniforme, dopodiché buona illuminazione vengono attentamente esaminati individualmente in piccole porzioni in cuvette fotografiche nere o su fondo scuro in piastre Petri. Utilizzare una pinzetta o un ago da dissezione per rimuovere tutte le particelle bianche sospette, enti di grandi dimensioni, sospetto per frammenti di elminti, ed esaminarli sotto una lente d'ingrandimento tra due vetrini. Piccoli elminti o teste di cestodi vengono esaminati sotto una lente d'ingrandimento in una goccia di glicerina o al microscopio. Quando si utilizza questo metodo per diagnosticare i segmenti di maiale, tenia bovina e tenia larga, i segmenti lavati vengono posti tra due bicchieri e, guardando la luce con una lente di ingrandimento o un microscopio a basso ingrandimento, la specie viene determinata dalla struttura del l'utero (in un segmento maturo tenia di maiale 8-12 rami laterali si estendono dal tronco centrale, e tenia bovina 18-32, più spesso 28-32, nella tenia larga i segmenti sono più larghi e l'utero al centro ha la forma di una “rosetta”). Se l'utero è difficile da vedere, può essere prima conservato per un po 'in una soluzione di glicerina al 50%, dopo di che si possono vedere chiaramente anche i tronchi vuoti dell'utero. Quando si identificano questi cestodi dalla struttura delle teste staccate, vengono accuratamente posti con il collo in una goccia di glicerina tra i vetrini (o coperti con un coprioggetto) e, senza spremere, esaminati al microscopio a basso ingrandimento.

I metodi microscopici si dividono in semplici, complessi e speciali.

Quelli semplici includono i metodi di striscio nativo, striscio nativo con soluzione di Lugol, metodi di striscio spesso sotto cellophane secondo Kato, torsione (secondo Shulman) e raschiamento perianale.

I metodi complessi sono più efficaci e si basano sulla concentrazione di uova nei preparati. Implicano il pretrattamento delle feci con reagenti liquidi, a seguito dei quali le uova di elminti precipitano o galleggiano sulla superficie del liquido.

A metodi complessi i metodi di arricchimento includono:

a) flottazione (quando il peso specifico delle uova è inferiore al peso specifico della soluzione salina e le uova galleggiano nella pellicola superficiale);

b) sedimentazione (quando il peso specifico delle uova è maggiore del peso specifico soluzioni saline e le uova si depositano nel sedimento).

Metodi speciali per rilevare uova e larve di elminti, cisti e forme vegetative di protozoi sono metodi di raschiatura, flottazione, sedimentazione, larvoscopia, protozooscopia, esame della bile e metodi di colorazione di strisci di feci, espettorato, ecc.

Molto spesso, l'infezione da elminti si verifica attraverso cibo, acqua e mani non lavate contaminati.

Metodi diretti e indiretti per la diagnosi delle elmintiasi

Ad oggi sono stati sviluppati molti metodi diagnostica elmintiasi, ma tutti possono essere divisi in due grandi gruppi: diretto e indiretto. I metodi diagnostici diretti includono quegli studi che consentono di identificare direttamente gli elminti, i loro frammenti, larve o uova. I metodi indiretti per diagnosticare l'elmintiasi si basano sull'identificazione dei cambiamenti secondari caratteristici di un particolare tipo di elmintiasi.

I metodi diretti più popolari per diagnosticare le elmintiasi sono i metodi di ricerca macro e microelmintoscopici.

Metodi di ricerca macroelmintoscopica

Domande dei lettori

18 ottobre 2013, 17:25 Buon pomeriggio. È da quasi un anno che sento prurito intorno all'ano. Nessuno Dolore. Dimmi chi contattare e cosa potrebbe essere? Grazie

Metodi di ricerca microelmintoscopica

Metodi di ricerca immunologica

La diagnosi delle infezioni da elminti si basa sul rilevamento nel siero del sangue di anticorpi specifici contro determinati elminti. Per ricerca immunologica vengono utilizzati il ​​metodo di emoagglutinazione indiretta, il test immunoenzimatico, l'immunoelettroforesi, l'immunoassorbimento e altri metodi sierologici di analisi del sangue.

I metodi di ricerca immunologica vengono utilizzati per diagnosticare l'alveococcosi, l'echinococcosi, la cisticercosi, l'ascariasi, la schistosomiasi e altre elmintiasi.

Analisi del contenuto biliare e duodenale

Biopsia

Diagnostica dell'elettropuntura

La diagnostica dell'elettropuntura si basa sull'analisi della resistenza della pelle quando irritata da deboli elettro-shock. La diagnostica dell'elettropuntura per sospetta elmintiasi può essere eseguita in due modi: utilizzando il metodo Voll o utilizzando il test di risonanza.

Metodi di ricerca strumentale

Viene eseguito anche per l'elmintiasi ecografia, FEDGS e diagnostica informatica. Questi metodi consentono di determinare l'entità del danno causato dagli elminti e di determinare le condizioni dei singoli organi.

Materiale per la ricerca: feci, urina, contenuto duodenale, espettorato, sangue, pelle, dendrite perianale, tessuto muscolare.

I metodi di ricerca microscopici si basano sul rilevamento di uova e larve di elminti. A seconda degli obiettivi dello studio, si dividono in qualitativi e quantitativi.

1. Metodo dello striscio spesso Kato. Il principio del metodo è che le uova di elminto vengono trovate in uno spesso strato di feci, schiarite con glicerina e colorate con verde malachite. Il metodo è più efficace contro l'ascariasi, la tricocefalosi, la difillobotriasi, la teniasi e, in misura minore, contro l'anchilostoma e la tenia nana.

3. Metodo di arricchimento(Kofoida - Barbera) si basa sul principio delle uova che galleggiano in una soluzione satura sale da tavola. Puoi trovare uova di trematodi, tenie, oncosfere, tenidi e uova di nematodi non fecondate.

4. Metodo Kalantaryan- il principio è lo stesso del precedente, ma come soluzione di flottazione viene utilizzata una soluzione satura di nitrato di azoto.

5. Ci sono metodi speciali esame delle feci per la presenza di fasciliasi, strongiloidosi, anchilostoma.

6. Metodo prianale e perianale-rettale diagnosi di enterobiasi. La raschiatura viene effettuata al mattino (prima di andare in bagno e prima di defecare) o la sera durante il sonno.

Molto importante da sapere